高淑平

（陽春市人民醫(yī)院，廣東陽春 529600）

尋常型銀屑?。≒soriasis vulgaris，PV）是銀屑病最常見的一種類型，屬臨床常見易復發(fā)的慢性炎癥性皮膚病之一，目前發(fā)病機制尚不完全清楚[1]。近年多數(shù)研究者認為PV由T淋巴細胞功能紊亂和輔助性T細胞（Th）細胞過度活化所致的自身免疫性疾病，如Th1/Th2比例失調(diào)是導致銀屑病的重要原因之一[2]。Th9細胞是近期發(fā)現(xiàn)的一類新型效應性CD4+亞群效應性T細胞，參與了人體多種免疫性疾病的發(fā)生過程[3]。白細胞介素（IL）-9主要是由T淋巴細胞分泌，能促進體內(nèi)的T細胞和肥大細胞增殖，是機體自身免疫調(diào)節(jié)的重要因子[4]。研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者Th9細胞百分比和IL-9含量較正常人群顯著升高，且二者與銀屑病皮損面積和嚴重程度指數(shù)（PASI）評分呈顯著正相關(guān)[5]。為了進一步探討Th9及IL-9在銀屑病中的作用，本研究測定了PV患者外周血Th9及IL-9水平，并分析不同病情程度和分期下外周血Th9及IL-9水平的變化，進一步驗證二者在銀屑病發(fā)病機制中的作用，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年5月—2017年11月間在本院就診的PV患者104例（PV組）作為研究對象。PV診斷根據(jù)《中國臨床皮膚病學》[6]標準：①紅色丘疹分布在頭皮、軀干、四肢伸側(cè)皮膚上；②皮疹形狀不規(guī)則，邊界清楚；③皮疹基底浸潤明顯，刮除紅膜可見小出血點；④以紅色炎性斑片為主，上覆多層銀白色鱗屑，下有一層光亮薄膜；⑤合并瘙癢。尋常型銀屑病病情分級診斷參照PASI評分[7]，重：PASI評分＞12 分；中：PASI評分 6～12 分；輕：PASI評分＜6分。納入標準：①符合尋常型銀屑病診斷者；②年齡18～65歲，性別不限；③近3個月內(nèi)未給予糖皮質(zhì)激素類藥物等相關(guān)治療者；④首次發(fā)病者；⑤取得患者知情，且簽署知情協(xié)議。排除標準：①伴其他類型皮膚病者；②妊娠或哺乳期婦女；③精神病或惡性腫瘤患者；④伴心、腦、肝、腎及造血系統(tǒng)等嚴重障礙者；⑤關(guān)節(jié)型、膿皰型、紅皮病型銀屑病者。其中男61例，女43例；年齡23～58歲，平均（40.66±7.40）歲；病程 9個月～3年，平均（2.03±0.31）年；病情分級[7]：重度：44 例；中度：39 例；輕度：21 例；PASI評分[7]：（26.77±4.01）分；病情分期[8]：活動期61例，穩(wěn)定期43例。選取同期在本院體檢健康志愿者50例為對照組，其中男31例，女19例；年齡 30～51歲，平均（41.05±7.22）歲；PV 組與對照組基本臨床資料（性別、年齡），同時PV組內(nèi)輕、中、重以及穩(wěn)定期、活動期患者的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會知情同意。

1.2 2組外周血Th9及IL-9水平 外周血采集：晨起空腹抽取2組受試者的外周靜脈血約3 mL，置于肝素抗凝管中，加入紅細胞裂解液，4 000轉(zhuǎn)/min室溫離心 5 min，磷酸鹽緩沖液（PBS）洗，棄上清，于-80℃保持待測。Th9應用流式細胞儀測定，IL-9采取雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定。

1.3 統(tǒng)計學處理 采取SPSS19.0統(tǒng)計軟件分析本組數(shù)據(jù)，計量數(shù)據(jù)以±s表示，2組間比較采用的是t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析；相關(guān)性分析采取Pearson直線相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 2組外周血Th9及IL-9水平比較 與對照組比較，PV組患者外周血Th9及IL-9水平明顯升高，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1 2組外周血Th9及IL-9的水平比較 （±s）

表1 2組外周血Th9及IL-9的水平比較 （±s）

組別 n Th9（%） IL-9（pg/mL）對照組 50 0.25±0.03 16.82±1.97 PV 組 104 0.92±1.03 52.75±5.81 t 6.700 56.672 P＜0.01 ＜0.01

2.2 不同分級PV患者外周血Th9及IL-9水平比較 中度分級PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于輕度分級患者（P＜0.01）；重度分級PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于輕度和中度分級患者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表2。

表2 不同分級PV患者外周血Th9及IL-9水平比較（±s）

表2 不同分級PV患者外周血Th9及IL-9水平比較（±s）

注：與輕度分級比較，aP＜0.01；與中度分級比較，bP＜0.01。

PV 分級 n Th9（%） IL-9（pg/mL）輕度 21 0.41±0.04 22.15±2.72中度 39 0.70±0.07a 46.98±5.33a重度 44 1.65±0.19ab 89.12±9.41ab

2.3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比較 活動期PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于穩(wěn)定期患者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表3。

表3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比較（±s）

表3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比較（±s）

PV 分期 n Th9（%） IL-9（pg/mL）穩(wěn)定期 43 0.45±0.05 32.77±3.64活動期 61 1.39±0.16 72.73±7.78 t 45.854 35.022 P＜0.01 ＜0.01

2.4 PV患者外周血Th9及IL-9水平與PASI評分的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析顯示，PV患者外周血Th9及IL-9水平與PASI評分均呈顯著正相關(guān)。見表4。

表4 PV患者外周血Th9及IL-9水平與PASI評分的相關(guān)性分析

3 討論

PV可發(fā)生于任何年齡，男女發(fā)病差異無統(tǒng)計學意義，據(jù)報道其發(fā)病率約為2%，目前其發(fā)病機制尚不明確，臨床缺乏根治療法，多數(shù)藥物僅能對癥治療，但停藥后病情易反復，對患者的身心健康和生活質(zhì)量造成了嚴重影響[9]。PV是公認的一種免疫細胞介導的慢性炎癥性皮膚病，多種免疫細胞參與PV的發(fā)生、發(fā)展，包括T淋巴細胞、樹突狀細胞、自然殺傷細胞等，其中CD4+T淋巴細胞在PV發(fā)生和發(fā)展階段的作用備受廣泛認可[10]。初始CD4+T淋巴細胞接受抗原刺激的信號，在不同的條件下可分化成各種T淋巴細胞亞群，如Th1型、Th2型、Th17型、Th22型、Th9型以及Treg型，這些亞型細胞具有獨特免疫作用，對人體的免疫狀態(tài)發(fā)揮了共同調(diào)節(jié)作用[11]。研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病的發(fā)生及皮損的持續(xù)存在與T淋巴細胞的過度活化及釋放的細胞因子異常聯(lián)系密切[12]。

Th9細胞作為CD4+T淋巴細胞亞型，其通過分泌不同細胞因子參與PV的發(fā)生發(fā)展近年備受關(guān)注。Th9細胞在轉(zhuǎn)化生長因子β、IL-4的作用下分泌IL-9、IL-10和IL-21，其中IL-9是其功能性細胞因子[13]。Schlapbach等[14]發(fā)現(xiàn)PV患者皮損中Th9細胞顯著升高，提示了Th9細胞可能參與該病的發(fā)生、發(fā)展過程。IL-9通過直接或間接作用于多種細胞的功能，誘導Th17細胞分化，介導機體的多種炎癥性疾病[9]。Singh等[15]發(fā)現(xiàn)IL-9及IL-9受體在銀屑病樣表現(xiàn)的K5.hTGF-b1轉(zhuǎn)基因動物皮損中表達顯著升高，注射抗IL-9抗體可使動物皮損中浸潤的炎性細胞顯著降低。胡小平等[16]采用RT-PCR檢測PV患者和健康者各424例的IL-9的基因拷貝數(shù)變異發(fā)現(xiàn)，PV患者的IL-9基因拷貝數(shù)較健康人基因拷貝數(shù)顯明顯增高，而IL-9基因拷貝數(shù)增加可能會增加對PV的易感性。因此，IL-9可能通過Th17細胞等因子介導在PV的形成、發(fā)展中發(fā)揮作用。

本研究結(jié)果顯示：與對照組比較，PV組患者外周血Th9及IL-9水平明顯升高。駱偉雄等[5]選取PV患者50例為研究對象，通過與50例健康者比較發(fā)現(xiàn)PV患者Th9細胞百分比和IL-9含量均顯著升高。本研究結(jié)果與上述報道基本一致。此外，本研究也證實，中度分級PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于輕度分級患者，重度分級PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于輕度和中度分級患者，活期PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯高于穩(wěn)定期患者。提示了PV患者外周血Th9及IL-9水平變化可能是評價其病情程度的有效指標。

PSAI評分是目前臨床評定PV皮損程度的有效指標之一，通過對患者的皮損面積、紅斑、鱗屑、瘙癢以及浸潤程度等參數(shù)進行客觀評價，再經(jīng)特定計算方式得出評分標準用于評價PV病情程度，分數(shù)越高提示病變范圍越大和皮損越嚴重[17]。本研究通過Pearson相關(guān)分析顯示，PV患者外周血Th9及IL-9水平與PASI評分均呈顯著正相關(guān)。上述結(jié)果與其他學者的研究結(jié)果基本相似，提示了PV患者外周血Th9及IL-9水平的過度增加可能與該病病情嚴重程度密切相關(guān)[5]。

綜上所述，PV患者外周血Th9及IL-9水平明顯升高，其水平與病情嚴重程度相關(guān)。探討PV患者T輔助細胞亞群功能失衡與炎癥學說參與其發(fā)病機制的觀點，有利于進一步闡明PV的發(fā)病機制和為該病的臨床治療提供新靶點。

[1] 李小英.308 nm單頻準分子光治療斑塊狀銀屑病療效觀察[J].廣西醫(yī)學,2017,39（3）：408-409.

[2] 宋紅霞,薛曉東.消銀湯聯(lián)合窄譜中波紫外線治療尋常型銀屑病血熱證療效及其對外周血IL-17,IL-23,IL-6水平的影響[J].中國實驗方劑學雜志,2016,22（5）：193-196.

[3] 劉歡,宋守君,薛海波.Th9細胞與自身免疫性疾病關(guān)系的研究進展[J].現(xiàn)代免疫學,2016,36（3）：253-256.

[4] 楊培培,馮緯紜,葉輝信,等.變應性鼻炎患者特異性免疫球蛋白E、IL-17、IL-2、IL-9和白三烯的表達及其與疾病活動度的相關(guān)性[J].廣西醫(yī)學,2015,37（8）：1 072-1 075.

[5] 駱偉雄,王才強.Th22、Th9細胞參與銀屑病的免疫病理機制的研究[J].中國臨床醫(yī)生,2013,41（8）：65-66.

[6] 趙辨.中國臨床皮膚病學[M].南京：江蘇科學技術(shù)出版社,2009：1008-1009.

[7] Marks R,Barton SP,Shuttleworth D,et al.Assessment of disease progress in psoriasis[J].Arch Dermatol,1989,125：235-240.

[8] 張學軍.皮膚性病學.7版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2008：129-130.

[9] 王英,王麗麗,韓朔,等.CD4+T淋巴細胞亞群與銀屑病關(guān)系的研究進展[J].細胞與分子免疫學雜志,2016,32（6）：834-836.

[10]Chhabra S,Narang T,Joshi N,et al.Circulating T-helper 17 cells and associated cytokines in psoriasis[J].Clin Exp Dermatol,2016,41：806-810.

[11]Hirahara K,Nakayama T.CD4+T-cell subsets in inflammatory diseases：beyond the Th1/Th2 paradigm[J].Int Immunol,2016,28：163-171.

[12]曾亞軍,李玲玲,段行武,等.CD4+T與銀屑病相關(guān)的T輔助細胞研究進展 [J].中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學雜志,2017,16（1）：84-87.

[13]Wong MT,Ye JJ,Alonso MN,et al.Regulation of human Th9 differentiation by type I interferons and IL-21[J].Immunol Cell Biol,2010,88：624-631.

[14]Schlapbach C,Gehad A,Yang C,et al.Human TH9 cells are skintropic and have autocrine and paracrine proinflammatory capacity[J].Sci Transl Med,2014,6：219ra8.

[15]Singh TP,Sch?n MP,Wallbrecht K,et al.Involvement of IL-9 in Th17-associated inflammation and angiogenesis of psoriasis[J].PLoS One,2013,8：e51 752.

[16]胡小平,張杰,邵勇,等.IL-9和IL-10基因拷貝數(shù)變異與特應性皮炎發(fā)病相關(guān)性[J].中國皮膚性病學雜志,2014,30（1）：14-16.

[17]萬國忠.在尋常型銀屑病中HBD-2、MMP-9及TNF-α的表達與PASI評分的正相關(guān)關(guān)系[J].基因組學與應用生物學,2017,36（12）：5 000-5 006.