譚慶輝，曹 琰，熊德友，沈朝建

（1. 湖南省婁底市動(dòng)物疫病預(yù)防控中心，湖南婁底 417000；2. 湖南省新化縣畜牧水產(chǎn)局，湖南新化 417600；3.中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

豬流行性腹瀉 （Porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的一種常見的，急性、接觸性、高度流行性豬腸道病毒傳染病，其主要臨床癥狀是水樣腹瀉、厭食、嘔吐和體重降低，臨床變化和癥狀與豬傳染性胃腸炎極為相似[1-3]。PEDV主要分為4種類型：亞洲經(jīng)典株、亞洲變異株、美洲INDELs毒株及美洲強(qiáng)毒株[4]，主要通過接觸處于潛伏期豬只或患病豬只及其排泄物散播，也可通過污染的飼料、飲水、工具、運(yùn)輸車輛及環(huán)境傳播，患病母豬還可通過乳汁傳播到仔豬。場(chǎng)內(nèi)豬只感染后，5～6 d排毒達(dá)到高峰，14～28 d仍持續(xù)排毒。接觸發(fā)病豬只及其污染的排泄物是PEDV最重要的傳播方式。PED一年四季均可發(fā)生，但主要發(fā)生在冬季，不同日齡和品種的豬只均可感染。1周齡仔豬對(duì)PEDV高度易感，感染后死亡率高達(dá)85%～100%；1周齡以上豬只發(fā)病率較高，但死亡率很低，可導(dǎo)致生產(chǎn)性能顯著下降[5-7]。

2017年12月9日，湖南省婁底市某種豬擴(kuò)繁場(chǎng)約400頭育肥豬出現(xiàn)腹瀉疫情。為查明病因，分析可能存在的風(fēng)險(xiǎn)因素，以便提出針對(duì)性防控措施，12月10日湖南省婁底市動(dòng)物疫病預(yù)防控中心成立調(diào)查組，赴現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行了暴發(fā)調(diào)查。

1 方法

1.1 病例定義

1.1.1 可疑病例 2017年12月1-30日，該場(chǎng)內(nèi)出現(xiàn)水樣腹瀉、嘔吐、厭食、體溫基本正常等癥狀中兩項(xiàng)及以上的豬只。

1.1.2 確診病例 經(jīng)熒光RT-PCR方法檢測(cè)，糞便樣品呈PEDV核酸陽性的可疑病例。

1.2 調(diào)查方法

1.2.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查 實(shí)地查看生產(chǎn)記錄，與養(yǎng)殖場(chǎng)管理人員座談，詳細(xì)了解發(fā)病經(jīng)過、免疫、治療、日常飼養(yǎng)管理、生物安全措施、飼料人員進(jìn)出記錄和生豬調(diào)入調(diào)出等信息；進(jìn)入豬場(chǎng)生產(chǎn)區(qū)，觀察養(yǎng)殖環(huán)境、圈舍衛(wèi)生狀況，同時(shí)搜索可疑病例；簡(jiǎn)單繪制發(fā)病欄舍布局，了解疫情空間分布。

1.2.2 抽樣檢測(cè) 按照基于風(fēng)險(xiǎn)的抽樣策略，現(xiàn)場(chǎng)采集可疑病例腹瀉樣品，用熒光RT-PCR方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，并對(duì)病例分布情況進(jìn)行描述；用Epi Info 7.2軟件分析數(shù)據(jù)，尋找相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素。

2 結(jié)果

2.1 基本情況

該規(guī)模豬場(chǎng)位于湖南省新化縣上梅鎮(zhèn)（111.288566 E，27.775648N），位置相對(duì)獨(dú)立，周邊3 km范圍內(nèi)無其他養(yǎng)豬場(chǎng)戶，距最近的縣級(jí)公路1 km（圖1）。該豬場(chǎng)始建于2008年，建有圍墻，2015年7月被當(dāng)?shù)匾患绎暳瞎臼召徍筮M(jìn)行了改擴(kuò)建，2016年8月改建完成，設(shè)計(jì)規(guī)模為存欄600頭母豬，定位為母豬擴(kuò)繁場(chǎng)，為公司配套育肥場(chǎng)提供二元母豬。全場(chǎng)分為辦公區(qū)和生產(chǎn)區(qū)，兩區(qū)完全隔離。生產(chǎn)區(qū)現(xiàn)有欄舍14棟，其中母豬舍8棟、公豬舍1棟、保育舍2棟、育肥舍2棟、隔離舍1棟。

圖1 豬場(chǎng)地理位置衛(wèi)星圖

豬場(chǎng)于2016年11月至2017年6月先后分3批引種新美系偽狂犬病毒陰性原種母豬600頭。2017年5月豬群開始產(chǎn)仔，至調(diào)查時(shí)全場(chǎng)存欄生豬約2 780頭，其中能繁母豬583頭、公豬11頭。全場(chǎng)現(xiàn)有生產(chǎn)員工13人，其中技術(shù)員3人、母豬飼養(yǎng)員7人、保育飼養(yǎng)員2人、育肥飼養(yǎng)員1人。

2.2 管理情況

場(chǎng)內(nèi)生產(chǎn)管理比較規(guī)范，實(shí)行“場(chǎng)長-部門主管-飼養(yǎng)員”三級(jí)管理。生活區(qū)為廚房和行政辦公區(qū)，每餐由專人送至生產(chǎn)區(qū)；生產(chǎn)區(qū)實(shí)行分區(qū)管理，飼養(yǎng)員分棟飼養(yǎng)，不得串崗；所有員工按生產(chǎn)指標(biāo)考核發(fā)放工資；有比較完善的生物安全和生產(chǎn)管理制度。實(shí)施豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病、口蹄疫等常規(guī)疫苗的程序免疫，沒有免疫流行性腹瀉、輪狀病毒等腹瀉類疫苗。豬場(chǎng)每半年進(jìn)行1次群體抽樣抗體檢測(cè)，以評(píng)估豬群健康狀況，及時(shí)調(diào)整免疫程序。發(fā)病前該場(chǎng)為偽狂犬病陰性場(chǎng)和藍(lán)耳病穩(wěn)定場(chǎng)，無重大動(dòng)物疫情發(fā)生，生產(chǎn)基本穩(wěn)定。

2.3 人、物流動(dòng)情況

發(fā)病前1周內(nèi)，場(chǎng)內(nèi)生產(chǎn)人員沒有外出情況。飼料由公司配送車輛運(yùn)輸；車輛不進(jìn)入場(chǎng)內(nèi)生產(chǎn)區(qū)，每次運(yùn)送飼料到場(chǎng)后進(jìn)行噴霧消毒；最近一次運(yùn)輸是在12月1日，最近一次的售豬行為發(fā)生在12月5日，銷售了32頭育肥豬，參與人員為場(chǎng)長以及第12棟和13棟育肥舍飼養(yǎng)員周某和統(tǒng)計(jì)員。賣豬過程中飼養(yǎng)員周某未嚴(yán)格按照操作流程，對(duì)賣豬車輛進(jìn)行消毒，且與裝豬車有過直接接觸；趕豬后僅對(duì)走豬道和場(chǎng)地進(jìn)行了簡(jiǎn)單沖洗和消毒。根據(jù)周某回憶，事后與其負(fù)責(zé)飼養(yǎng)的13棟豬舍育肥豬有過直接接觸，12月8日第13棟靠近門口欄舍的豬只開始發(fā)病。

2.4 診斷情況

2.4.1 臨床癥狀 病例臨床表現(xiàn)為水樣腹瀉，糞便呈灰黃色或灰色（圖2）；豬群打堆，采食量下降明顯。

2.4.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 現(xiàn)場(chǎng)采集可疑病例新鮮糞便樣品送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，結(jié)果為豬傳染性胃腸炎病毒核酸陰性、豬輪狀病毒核酸陰性、PEDV核酸陽性（圖3）。

圖2 病例臨床水樣腹瀉

圖3 實(shí)驗(yàn)室熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果

2.5 病例分布

2.5.1 時(shí)間分布 2017年12月8日出現(xiàn)首例病例，當(dāng)天發(fā)病8頭，但無死亡；9日新增可疑病例57例，期間用抗生素治療無效；10日開始采取其他干預(yù)措施，11日新增病例157例，病例數(shù)量達(dá)到高峰；之后疫情開始緩和，并持續(xù)了10 d，累計(jì)發(fā)病603例，全程無死亡（圖4）。

圖4 疫情流行曲線

2.5.2 空間分布 豬場(chǎng)欄舍建在山坡上，呈階梯狀分布，產(chǎn)房和飼料倉庫位于最上方；棟舍之間建有綠化隔離帶；種豬舍、產(chǎn)仔舍、保育舍、育肥舍實(shí)行分區(qū)管理。所有病例均發(fā)生在育肥舍。育肥舍位于下風(fēng)區(qū)且與售豬室和裝豬臺(tái)緊鄰，直線距離不足15 m（圖5）。第13棟育肥舍靠近門口的兩欄豬只最先發(fā)病，然后第12棟育肥舍豬只發(fā)病。兩棟育肥舍病例均先從門口出現(xiàn)，然后是欄舍內(nèi)。兩棟育肥舍總存欄育肥豬748頭，發(fā)病603頭，襲擊率為80.6%。

圖5 病例的空間分布

2.5.3 群間分布 所有病例均出現(xiàn)在第12棟和13棟育肥舍中的大豬群，母豬、公豬、產(chǎn)房仔豬和保育豬無發(fā)病。兩棟育肥舍豬只體重在30～90 kg之間。第13棟欄內(nèi)面積約240 m2，存欄394頭；8日最開始發(fā)病，累計(jì)發(fā)病351頭，襲擊率為89.1%。第12棟欄內(nèi)面積約265 m2，存欄354頭；9日開始發(fā)病，累計(jì)發(fā)病252頭，襲擊率為71.2%。第13棟豬舍內(nèi)豬只發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是第12棟的1.251倍；30～50 kg體重豬只的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是5～90 kg體重豬只的1.279倍（表1）。

3 病因分析

3.1 病因假設(shè)

根據(jù)調(diào)查結(jié)果，綜合病例臨床癥狀、流行病學(xué)特征和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，認(rèn)為引起該豬場(chǎng)疫情的病原為PEDV。

表1 病例群間分布統(tǒng)計(jì)

3.2 病因分析

該豬場(chǎng)為當(dāng)?shù)匾患掖笮惋暳瞎鞠聦儇i場(chǎng)，飼料為公司直供，飼料營養(yǎng)均衡合理。飼料車進(jìn)場(chǎng)前有專人噴霧消毒，因此由飼料導(dǎo)致疫病發(fā)生的可能性很小。生產(chǎn)員工均生活在場(chǎng)內(nèi)生產(chǎn)區(qū)，最近一周無休假外出情況，基本可以排除人為帶入病原的可能。

場(chǎng)內(nèi)生物安全管理制度比較完善，但是有個(gè)別飼養(yǎng)員未按規(guī)定嚴(yán)格執(zhí)行。12月5日豬場(chǎng)銷售了一批育肥豬，飼養(yǎng)員未對(duì)裝豬車進(jìn)行嚴(yán)格消毒。PED的潛伏期一般為5～8 d，從發(fā)病首日（12月8日）向前推算，此次售豬行為將病原傳入的可能性極大。受市場(chǎng)生豬價(jià)格波動(dòng)的影響，裝豬車輛經(jīng)常出入各大豬場(chǎng)和屠宰場(chǎng)，成為病毒重要的傳播器。雖然裝豬車不能進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)，但是在銷售過程中人員通過接觸污染的車輛，極易將病毒傳入豬群內(nèi)。通過調(diào)查了解到在該次售豬中飼養(yǎng)員周某未嚴(yán)格執(zhí)行豬場(chǎng)生物安全制度，導(dǎo)致其負(fù)責(zé)飼養(yǎng)的豬群最先發(fā)病。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，疫情暴發(fā)時(shí)當(dāng)?shù)卣幱诤鼻忠u期，低溫凍雨，日平均氣溫在2 ℃左右，而育肥舍沒有任何保溫措施，室內(nèi)溫度在6～8 ℃；飼養(yǎng)員周某為了提高室內(nèi)溫度，門窗緊閉，基本沒有通風(fēng)，導(dǎo)致氨氣、硫化氫等氣體嚴(yán)重超標(biāo)。由于該公司配套母豬場(chǎng)建設(shè)進(jìn)度緩慢，使得場(chǎng)內(nèi)育肥舍壓欄嚴(yán)重，發(fā)病時(shí)豬只密度非常大，平均只有0.6～0.7 m2/頭，而傳統(tǒng)欄舍70 kg左右的豬欄內(nèi)面積需達(dá)到1 m2/頭。衛(wèi)生環(huán)境差，導(dǎo)致豬群抵抗力下降，加快了疫病在欄舍內(nèi)的傳播。由于產(chǎn)房和保育舍保溫設(shè)備完善，場(chǎng)內(nèi)分區(qū)管理嚴(yán)格，因而疫情沒有擴(kuò)散該處。此外，發(fā)病豬舍位于全場(chǎng)的最低處，處于下風(fēng)區(qū)，與周邊豬舍有3 m左右的高度差，這在一定程度上防止了病毒的擴(kuò)散。

4 干預(yù)措施

介入調(diào)查當(dāng)天，全場(chǎng)立即采取緊急防控措施，在第12棟和13棟育肥舍周圍設(shè)臨時(shí)隔離屏障，通道鋪墊一層0.5 cm的生石灰粉；管控物料流向，禁止豬只、物料、工具流動(dòng)；全場(chǎng)暫停非必須的轉(zhuǎn)群；全場(chǎng)員工禁止串場(chǎng)，育肥舍飼養(yǎng)員隔離居住，限定活動(dòng)范圍；對(duì)飼料運(yùn)輸車輛和進(jìn)入豬場(chǎng)人員實(shí)行嚴(yán)格的生物安全措施；做好欄舍保溫措施，緊急采購保溫設(shè)備，提高發(fā)病欄舍內(nèi)溫度，把溫度控制在15℃以上，同時(shí)適當(dāng)通風(fēng)換氣。對(duì)發(fā)病豬群視情況限制飼喂，同時(shí)保障足夠的飲水，并在水中添加電解多維、補(bǔ)液鹽、葡萄糖、阿莫西林等，防止脫水。對(duì)健康豬群，在飼料中添加黃芪多糖、復(fù)合維生素等提高群體抵抗力。通過這些綜合干預(yù)措施，疫情很快得到了控制，12月18日以后無新病例出現(xiàn)。

5 結(jié)論

此次疫情累計(jì)發(fā)病603例，襲擊率為80.6%（603/748）。經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，證實(shí)造成此次腹瀉疫情的主要病原為PEDV。結(jié)合病例分布特點(diǎn)和病因分析認(rèn)為：裝豬車輛消毒不嚴(yán)以及場(chǎng)內(nèi)飼養(yǎng)員生物安全防范不嚴(yán)，導(dǎo)致病毒傳入豬群；豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理不善、缺乏保溫措施、養(yǎng)殖密度大、通風(fēng)不良等因素，使豬群抵抗力下降，從而加速了病毒在欄內(nèi)的傳播。通過采取限制移動(dòng)、消毒、通風(fēng)與保溫、保障飲水等措施，疫情得到了有效控制。

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