季應(yīng)明，錢海娟，林愛華

(海安市綜合檢驗(yàn)檢測中心，江蘇海安 226600)

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中果蔬類農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量的控制已越來越受到生產(chǎn)經(jīng)營者的重視，也是百姓關(guān)心、政府關(guān)注的突出問題。通過實(shí)驗(yàn)室檢測掌握果蔬類農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量狀況，可為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全評價、風(fēng)險分析、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施、行政執(zhí)法、市場監(jiān)管和產(chǎn)品外銷等提供技術(shù)保障和技術(shù)支撐。測量結(jié)果的可用性很大程度取決于測量結(jié)果不確定度的大小，因此，開展測量不確定度的評定[1-2]是實(shí)驗(yàn)室提高檢驗(yàn)結(jié)果可靠性的重要保障。筆者以氣相色譜法測定黃瓜中甲胺磷測量不確定度的評定為例，說明果蔬類農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量測量結(jié)果不確定度的評定過程。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1供試樣品。當(dāng)?shù)啬侈r(nóng)副產(chǎn)品批發(fā)市場例行監(jiān)測抽檢的空白黃瓜樣品加標(biāo)。

1.1.2試劑。乙腈(色譜純)；丙酮(色譜純)；氯化鈉(分析純)，置于140 ℃條件下烘烤4 h；濾膜，0.2 μm有機(jī)溶劑膜。

1.1.3農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。100 μg/mL甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所。

1.1.4儀器設(shè)備。氣相色譜儀Agilent7890A-FPD；色譜柱DB-17；食品加工器；高速勻漿機(jī)；電熱恒溫水浴鍋；電子天平(JM-202)；容量瓶(10 mL/A級、5 mL/A級)；分度吸量管(0.1 mL/A級、0.5 mL/A級、5.0 mL/A級)；單標(biāo)線吸量管(10 mL/A級)。所有用到的儀器設(shè)備及量器均經(jīng)檢查或校準(zhǔn)，符合檢測規(guī)范要求。

1.2方法

1.2.1樣品處理。

1.2.1.1試樣制備。按GB/T 8855抽取黃瓜樣品，取可食部分，將其切碎，充分混勻放入食品加工器中粉碎，制成待測樣。

1.2.1.2提取。準(zhǔn)確稱取25.00 g制好的試樣于高型燒杯中，加入甲胺磷0.03 mg/kg，加入提取溶劑乙腈50.0 mL，用高速勻漿機(jī)勻漿2 min后用濾紙過濾于裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在常溫下靜置30 min，使乙腈相和水相充分分層。

1.2.1.3凈化。從具塞量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液于150 mL 燒杯中，在80 ℃水浴鍋加熱蒸發(fā)至近干，將殘留物用5 mL丙酮分3次洗入5 mL試管中，最后用丙酮定容至5.00 mL 待測，進(jìn)樣量1 μL，外標(biāo)法定量，如溶液過于渾濁，過0.2 μm濾膜后待上機(jī)測定。

1.2.2色譜條件及色譜分析。色譜柱：DB-17；氮?dú)猓毫魉?0 mL/min；氫氣：流速75 mL/min；空氣：流速100 mL/min。進(jìn)樣口溫度220 ℃，檢測器溫度250 ℃。由自動進(jìn)樣器分別吸取1.0 μL標(biāo)準(zhǔn)溶液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以保留時間定性，以獲得的樣品溶液峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較定量。

1.2.3結(jié)果計(jì)算。依據(jù)NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》[3]對果蔬類農(nóng)產(chǎn)品中甲胺磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測定。果蔬中甲胺磷農(nóng)藥含量的計(jì)算公式：

ω=(V1×A×V3×ρ)/(V2×As×m)

(1)

式中，ω為樣品中甲胺磷測定濃度(mg/kg)；V1為提取溶劑總體積(mL)；A為樣品溶液中被測甲胺磷的峰面積；V3為樣品溶液定容體積(mL)；ρ為標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲胺磷的質(zhì)量濃度(μg/mL)；V2為用于檢測的提取溶液體積(mL)；As為甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測甲胺磷的峰面積；m為試樣的質(zhì)量(g)。

1.2.4不確定度計(jì)算方法。試驗(yàn)結(jié)果的不確定度計(jì)算公式[2]：

相對不確定度計(jì)算公式：

urel(x)=u(x)/x×100%

(3)

2 結(jié)果與分析

從式(1)分析可知，甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測量不確定度主要來源：測量的重復(fù)性、樣品處理過程溶液的體積、樣品質(zhì)量、被測農(nóng)藥峰面積、標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測農(nóng)藥質(zhì)量濃度等因素[4-7]。

2.1重復(fù)測量引入的不確定度按試驗(yàn)方法對供試樣品及甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液樣品進(jìn)行10次重復(fù)測量，測量覆蓋該方法全過程(表1)。

表1標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品濃度測定值

Table1Measuredvalueofstandardsolutionandsampleconcentration

測定次數(shù)Measured timesAAs樣品溶液甲胺磷濃度Sample solution methamidophos concentration∥μg/mL196.36279.530.026 0299.17282.170.026 6395.36273.950.025 8496.89275.150.026 2597.21274.160.026 3694.40281.290.025 6795.73276.500.025 9896.56280.600.026 1995.03281.120.025 71099.04273.020.026 5平均值Mean value96.58277.750.026 1標(biāo)準(zhǔn)差Standard devia-tion(S)1.593.540.000 33

將表1數(shù)據(jù)導(dǎo)入公式(2)，得出重復(fù)測量引入的不確定度為0.000 1 μg/mL，其相對不確定度為0.40%。

2.2樣品處理過程溶液體積引入的不確定度

2.2.1提取溶劑總體積V1引入的不確定度。試驗(yàn)使用50 mL量筒，其最大誤差為±0.50 mL[8]，按均勻分布計(jì)算，量筒誤差引入的不確定度為u(V1)=0.289 mL、urel(V1)=0.58%。

2.2.2用于檢測的提取溶液體積V2引入的不確定度。試驗(yàn)使用10 mL單標(biāo)吸量管，其最大允許誤差為±0.020 mL，按均勻分布計(jì)算，用于檢測的提取溶液體積引入的不確定度為u1(V2)=0.012 mL、urel(V3)=0.12%。

2.2.3樣品溶液定容體積V3引入的不確定度。試驗(yàn)使用5 mL刻度試管，其最大允許誤差為±0.1 mL，按均勻分布計(jì)算，樣品提取過程中由定容引入的不確定度為u(V3)=0.06 mL、urel(V3)=1.20%。

2.3樣品質(zhì)量引入的不確定度樣品稱量所用的電子天平最小分度值為 0.01 g，稱量樣品25.00 g，查稱量使用的電子天平檢定證書，其最大允許誤差為±0.1 g，按正態(tài)分布計(jì)算，天平引入的不確定度為u(m)=0.058 g、urel(m)=0.23%。

2.4標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度

2.4.1標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥質(zhì)量濃度引入的不確定度。查標(biāo)準(zhǔn)品證書，甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)儲備液的擴(kuò)展不確定度為±0.16 μg/mL(包含因子k=2)，則標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的相對不確定度urel(ρ)為0.08%。

表2 標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋過程中不確定分量

2.5溶液中被測農(nóng)藥峰面積引入的不確定度

2.5.1標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測農(nóng)藥峰面積As引入的不確定度。被測農(nóng)藥色譜峰面積的不確定度主要來源于重復(fù)進(jìn)樣引入的不確定度和進(jìn)樣器的不確定度，由于色譜儀靈敏度很高，所以儀器穩(wěn)定性即測定值分散性是構(gòu)成峰面積測量不確定度的主要因素，儀器進(jìn)樣量及儀器示值誤差可不必考慮。標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測定10次，以濃度值的分散性代表峰面積的分散性。

根據(jù)公式(2)對表1峰面積數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，得出標(biāo)準(zhǔn)液測定峰面積引入的不確定度u(As)為1.12，根據(jù)公式(3)得出其相對不確定度urel(As)為0.40%。

2.5.2樣品溶液中被測農(nóng)藥峰面積A引入的不確定度。樣品溶液中被測農(nóng)藥峰面積引入的不確定度計(jì)算方法同“2.5.1”，u(A)=0.50、urel(A)=0.52%。

2.6合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度將各分量相對不確定度進(jìn)行合成，即得到測定農(nóng)藥的相對合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度(表3)。計(jì)算公式：

=2.06%

2.7擴(kuò)展不確定度按置信概率p=95%，取k=2，則該供試黃瓜中甲胺磷殘留量測定的相對擴(kuò)展不確定度為：urel=k×urel(ω)=4.12%。從表1可知，該供試樣品黃瓜中甲胺磷殘留量的最佳估計(jì)值為0.026 1 mg/kg，故其擴(kuò)展不確定度為U95=0.026 1 mg/kg×4.12%=0.001 1 mg/kg。

2.8樣品測定結(jié)果的表示經(jīng)測量分析，供試黃瓜樣品中甲胺磷殘留量為：X(甲胺磷)=(0.026 1±0.001 1)mg/kg(k=2)。

3 結(jié)論與討論

從試驗(yàn)結(jié)果及不確定度分析數(shù)據(jù)來看，供試樣品加標(biāo)黃瓜中甲胺磷農(nóng)藥殘留量測定的測量不確定度主要來源為樣品處理中的樣品溶液定容體積、標(biāo)液制備中的0.1 mL分度吸量管，其次為重復(fù)性測量、提取溶劑總體積及儀器的穩(wěn)定性，其他因素影響較小。因此，通過選擇更高精度的移液、定容器皿，規(guī)范操作就可以有效減少不確定度，保證測量結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。

表3相對合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量

Table3Relativesyntheticstandarduncertaintycomponent

不確定度來源Source of uncertain-ty不確定度分量Uncertain component甲胺磷Methami-dophos%重復(fù)測量Repeated measurementurel(x)0.62樣品處理提取溶劑總體積urel(V1)0.58Sample processing用于檢測的提取溶液體積urel(V2)0.12樣品溶液定容體積urel(V3)1.20合成urel(V)1.34樣品稱量Sample weighingurel(m)0.23標(biāo)準(zhǔn)溶液制備0.1 mL分度吸量管urel(Vb1)1.20Preparation of 5.0 mL分度吸量管urel(Vb2)0.29standard solution5 mL容量瓶urel(Vb3)0.2310 mL容量瓶urel(Vb4)0.12合成urel(Vb)1.26儀器穩(wěn)定性標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積urel(As)0.40Instrument stability樣品溶液峰面積urel(A)0.52合成urel(Ac)0.66合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度Synthetic standard uncertaintyurel(ω)2.06