許亞改 周文茂 張 斌 王 琨
(1.石家莊市獸用生物制品供應站,河北石家莊 050000;2.石家莊市畜牧獸醫(yī)技術開發(fā)中心,河北石家莊 050000;3.石家莊市動物疫病預防控制中心,河北石家莊 050000)
移液器是獸醫(yī)實驗室最常用的定量移液設備,用于ELISA、PCR等試驗。為規(guī)范獸醫(yī)實驗室工作人員在移液器使用過程中的操作行為,保障移液的精確性,實現(xiàn)實驗結果的準確性,現(xiàn)結合工作經(jīng)驗就移液器的操作規(guī)范及注意事項做簡單介紹。
移液器使用共分為容量設定、裝配吸頭、預洗吸頭、吸液、放液、卸去吸頭等六個步驟。
容量設定分為兩個步驟,一是粗調,即通過旋轉將容量值迅速調整至接近的預想值;二是細調,當調整接近預想值后,通過調節(jié)輪慢慢將容量值調至設定值。如果從大體積調為小體積,逆時針旋轉旋鈕即可;如果從小體積調為大體積時,需先順時針旋轉至超過設定量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可保證量取精確度。
正確的安裝方法為旋轉安裝法,把白套筒頂端插入吸頭,輕輕用力下壓并左右小幅度旋轉。
吸液前,應將液體吸取、排放兩到三次,讓吸頭內壁形成一層同質液膜,確保移液的精度和準度。其次,在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時,揮發(fā)性氣體會在白套筒室內形成負壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時就需要預洗四到六次,讓白套筒室內的氣體達到飽和,負壓就會自動消失。
將按鈕按至第一停點,使吸頭浸入液面下2-3毫米處緩慢松開按鈕,停一秒后將吸頭提離液面,貼壁停留2-3秒使管尖外側的液滴滑落(具體浸入深度根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握)。
將吸頭貼到容器內底部并保持10°~40°傾斜,平穩(wěn)按到第一停點,停一秒再按到第二停點排除剩余液體。按住按鈕,同時提出移液器,松開按鈕,彈出吸頭。
操作完畢后,按壓移液器側面手柄將吸頭彈下。
盡量選擇最大量程最接近所吸取量的加樣器,以減少誤差,不宜用大量程的移液器移取小體積樣品。
清潔移液器可用酒精棉。主要擦拭手柄、彈射器及白套筒外部,既保持干凈,又避免了對樣品產(chǎn)生污染。
根據(jù)國標JJG 646-2017 移液器檢定規(guī)程,檢定周期為1年,也可根據(jù)使用頻率自行確定校準時間。
裝配吸頭時避免用力過猛,影響氣密性導致吸液不準,長期操作易造成移液器內零件因長期撞擊而松散,甚至導致調節(jié)刻度的旋鈕卡住,影響使用。
2.5.1 避免吸液太快
吸液過快會產(chǎn)生反沖和氣泡影響移液的準確性,還會將液體吸入活塞,造成交叉污染,甚至產(chǎn)生溶液腐蝕活塞和密封圈現(xiàn)象,導致漏氣。
2.5.2 吸取特殊液體時注意事項
(1)吸取高揮發(fā)、高腐蝕液體
吸取高揮發(fā)、高腐蝕液體后,應將移液器拆開,用蒸餾水沖洗活塞桿及白套筒內壁,晾干后安裝使用。避免揮發(fā)性氣體長時間吸附于活塞桿表面,對活塞桿產(chǎn)生腐蝕。
(2)吸取黏度高的液體(如蛋黃、血液)
吸取黏度高的液體可將吸頭尖端剪斷一截使吸液口擴大,先預潤后再吸取。也可采用反相移液法:先按到第二檔,慢慢松開按鈕,放液時松到第一檔,再彈出帶有部分殘留液體的吸頭。
使用完畢,將其豎直掛在移液器架上。移液器吸頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
如移液器不使用,要把移液器的量程調至最大刻度值,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
避免吸液前后用手觸摸吸頭,造成污染。