梁萌，陳治軍

（桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院麻醉科，廣西 桂林 541001）

椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛是一種脊柱常見(jiàn)病，不僅使人們的身體健康受到極大威脅，而且會(huì)極大影響人們正常的工作、學(xué)習(xí)生活，降低該病患者的生活質(zhì)量。本研究為比較糖皮質(zhì)激素和臭氧在硬膜外腔的抗炎鎮(zhèn)痛效果，為臨床上更好地治療椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為臨床尋找更理想的抗炎鎮(zhèn)痛注射用藥開(kāi)辟一條新的途徑。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取健康的成年雄性的Wistar大鼠100只，進(jìn)行編號(hào)后，以隨機(jī)數(shù)表法分為五組，其中一組為普通對(duì)照組（A組）20只，其余四組統(tǒng)稱為實(shí)驗(yàn)組80只。其中實(shí)驗(yàn)組的四組以治療方案的不同進(jìn)行分組：B組甲強(qiáng)龍對(duì)照組，C組甲強(qiáng)龍組，D組臭氧對(duì)照組，E組臭氧組，每組20只。所有大鼠體重均在300 g左右，飼養(yǎng)室溫控制在25℃左右。各組大鼠其他各項(xiàng)資料如年齡、體重、性別、身體情況均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛模型制備方法

將所有實(shí)驗(yàn)中的大鼠先以1%的氯胺酮進(jìn)行麻醉，麻醉以腹腔注射的方式進(jìn)行。于無(wú)菌條件下，切下鼠尾，縫合傷口。自鼠尾部將尾椎間盤(pán)切開(kāi)，以生理鹽水50 μl和大鼠的五個(gè)髓核攪拌制成混懸液。將2%的利多卡因與該混懸液各取20 μl，以硬膜外腔注射的方式，注射給取出髓核的大鼠本體。在手術(shù)后觀察大鼠是否有后肢活動(dòng)阻塞或無(wú)感覺(jué)、前肢活動(dòng)無(wú)變化的情況出現(xiàn)，即為造模成功。

1.2.2 硬膜外腔穿刺及注射實(shí)驗(yàn)方法

所有大鼠于造模成功后七天給予氯胺酮麻醉，以屈曲側(cè)臥位進(jìn)行穿刺。以七號(hào)腰椎穿刺針穿刺L4-5棘突間隙。穿刺成功后在實(shí)驗(yàn)用的B、C、D、E組穿刺點(diǎn)注射以下藥物：

B組：硬膜外腔注入生理鹽水50 μl。C組：硬膜外腔注入甲強(qiáng)龍200 μg/50 μl。D組：硬膜外腔注入醫(yī)用純氧50 μl。E組：硬膜外腔注入濃度為40 mg/L 的醫(yī)用臭氧 50 μl。

1.2.3 臭氧獲得以及注入方法

以純氧氧氣瓶連接醫(yī)用臭氧發(fā)生器，純氧流入的同時(shí)以100 μl注射器收取混合的臭氧、純氧氣體，該氣體設(shè)定為40 mg/L的臭氧濃度。收取到的臭氧混合氣體自第二管開(kāi)始，收取后立刻注入E組大鼠的硬膜外腔內(nèi)。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

注藥后1 h、4 h、24 h觀察各組大鼠行為學(xué)、機(jī)械痛閾、神經(jīng)傳導(dǎo)速度以及注藥后24 h的神經(jīng)根、脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)的超微結(jié)構(gòu)變化和神經(jīng)根PGE2含量。機(jī)械痛閾值測(cè)定：以Von Frey觸針刺激大鼠的足底中心部位，刺激逐漸增強(qiáng)，每種強(qiáng)度3-5秒刺激一次，每種強(qiáng)度刺激10次以上。如大鼠出現(xiàn)5次縮爪反應(yīng)以上，則該強(qiáng)度即為測(cè)定的機(jī)械痛閾值。以術(shù)后機(jī)械痛閥比術(shù)前基礎(chǔ)通閥的方法計(jì)算機(jī)械痛閥變化百分比并記錄。100%以上為痛覺(jué)過(guò)敏，100%以下為痛覺(jué)減弱。神經(jīng)傳導(dǎo)速度測(cè)定：氯胺酮麻醉后，以丹迪keypoint肌電-誘發(fā)電位儀測(cè)定神經(jīng)傳導(dǎo)速度。同時(shí)分別檢測(cè)感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的傳導(dǎo)速度，由計(jì)算機(jī)計(jì)算并記錄數(shù)據(jù)。神經(jīng)根、脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)的超微結(jié)構(gòu)變化以標(biāo)本采集觀察的方式進(jìn)行，將大鼠麻醉開(kāi)胸后灌注生理鹽水并解剖，制作電鏡切片觀察神經(jīng)根、背根節(jié)和脊髓背角超微結(jié)構(gòu)的變化。用紫外分光光度計(jì)法，測(cè)量大鼠神經(jīng)根中的PGE2含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用X2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠行為學(xué)現(xiàn)象比較

建模后各組大鼠均未出現(xiàn)撕咬肢體的情況，但各組均出現(xiàn)了易激惹和活動(dòng)頻繁的現(xiàn)象，而且有較多大鼠反應(yīng)遲緩，以術(shù)后4 h時(shí)現(xiàn)象最為突出。各組間易激惹和活動(dòng)頻繁現(xiàn)象差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但C組和E組的反應(yīng)遲緩數(shù)目高于A、B、D組，且該差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 大鼠療效比較

C、E兩組的機(jī)械痛閥變化百分比小于100%，而A、B、D三組變化均在100%附近以及高于100%的水平，A組對(duì)疼痛最為敏感，而E組痛覺(jué)減弱程度最強(qiáng)。在神經(jīng)傳導(dǎo)速度上，C、E兩組傳導(dǎo)速度較其他組更慢，其中，E組的傳導(dǎo)速度較C組更慢（P＜0.05）。

表1 大鼠行為學(xué)現(xiàn)象比較(%)

表2 大鼠療效比較

2.3 大鼠神經(jīng)根、脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)的超微結(jié)構(gòu)變化

A組的髓神經(jīng)纖維無(wú)論是軸突還是髓鞘都有腫脹的現(xiàn)象，而且髓鞘之間也有水腫的情況，板層有松懈狀況，有脫髓鞘、髓鞘疏松、變形、破裂甚至分層。B、D兩組與A組的髓神經(jīng)纖維情況相似，無(wú)明顯差別，而C、E兩組在初期與A組類似，24 h后稍有改善。

2.4 大鼠神經(jīng)根PGE2含量的變化

C、E組的大鼠PGE2含量明顯低于其他組，因此C、E組的炎癥有所消退，而E組的PGE2含量又低于C組，說(shuō)明臭氧治療療效優(yōu)于C組（P＜0.05）。

3 討論

椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛，在人們?nèi)粘Ｉ钪谐３１憩F(xiàn)為腰痛，由于人們有些不良的生活方式，或懶于鍛煉，目前椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的發(fā)病率在日益上升[1]。本研究就將糖皮質(zhì)激素與臭氧治療進(jìn)行對(duì)比研究，比較這兩者的抗炎鎮(zhèn)痛效果，意圖尋求一種更好的治療椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的方法。

由于炎癥機(jī)制導(dǎo)致椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛這一作用原理，糖皮質(zhì)激素在該病的治療中主要有兩方面作用，一為鎮(zhèn)痛，二為抗炎[2]。糖皮質(zhì)激素能使細(xì)胞膜穩(wěn)定，使傷害性的C纖維無(wú)法進(jìn)行傳遞，進(jìn)而達(dá)到鎮(zhèn)痛的效果，而且它能有效抑制炎性細(xì)胞集聚，減輕炎性反應(yīng)的出現(xiàn)，即為抗炎作用。在本次的研究中，對(duì)比B、C組的表現(xiàn)，糖皮質(zhì)激素的確在椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的治療中有著優(yōu)異的鎮(zhèn)痛抗炎作用。

表3 大鼠神經(jīng)根PGE2含量的變化

臭氧是一種具有強(qiáng)氧化性的氣體，性質(zhì)非常不穩(wěn)定，常溫下半衰期約為20-30分鐘。臭氧對(duì)于椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的作用機(jī)制首先是使髓核內(nèi)的蛋白多糖氧化，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)使細(xì)胞壞死，使髓核對(duì)神經(jīng)根的壓迫減弱，使局部微循環(huán)盡可能的流暢，滿足供氧需求[3]。臭氧還可刺激抗氧化酶過(guò)度表達(dá)，中和炎癥反應(yīng)中生成的過(guò)量自由基等的合成與釋放。臭氧還具有免疫調(diào)節(jié)作用，可抑制眾多細(xì)胞因子釋放。臭氧可直接刺激神經(jīng)末梢，使抑制性中間神經(jīng)元釋放腦啡肽等，發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用[4-5]。另外，臭氧還具有較強(qiáng)的殺菌作用，能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。

在本次研究中，盡管臭氧和糖皮質(zhì)激素都對(duì)疼痛有良好的抑制作用，但臭氧對(duì)椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的疼痛減弱要優(yōu)于糖皮質(zhì)激素，對(duì)神經(jīng)傳導(dǎo)的速度的降低也好于糖皮質(zhì)激素。且臭氧還具有良好的消炎作用，能減輕椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛的炎癥反應(yīng)。當(dāng)臭氧注入椎間盤(pán)后，可以使髓核內(nèi)戴白多糖氧化、變性、干涸甚至萎縮，降低椎間盤(pán)內(nèi)壓力，利用抗氧化酶的過(guò)度表達(dá)，清除致痛物質(zhì)，使疼痛緩解。盡管本研究中，臭氧的各方面療效較糖皮質(zhì)激素而言有更好的表現(xiàn)，但臨床病例往往不會(huì)單獨(dú)患有椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛，由于合并的臨床病例的復(fù)雜性，現(xiàn)在還無(wú)法得出確切的臨床治療上的對(duì)比結(jié)論，實(shí)際治療還需要臨床醫(yī)師具體情況具體判斷。

綜上所述，糖皮質(zhì)激素與臭氧硬膜外腔注射治療均能有效緩解椎間盤(pán)源性神經(jīng)痛，在大鼠模型研究中，臭氧硬膜外腔注射治療較糖皮質(zhì)激素治療有著更好的療效，能更多降低神經(jīng)傳導(dǎo)速度，消炎并減緩疼痛。