楊八十，楊麗娜，葉麗娟，楊育儒，陳錦珊

0 引 言

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010 版)》第一百四十三條規(guī)定：清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，證實(shí)其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗(yàn)方法的靈敏度等因素[1]。TLPYG-500配液罐、LT-130自動(dòng)定量液體灌裝機(jī)是我院配制外用液體制劑的重要設(shè)備，對(duì)設(shè)備進(jìn)行徹底地清潔，保證設(shè)備的清潔衛(wèi)生，關(guān)系到共線生產(chǎn)外用液體制劑的最終質(zhì)量。在制劑配制過(guò)程中，按照制定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行清潔后，需要通過(guò)驗(yàn)證來(lái)判斷清洗結(jié)果是否符合規(guī)定要求[2]。本文主要研究配液罐及分裝系統(tǒng)清潔規(guī)程的可靠性，為外用液體制劑設(shè)備的清潔驗(yàn)證提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1材料TLPYG-500配液罐(500 L，溫州天靈制藥機(jī)械有限公司)；LT-130自動(dòng)定量液體灌裝機(jī)(聯(lián)騰機(jī)械有限公司)；硅膠管、灌裝針頭；高效液相色譜儀(Agilent1200)、具塞玻璃瓶(250 mL)、培養(yǎng)皿、恒溫恒濕培養(yǎng)箱(LRHS-400-Ⅲ，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司)；聚維酮碘(海南南杭藥業(yè)有限公司，批號(hào)：1605207)、聚維酮碘溶液(醫(yī)院自制，批號(hào)：20170426)、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號(hào)：3105542)、R2A瓊脂培養(yǎng)基(廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號(hào)：3102431)。

1.2 方法

1.2.1驗(yàn)證對(duì)象選擇外用液體制劑配制分裝系統(tǒng)是我院外用液體制劑的配制分裝設(shè)備，用于聚維酮碘溶液(1%及5%)、苯扎溴銨搽劑、復(fù)方苯酚溶液、復(fù)方硼砂溶液等外用液體制劑的配制分裝。其中，聚維酮碘為高分子化合物，在水中溶解速度慢，為上述所配制劑中最難清洗的活性成分，且顏色較深對(duì)其他制劑的質(zhì)量影響較大，因此選擇5%聚維酮碘溶液作為驗(yàn)證對(duì)象[3]。

1.2.2最終淋洗水取樣外用液體配制分裝系統(tǒng)閑置14 d后(規(guī)程中待清潔放置時(shí)間及清潔后放置時(shí)間設(shè)為14 d)配制5%聚維酮碘溶液。配制前，按相關(guān)清潔規(guī)程進(jìn)行清潔，清潔后目視無(wú)異物，分別在配液罐出口及分裝出口取最終淋洗水進(jìn)行微生物限度檢查；配制分裝完畢后，按相關(guān)清潔規(guī)程進(jìn)行清潔(每次用10 000 mL純化水沖洗，重復(fù)3次)，清潔后目視無(wú)異物，分別在配液罐出口及分裝出口取最終淋洗水進(jìn)行化學(xué)殘留物限度檢查。

1.2.3殘留物限度檢測(cè)方法聚維酮碘為1-乙烯基-2-吡咯烷酮均聚物(聚維酮)與碘的復(fù)合物，本試驗(yàn)擬建立測(cè)定聚維酮碘溶液中聚維酮的高效液相色譜法，作為化學(xué)殘留物限度的檢測(cè)方法[3]，方法學(xué)考察表明，該法精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性良好(RSD均<3.0%)，檢測(cè)限為8 μg/mL。①色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜柱為ZORBX SB- C18柱(4.6 ×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(4∶96)；流速1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)205 nm；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量20 μL。理論板數(shù)按聚維酮峰計(jì)算不低于2 500，分離度>1.5，見圖1。②對(duì)照品溶液的配制：精密量取聚維酮碘溶液(批號(hào)20170426)適量，用純化水逐步稀釋成濃度為10 μg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液；按聚維酮碘溶液處方[5]制備不含聚維酮碘的溶液作為空白對(duì)照。

1.2.4微生物限度檢查方法平皿菌落計(jì)數(shù)法：取最終淋洗水1 mL，經(jīng)薄膜過(guò)濾法處理，采用R2A瓊脂培養(yǎng)基，30～35 ℃培養(yǎng)5 d，平行做2個(gè)平皿；陰性對(duì)照：取純化水各1 mL，按上述方法同法操作。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

1.3.1化學(xué)殘留物限度參照行業(yè)規(guī)范將殘留物濃度限度定為10 μg/mL，即上一批產(chǎn)品殘留在設(shè)備中的物質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中的濃度不得高于10 μg/mL[6-8]。聚維酮碘不屬于高活性、高敏感性藥品，該限度是足夠安全的。因此，本試驗(yàn)建立檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為最終淋洗水樣品中聚維酮碘殘留物的濃度≤10 μg/mL。

1.3.2微生物限度外用液體制劑配液罐及分裝設(shè)備最終采用純化水清潔，本試驗(yàn)最終淋洗水樣品中微生物限度參考《中國(guó)藥典》(2015版)純化水項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定，即最終淋洗水中需氧菌總數(shù)不得過(guò)100 cfu/mL[5]。

2 結(jié) 果

2.1化學(xué)殘留物限度檢測(cè)結(jié)果取最終淋洗水、對(duì)照品溶液及空白對(duì)照液，按“1.2.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，檢驗(yàn)結(jié)果均未達(dá)到檢測(cè)限，符合規(guī)定，見表1。

2.2微生物限度檢測(cè)結(jié)果取最終淋洗水1 mL及對(duì)照品溶液1 mL按“1.2.4”項(xiàng)下方法操作，檢驗(yàn)結(jié)果均符合規(guī)定，見表2。

a：聚維酮碘對(duì)照品溶液；b：陰性樣品溶液圖1 對(duì)照品及陰性樣品色譜圖

表1化學(xué)殘留物限度檢測(cè)結(jié)果

檢查日期取樣點(diǎn)限度值檢驗(yàn)結(jié)果2017.05.31配液罐出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定分裝出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定2017.07.01配液罐出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定分裝出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定2017.10.19配液罐出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定分裝出口聚維酮濃度為10μg/mL時(shí)的峰面積未達(dá)到檢測(cè)限,符合規(guī)定

表2微生物限度檢測(cè)結(jié)果

檢查日期取樣點(diǎn)限度值檢驗(yàn)結(jié)果2017.05.31配液罐出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定分裝出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定純化水需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定2017.07.01配液罐出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定分裝出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定純化水需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定2017.10.19配液罐出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定分裝出口需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定純化水需氧菌總數(shù)不得過(guò)100cfu/mL符合規(guī)定

3 討 論

3.1驗(yàn)證結(jié)果分析清潔驗(yàn)證是通過(guò)文件證明清潔程序有效性的活動(dòng)，目的是確保產(chǎn)品不會(huì)受到來(lái)自于同一設(shè)備上生產(chǎn)的其他產(chǎn)品的殘留物、清潔劑及微生物污染。本試驗(yàn)選擇我院外用液體制劑中最難清洗的活性成分聚維酮碘為驗(yàn)證對(duì)象，根據(jù)清潔驗(yàn)證方案，分別進(jìn)行最終淋洗水殘留物和微生物限度的檢測(cè)，結(jié)果表明按照《TLPYG-500配液罐操作規(guī)程》《LT-130自動(dòng)定量液體灌裝機(jī)操作規(guī)程》中清潔程序清潔后，配液罐及分裝設(shè)備上的殘留物及微生物均低于規(guī)定的清洗限度要求，不會(huì)對(duì)共線生產(chǎn)的產(chǎn)品造成交叉污染。因此，對(duì)該設(shè)備的清洗效果具有良好的穩(wěn)定性和可靠性。

3.2淋洗水法的清潔驗(yàn)證常用的清潔驗(yàn)證取樣方法分為淋洗水法和擦拭法兩種。淋洗水法適用于擦拭法取樣，不易接觸到的表面，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)及結(jié)合我院外用制劑使用配液罐設(shè)備屬性(內(nèi)部為光滑不銹鋼材質(zhì)，頂部有噴淋球，清洗時(shí)純化水可以覆蓋設(shè)備的全表面)考慮，本清潔驗(yàn)證最終采取淋洗水法[3,9]。淋洗水法是通過(guò)使用適當(dāng)溶劑對(duì)設(shè)備表面淋洗之后收集淋洗液的取樣方法，其中包括收集清潔程序的最終淋洗水或清潔后使用額外溶劑淋洗的方式。本試驗(yàn)采用收集清潔程序的最終淋洗水，此方法相比于額外溶劑淋洗的方法有以下兩點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：①?gòu)呐渲乒藜胺盅b出口取樣，更易控制取樣部位；②使用純化水作為最終淋洗水，可避免因引入額外溶劑而造成溶劑殘留問(wèn)題，操作簡(jiǎn)便且節(jié)約成本，可廣泛應(yīng)用于淋洗水能接觸到設(shè)備全部表面的清潔驗(yàn)證。需要特別注意的是，驗(yàn)證前應(yīng)確保清潔程序、取樣方法及驗(yàn)證方案已經(jīng)批準(zhǔn)，檢驗(yàn)分析方法經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；其次，應(yīng)對(duì)清潔操作人員進(jìn)行相關(guān)的培訓(xùn)，防止人為因素導(dǎo)致的差錯(cuò)[10]；第三，清潔驗(yàn)證至少執(zhí)行連續(xù)三個(gè)成功的清潔循環(huán)。

3.3關(guān)于再驗(yàn)證管理已驗(yàn)證過(guò)的清潔程序應(yīng)通過(guò)變更管理控制，不得隨意更改。當(dāng)出現(xiàn)以下任一情況時(shí)，需對(duì)本清潔規(guī)程進(jìn)行重新驗(yàn)證：①當(dāng)清潔程序發(fā)生變更并可能影響清潔效果時(shí)，如清潔劑的配方發(fā)生變化或引入新的清潔劑或清潔程序參數(shù)發(fā)生改變時(shí)；②當(dāng)設(shè)備發(fā)生變更并可能影響到清潔效果時(shí)；③當(dāng)引入新產(chǎn)品且最難清洗的活性成份發(fā)生變化；④當(dāng)日常監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn)異常結(jié)果時(shí)；⑤周期性再驗(yàn)證[11-12]。