謝先榮　詹俊杰

【摘要】 目的：探討IL-17、IL-23在兒童OSAHS患者血清中的表達(dá)及意義。方法：選擇2017年1-9月期間佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻喉科收治的4～12歲OSAHS患兒27例，健康門診進(jìn)行常規(guī)體檢的正常兒童32例。OSAHS患兒組（試驗(yàn)組）均行PSG檢查，健康兒童組（對(duì)照組）通過詳細(xì)的病史詢問排除OSAHS。血清學(xué)白細(xì)胞介素17（簡稱IL-17）及白細(xì)胞介素23（簡稱IL-23）檢測采用ELISA法。結(jié)果：試驗(yàn)組血清IL-17、IL-23的含量均高于對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：與健康兒童相比，兒童OSAHS患者IL-17及IL-23顯著提高，白細(xì)胞介素17及白細(xì)胞介素23在兒童OSAHS發(fā)病機(jī)制中可能有重要作用。

【關(guān)鍵詞】 睡眠呼吸暫停低通氣； 白細(xì)胞介素17； 白細(xì)胞介素23

Expression and Significance of Serum IL-17 and IL-23 in Children with Obstructive Sleep Apnea Hypopnea Syndrome/XIE Xianrong，ZHAN Junjie.//Medical Innovation of China，2018，15（13）：069-072

【Abstract】 Objective：To investigate the expression and significance of serum IL-17 and IL-23 in children with OSAHS.Method：27 cases of 4-12 years old children with OSAHS in ENT department of the first affiliated hospital of jiamusi university from January to September 2017 were selected.32 cases of normal children in health clinic for routine examination were selected.The children in OSAHS group （experimental group） were treated polysomnographic evaluations.The normal children group（control group） were excluded OSAHS by taking history carefully.Serum interleukin 17（IL-17） and interleukin 23（IL-23） were detected by ELISA method.Result：The levels of serum IL-17 and IL-23in the experimental group were higher than those in the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion：Compared with healthy children，the children with OSAHS have a significantly increasing level of IL-17 and IL-23，and interleukin 17 and interleukin 23 may play an important role in the pathogenesis of OSAHS in children.

【Key words】 Sleep apnea hypopnea； Interleukin 17； Interleukin 23

First-authors address：Jiamusi University，Jiamusi 154007，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.13.018

兒童OSAHS既是一種炎癥性疾病，同時(shí)，也是一種免疫性疾病。Tauman及其團(tuán)隊(duì)的研究表明，呼吸睡眠紊亂的兒童血漿hs-CRP水平增加，并且與睡眠呼吸紊亂指數(shù)（AHI）、最低動(dòng)脈血氧飽和度和覺醒指數(shù)的有明顯的相關(guān)性。睡眠呼吸紊亂的兒童存在間歇性出現(xiàn)的低氧血癥以及破碎的睡眠結(jié)構(gòu)，這些是構(gòu)成全身炎癥反應(yīng)的基礎(chǔ)[1]。而近些年發(fā)現(xiàn)的促炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素17（IL-17）和白細(xì)胞介素23（IL-23）則對(duì)這一發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了很好的補(bǔ)充。IL-17是由Th17細(xì)胞和各種細(xì)胞（包括免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞）分泌的促炎性細(xì)胞因子。IL-17A和IL-17F由IL-17分泌細(xì)胞分泌，這兩種細(xì)胞因子可形成同源二聚體或異質(zhì)二聚體，并與巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞形成IL-17受體復(fù)合物。導(dǎo)致炎癥反應(yīng)如中性粒細(xì)胞浸潤、組織破壞和新生血管形成。IL-23可以促進(jìn)激活的記憶細(xì)胞產(chǎn)生IL-17，對(duì)Th17細(xì)胞的維持和擴(kuò)增有著重要的作用。目前IL-17及IL-23在兒童OSAHS方面的研究報(bào)道較少，本文擬通過對(duì)OSAHS患兒及健康兒童血清IL-17及IL-23的表達(dá)進(jìn)行研究，以期探討兩者在兒童OSAHS中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇OSAHS患兒27例為試驗(yàn)組，來自佳木斯大學(xué)附一院耳鼻喉科，就診時(shí)間為2017年1-9月；選擇同時(shí)期在健康門診進(jìn)行常規(guī)體檢的正常兒童32例為對(duì)照組，通過詳細(xì)的病史詢問排除睡眠打鼾者。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡4～12歲；診斷符合《兒童阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診療指南草案（烏魯木齊）》[2]。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有先天性疾病、哮喘、變應(yīng)性鼻炎等過敏性疾病，肥胖患兒（參考國際肥胖工作組織推薦的標(biāo)準(zhǔn)）[3]?；純杭议L均知情同意，該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 試驗(yàn)材料 IL-23和IL-17的ELISA試劑盒，上述試劑盒均購自欣博盛生物科技有限公司，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程均按試劑使用說明嚴(yán)格操作。

1.3 試驗(yàn)方法 多導(dǎo)睡眠呼吸監(jiān)測OSAHS患兒在入院第1晚就行多導(dǎo)睡眠監(jiān)測（多導(dǎo)睡眠監(jiān)測系統(tǒng)是偉康公司生產(chǎn)的StrardⅡ型）。主要的監(jiān)測項(xiàng)目有：血氧飽和度，脈搏，口鼻氣流?；純壕谌朐旱?天晨起空腹抽靜脈血3 mL進(jìn)行血清中IL-17、IL-23的水平測定，在常溫自然凝固20 min，以

2 500 r/min進(jìn)行離心，時(shí)間為20 min，收集上清液，-80 ℃冷凍保存待用；采用雙抗體夾心ABC-Elisa法進(jìn)行血清IL-17、血清IL-23測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以M（Q）表示，組間比較采用秩和檢驗(yàn)，使用Pearson相關(guān)分析分別對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組中的IL-23與IL-17的進(jìn)行相關(guān)性檢測。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中IL-17、IL-23的含量水平比較 試驗(yàn)組IL-17、IL-23含量均明顯高于對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-3.241、-1.971，P<0.05）。見表1。

2.2 兩組IL-23與IL-17的相關(guān)分析 試驗(yàn)組血清IL-17含量與IL-23含量呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.564，P<0.05）；對(duì)照組血清IL-17含量與IL-23含量呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.544，P<0.05）。

3 討論

兒童睡眠呼吸疾病中以睡眠呼吸暫停綜合征（OSAHS）最為常見，不過其發(fā)病率報(bào)道不多。根據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，國外兒童打鼾的發(fā)病率的報(bào)道從4.9%～7.9%不等，伴呼吸暫停的發(fā)病率為0.9%～1.8%[4-6]，年齡和性別均沒有顯著差異；而國內(nèi)的報(bào)道打鼾的發(fā)病率為2.2%，合并OSAHS的則為2.2%[7]。OSAHS使兒童夜間睡眠質(zhì)量下降，睡眠期間微覺醒次數(shù)增多，導(dǎo)致神經(jīng)認(rèn)知功能的下降，引起包括注意力不集中、多動(dòng)障礙等一系列癥狀[8-11]。OSAHS對(duì)兒童健康和發(fā)育有著長期的慢性影響[12-17]。兒童的腺樣體肥大和/或扁桃體肥大是最多見的病因，其他的還包括神經(jīng)肌肉功能障礙，面顱骨發(fā)育畸形等。發(fā)生于OSA的全身性慢性炎癥提示，呼吸暫停低通氣指數(shù)與炎性細(xì)胞因子水平之間可能存在相關(guān)性[18-19]。張麗凈等[20]研究也指出：在對(duì)血清中的TNF-α和IL-4含量進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，腺樣體肥大的患兒，這兩種物質(zhì)的含量均有不同程度的提高，而且，升高的幅度與腺樣體肥大程度（A/N）有正相關(guān)性。目前，兒童OSAHS的病因、病理尚沒有像成人OSAHS一樣研究的那么清楚，但為大家公認(rèn)的發(fā)病因素有：間接性低氧血癥、睡眠碎片化、局部或全身的炎癥反應(yīng)，以及遺傳、個(gè)人體質(zhì)等其他因素。最近有許多研究表明，全身或局部炎癥反應(yīng)，均不同程度的存在于OSAHS兒童[1，21-22]。其中有兩種重要的細(xì)胞因子如IL-17及IL-23與兒童OSAHS存在著密切的相關(guān)性。Th1、Th2、Treg以及Th17等T細(xì)胞亞群都是由幼稚CD4+ T細(xì)胞分化形成。作為來源于T細(xì)胞的細(xì)胞因子IL-17，它于1995年被發(fā)現(xiàn)，因其可以與IL-6共同激活T細(xì)胞增殖而命名[23]。

IL-17又被稱作IL-17A，其和IL-17F都屬于IL-17家族。它們是細(xì)胞因子如IL-1、IL-6、IL-23刺激IL-17分泌細(xì)胞的產(chǎn)物。IL-17A與IL-17F既可以形成同源二聚體，還可以形成異質(zhì)二聚體，這些二聚體再與IL-17炎癥相關(guān)細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞形成IL-17受體復(fù)合物。IL-1、IL-6和TNF-α等細(xì)胞因子既是活化的炎癥細(xì)胞的產(chǎn)物，又可以和炎性細(xì)胞共同刺激，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞浸潤，組織破壞和新生血管形成，形成炎癥反應(yīng)。IL-17對(duì)多種細(xì)胞靶點(diǎn)都有促炎性作用，這些細(xì)胞包括上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。目前已被證明IL-17的主要功能在炎癥反應(yīng)的效應(yīng)階段[24]。呼吸系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)也有IL-17的參與，以致引起氣道的慢性炎癥[25-26]；哮喘患者中就可以檢測到IL-17F的高水平表達(dá)[27]。IL-17也與成人OSA有關(guān)聯(lián)：Th17/Treg（調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）比例升高，血漿中細(xì)胞因子IL-6和IL-17的過度表達(dá)，微環(huán)境過度分泌的促炎性因子均可導(dǎo)致OSAHS的發(fā)展[28]。對(duì)OSAHS兒童來說，從扁桃體組織中可以檢測出來高含量細(xì)胞因子如IL-1b、IL-10、IL-17A，這表明炎癥反應(yīng)活化了T細(xì)胞[29]。在本研究中，OSAHS兒童血清IL-17含量高于正常對(duì)照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這提示在兒童OSAHS的發(fā)病中，較高濃度的血清IL-17可能有著重要的作用。Oppmann等[30]最早發(fā)現(xiàn)了IL-23的存在。作為細(xì)胞因子IL-12家族的一員，不論是在小鼠，還是在人，激活的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和T、B細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞均有表達(dá)；其是異二聚體分子，單個(gè)獨(dú)特的p19亞基以及p40亞單位組成，而這個(gè)亞單位是與IL-12共享的；致病性CD+T細(xì)胞群擴(kuò)增離不開IL-23。Aggarwal等[31]發(fā)現(xiàn)在IL-23存在的情況下活化的T細(xì)胞導(dǎo)致Th17細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致IL-17水平的增加。Th17反應(yīng)的特征是生產(chǎn)的IL-17（以及其他炎性細(xì)胞因子）并且很大程度上靠IL-23來擴(kuò)增和維持它們的表型，因此，出現(xiàn)了IL-23/IL-17軸的概念。關(guān)于IL-23/IL-17軸的研究陸續(xù)出現(xiàn)在銀屑病關(guān)節(jié)炎、過敏性紫癜以及過敏性鼻炎等炎癥性疾病中，這些研究結(jié)果顯示，IL-23/IL-17軸與炎癥性疾病有著密切的聯(lián)系[32-34]。本研究結(jié)果顯示OSAHS患兒血清IL-23的含量水平高于正常對(duì)照組，而且兩組血清中IL-23和IL-17濃度具有明顯相關(guān)性（試驗(yàn)組相關(guān)系數(shù)r=0.564，P<0.05；對(duì)照組相關(guān)系數(shù)r=0.544，P<0.05；均屬正相關(guān)），這個(gè)結(jié)果也提示了存在IL-23/IL-17軸。綜上所述，青春前期的兒童中，OSAHS組患者有著較高的促炎性介質(zhì)IL-17和IL-23的表達(dá)，兩者存在著相關(guān)性，這為幫助診斷小兒阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征以及提供治療后隨訪的潛在標(biāo)記打開了新的思路。

筆者研究上也存在著一些不足：首先，筆者研究的對(duì)象是僅限于黑龍江東部地區(qū)，病源來源有限，若能將樣本來源擴(kuò)大將能取得更好的效果；其次，樣本量偏少，以至于數(shù)據(jù)分布稍顯零散，是一個(gè)整體較低的數(shù)量，筆者會(huì)在今后的臨床工作累計(jì)更多樣本，以便于進(jìn)行更深一層的研究與探討。

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（收稿日期：2017-01-23） （本文編輯：周亞杰）