曾強(qiáng)武，劉　瓊，嚴(yán)雪梅，王　琨，張望明，聶　映△

(貴陽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.婦科，貴陽 550001)

珠蛋白生成障礙性貧血是由于珠蛋白基因突變而導(dǎo)致的一種遺傳性血紅蛋白病，主要包括α-珠蛋白生成障礙性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血[1]。珠蛋白生成障礙性貧血是人類最常見的遺傳病之一，據(jù)估計(jì)全球約5%的人群有珠蛋白基因變異，且每年約有7萬新生兒為珠蛋白生成障礙性貧血攜帶者[2-3]。在臨床上，珠蛋白生成障礙性貧血輕者可表現(xiàn)為無癥狀，重者則可表現(xiàn)為致殘或致死，給患者及其家庭帶來極大痛苦。珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)于熱帶及亞熱帶地區(qū)，在我國南方地區(qū)尤其是廣東、廣西、云南、海南及貴州等省份發(fā)病率較高[4]。當(dāng)前，還沒有經(jīng)濟(jì)、有效的方法治療珠蛋白生成障礙性貧血。因此，做好珠蛋白生成障礙性貧血的人群篩查具有重要的意義。然而，針對貴陽地區(qū)普通人群進(jìn)行珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率的調(diào)查并不多。本研究以到本院進(jìn)行常規(guī)健康體檢的人群作為研究對象，可最為真實(shí)地反映貴陽地區(qū)人群珠蛋白生成障礙性貧血的攜帶率和基因型，研究結(jié)果將豐富我們對貴州地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血的認(rèn)識，有助于該病的防控。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2014年5-8月的不連續(xù)45 d中在本院進(jìn)行常規(guī)健康體檢的人員共3 561例為研究對象，年齡1～86歲。

1.2方法

1.2.1血常規(guī)檢查采用Sysmex XT-1800i全自動血常規(guī)分析儀進(jìn)行血常規(guī)操作，當(dāng)血常規(guī)結(jié)果為小紅細(xì)胞低色素情況時，即平均紅細(xì)胞體積(MCV)<80 fL和(或)平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)<27 pg，定義為珠蛋白生成障礙性貧血疑似病例。

1.2.2珠蛋白生成障礙性貧血基因分析使用血液基因組DNA提取試劑盒[天根生化科技(北京)有限公司]提取珠蛋白生成障礙性貧血疑似病例血液標(biāo)本基因組DNA。采用廣東凱普生物科技股份有限公司生產(chǎn)的檢測試劑盒，對珠蛋白生成障礙性貧血基因進(jìn)行分析，其中，常見的3種缺失型α-珠蛋白生成障礙性貧血基因分析采用Gap-PCR方法檢測：--SEA、-α3.7、-α4.2，非缺失型α-珠蛋白生成障礙性貧血基因和常見β-珠蛋白生成障礙性貧血基因突變采用RDB方法：αCS、αQS、αWS、Cap、CD41-42、CD17、IVS-Ⅱ-654、CD43、CD31、-28、-29、-30、-32、βE、CD71-72、CD14-15、CD27-28、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、Int。所有操作嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

2　結(jié)　　果

2.1血常規(guī)篩查結(jié)果經(jīng)血常規(guī)篩選后，從3 561例體檢血液標(biāo)本中篩選出珠蛋白生成障礙性貧血疑似病例196例，檢出率為5.5%(196/3 561)，其中男76例、女120例，中位年齡40歲。

2.2珠蛋白生成障礙性貧血基因分析對196例珠蛋白生成障礙性貧血疑似病例進(jìn)行基因型檢測，檢出131例珠蛋白生成障礙性貧血患者，檢出率為66.84%(131/196)，攜帶率為3.68%(131/3 561)。

2.2.1α-珠蛋白生成障礙性貧血基因分析在131例珠蛋白生成障礙性貧血患者中，α-珠蛋白生成障礙性貧血患者為65例，人群攜帶率為1.83%(65/3 561)。各基因突變型及構(gòu)成比、攜帶率見表1。從基因突變類型來看，檢出比例最高的基因缺失類型為--SEA/αα，共47例，構(gòu)成比為72.30%(47/65)，攜帶率為1.32%(47/3 561)；而檢出比例最高的基因點(diǎn)突變類型為αCS/αα，共7例，構(gòu)成比為4.62%(3/65)，攜帶率為0.20%(7/3 561)。從臨床表型來看，檢出2例基因型為--SEA/αα-α3.7的中間型珠蛋白生成障礙性貧血癥患者，其余的為輕型或靜止型，并無重型檢出。

2.2.2β-珠蛋白生成障礙性貧血基因分析共檢出β-珠蛋白生成障礙性貧血患者60例，攜帶率為1.68%(60/3 561)。各基因突變型及構(gòu)成比、攜帶率見表2。其中，檢出比例最高的基因類型為βCD41-42/βN，共25例，構(gòu)成比為41.67%(25/60)，攜帶率為0.70%(25/3 561)；而βCD17/βN基因型檢出比例次之，共20例，構(gòu)成比為33.33%(20/60)，攜帶率為0.56%(20/3 561)。從臨床表型來看，檢測出的所有β-珠蛋白生成障礙性貧血患者均為輕型。

表1　　α-珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測結(jié)果

表2　　β-珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測結(jié)果

2.2.3αβ復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血基因分析共檢出αβ復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血6例，攜帶率為0.17%。其中，檢出--SEA/βCD17及-α3.7/βCD17各2例，αWS/βCD17及--SEA/ β-29各1例。見表3。

表3　　αβ復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測結(jié)果

3　討　　論

本研究通過對3 561例常規(guī)健康體檢人員進(jìn)行珠蛋白生成障礙性貧血篩查及基因突變分析，初步了解了貴陽地區(qū)體檢人群珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率及主要基因突變類型。首先，通過血常規(guī)檢查，篩選出小紅細(xì)胞低色素的珠蛋白生成障礙疑似病例196例，檢出率為5.5%。進(jìn)一步的珠蛋白生成障礙性貧血基因分析確診131例珠蛋白生成障礙性貧血，檢出率為66.84%，攜帶率為3.68%。其中，α-珠蛋白生成障礙性貧血檢出65例，攜帶率為1.83%；β-珠蛋白生成障礙性貧血檢出60例，攜帶率為1.68%；αβ復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血檢出6例，攜帶率為0.18%。以上結(jié)果表明，這一地區(qū)體檢人群中α-珠蛋白生成障礙性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血的攜帶率相當(dāng)。

本研究中，α-珠蛋白生成障礙性貧血主要基因缺失類型為--SEA/αα，構(gòu)成比為72.30%；其次是-α3.7/αα及-α4.2/α。在β-珠蛋白生成障礙性貧血檢測中，βCD41-42/βN、βCD17/βN兩種突變類型是最多的，構(gòu)成比分別為41.67%、33.33%。以上發(fā)現(xiàn)的基因突變類型與已有報道一致[5-7]。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)6例αβ復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血，攜帶率為0.17%，主要是βCD17與--SEA、-α3.7的基因組合。

珠蛋白生成障礙性貧血分布及人群攜帶率存在明顯的地域差異性和民族差異性，在我國珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)區(qū)的廣東、廣西和海南，攜帶率可高達(dá)20%，而在我國西南的四川、云南及重慶等地珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率可達(dá)到6%左右[8]。貴州地處中國西南腹地，是一個漢、苗及布依等18個民族世居的省份，各民族婚配習(xí)俗等的差異導(dǎo)致了不同民族或地區(qū)人群的珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率差異較大。如一項(xiàng)對貴州省黔南州都勻市1 700例布依族中學(xué)生進(jìn)行的珠蛋白生成障礙性貧血調(diào)查表明，α-和β-珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率分別為10.8%和7.0%[9]。而同樣是對少數(shù)民族進(jìn)行珠蛋白生成障礙性貧血調(diào)查的另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，貴州省黔東南地區(qū)苗族和侗族兒童的珠蛋白生成障礙性貧血總檢出率分別為7.25%和7.01%[10]。本研究以貴陽地區(qū)常規(guī)健康體檢人群為研究對象，該群體不是以到醫(yī)院看病為目的，故可最大限度地代表貴陽地區(qū)普通人群，因而針對其進(jìn)行調(diào)查研究所得的結(jié)果也最貼近真實(shí)值。從本次研究結(jié)果來看，貴陽地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率為3.68%，明顯低于貴州少數(shù)民族地區(qū)，也較湖南長沙地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率(4.54%)低[11]，但較四川成都地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率(3.43%)略高[12]。

此外，在本項(xiàng)研究中從196例地中海疑似病例中篩選出131例珠蛋白生成障礙性貧血，而被排除在外的65例小紅細(xì)胞低色素患者也需要臨床檢驗(yàn)人員去關(guān)注。因?yàn)槿绻渲械哪承┗颊邤y帶有罕見的基因突變類型，則會造成漏診或錯診。

綜上所述，本次對貴陽地區(qū)常規(guī)健康體檢人群的珠蛋白生成障礙性貧血篩查和基因分析，研究結(jié)果可較為真實(shí)地反映這一地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率和基因型，將為婚配、產(chǎn)前診斷及政策制訂等提供有意義的參考。