崔 偉 羅 旭 朱明蘭 張 能 苗向陽 趙法亮 黃 翔

（1 貴州省遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，貴州 遵義 563003；2 貴州省遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院美容醫(yī)院，貴州 遵義 563003）

Maglione在1991年從人的胎盤cDNA文庫中提取出屬于血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）家族之一的胎盤生長因子（placenta growth factor，PLGF），并且其具有促進(jìn)腫瘤血管生長的作用并與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有密切聯(lián)系。研究表明PLGF在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)[l-2]，但與前列腺癌方面的研究報道目前鮮有。前列腺癌是最常見的惡性腫瘤在男性泌尿生殖系統(tǒng)中。在世界范圍內(nèi)，每年有超過660 000例新增病例被確診為前列腺癌，占所有男性新發(fā)癌癥的10%[3]，并且我國男性前列腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯升高趨勢。本試驗(yàn)通過研究PLGF在前列腺癌中的表達(dá)。探討其與前列腺癌的聯(lián)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料：隨機(jī)抽取2015年～2017年于遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科住院并經(jīng)病理檢查確診為前列腺癌的蠟塊標(biāo)本80例，患者年齡39～86歲，平均（56.27±10.94）歲，按TNM分期T1、T2、T3、T4四期，每期各20例；病理檢查確診為前列腺增生的蠟塊標(biāo)本45例，年齡57～89歲，平均（60.28±9.84）歲，輕、中、重度各15例。

1.2 主要試劑與方法：采用免疫組化SP兩步法，實(shí)驗(yàn)用試劑均采購于武漢博士德生物工程有限公司，工作濃度均為1∶50；PBS代替一抗，作為陰性對照，實(shí)驗(yàn)操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行，標(biāo)本用10%甲醛固定、石蠟包埋、切片，DAB染色。其中試劑一抗為兔抗人PLGF，二抗為辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔IgG。

1.3 結(jié)果判定：陽性為胞質(zhì)中出現(xiàn)分布均勻的黃褐色或棕黃色顆粒。以10個高倍視野為計數(shù)單位，計數(shù)100個腫瘤細(xì)胞中陽性染色細(xì)胞數(shù)，以其百分率作為結(jié)果。結(jié)果判讀：陽性染色細(xì)胞數(shù)少于5%為陰性，陽性染色細(xì)胞數(shù)＞5%判為陽性，弱陽性（+）：陽性細(xì)胞數(shù)＜25%，；陽性（++）：陽性細(xì)胞數(shù)25%～50%，；強(qiáng)陽性（+++）：陽性細(xì)胞數(shù)≥50%，其胞質(zhì)及胞膜染色程度分別為棕黃、棕色、深棕色。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 PLGF在前列腺癌及前列腺增生組織中的染色結(jié)果顯示，PLGF呈現(xiàn)棕黃色陽性表達(dá)細(xì)胞質(zhì)，在腫瘤間質(zhì)的血管內(nèi)皮細(xì)胞中也有少量表達(dá)；前列腺癌組患者中PLGF的陽性表達(dá)率為82.50%，明顯高于前列腺增生組13.33%，二者相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1、圖2、表1。

圖1 PLGF在前列腺組織的表達(dá)（40×）

圖2 PLGF在前列腺癌組織中的表達(dá)（40×）

表1 PLGF在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達(dá)

2.2 前列腺癌患者PLGF表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系：前列腺癌患者PLGF表達(dá)的陽性率隨著TNM分期升高而升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 PLGF在前列腺癌不同分期中的表達(dá)

3 討 論

男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一前列腺癌（prostate cancer，PCa）的發(fā)病率居高不下，有研究表明前列腺癌約占男性全部癌癥種類的14%[4]，并且其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)存在明顯地域差異性，歐美各發(fā)達(dá)國發(fā)病率較亞洲如我國等發(fā)展中國家明顯增高[5]，但隨著近年來我國人民生活水平的提高，前列腺癌的發(fā)病率及病死率也逐年遞增[6]。前列腺癌的分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)前列腺癌的發(fā)生和發(fā)展由多種細(xì)胞因子共同參與，并與其預(yù)后評價有非常密切的關(guān)系。血管新生是腫瘤生長、侵襲的重要步驟，，當(dāng)腫瘤達(dá)到一定體積時如果沒有血管的生成供氧就會停止生長[7]。作為在誘導(dǎo)血管生成中發(fā)揮重要作用的血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）家族中重要成員的PLGF是調(diào)節(jié)腫瘤新血管生成的關(guān)鍵因子，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵蝕及預(yù)后關(guān)系密切。研究表明生理狀態(tài)下血管內(nèi)皮細(xì)胞中PLGF少量表達(dá)，正常胎盤組織中高表達(dá)，但在部分腫瘤如胃癌、直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌等則明顯上調(diào)[8]，其表達(dá)水平與腫瘤血管生成呈正相關(guān)。也有研究發(fā)現(xiàn)，某些腫瘤與PLGF無關(guān)或負(fù)相關(guān)[9]，這可能是由于PLGF在特殊腫瘤血管中表達(dá)通路的異常導(dǎo)致，如在甲狀腺腫瘤中表達(dá)下降。

本研究表明PLGF的陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞質(zhì)，并且前列腺癌組中的PLGF的陽性表達(dá)率與前列腺增生組患者相比有顯著升高，這說明在前列腺癌的進(jìn)程中PLGF發(fā)揮重要作用。此外，本研究還表明，PLGF表達(dá)的陽性率隨著前列腺癌TNM分期的升高而增高，經(jīng)檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。綜上所述，PLGF在前列腺癌組織中的陽性表達(dá)率高于前列腺增生組織，且隨著TNM分期升高而出現(xiàn)表達(dá)增強(qiáng)，提示前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展中PLGF可能起促進(jìn)作用。根據(jù)PLGF在腫瘤等病理性血管生成中的作用的基礎(chǔ)上，化療聯(lián)合應(yīng)用抗血管生成治療腫瘤擴(kuò)散有望作為潛在的前列腺診斷及治療的有效靶點(diǎn)[10]。