劉瓊，張碧魚，張韋深，汪雪蘭，龍?zhí)斐?/p>

（中山大學 新華學院，廣東廣州 510520）

1 青蛙（蟾蜍）經口腔一步法毀腦毀脊髓方法介紹

青蛙（蟾蜍）經口腔一步法毀腦毀脊髓方法（一步法）是經口腔顱骨底面中央部位的蝶篩骨下方進針，腦脊髓穿刺法。此方法的具體做法如下：取青蛙（蟾蜍）一只，操作者左手拿青蛙（蟾蜍），使其身體平躺，腹部向上，頭向著操作者。右手拉開青蛙（蟾蜍）下頜，并用左手把打開的青蛙（蟾蜍）的下頜撐開。因為青蛙（蟾蜍）沒有牙齒，打開口腔操作對操作者沒有傷害；將金屬探針（毀髓針）探入蛙的口腔上顎，于兩眼球前正中部位斜向前進針，稍用力，穿破顱骨底面中央部位的蝶篩骨后，探針進入顱腔，平持探針，上下左右輕輕擺動，搗毀腦組織，再由前向后進針，出枕骨大孔，順勢進入椎管，破壞掉脊髓。由于蝶篩骨上布滿篩孔樣的細微孔隙，此骨容易捅穿；在保持蛙頭與身體正常解剖位置的情況下，探針容易進入椎管。操作時探針從前向后，一個方向一次性進針，同時完成腦與脊髓的損毀，方法簡單、有效。同時，此方法還能使操作者避免蟾蜍的耳后腺分泌物噴射入眼睛的危險。（見圖1）

圖1 進針點

經口腔一步法毀腦毀脊髓成功的標志和經體表背部腦脊髓穿刺法一樣，可以看到青蛙（蟾蜍）下肢蹬直，檢查四肢松軟、對稱，沒有呼吸，見圖2。

圖2 一步法

經口腔一步法毀腦毀脊髓方法與現(xiàn)在常規(guī)教學所用經體表背部毀腦毀脊髓穿刺法方法相比，此方法進針部位不同，決定腦脊髓穿刺法操作方法不同，此方法體表定位標志明顯，操作流程更簡單，對初學者來說更易掌握，穿刺術所用時間短、成功率高。對各種規(guī)格大小的青蛙（蟾蜍）都好用，尤其對特別小或者特別大的青蛙（蟾蜍），采用常規(guī)方法較困難，就更顯示出其優(yōu)越性。大量教學案例顯示，對一些采用常規(guī)方法失敗的青蛙（蟾蜍），此方法仍然可以穿刺成功。

2 兩種方法比較

現(xiàn)在教科書和論文都采用青蛙（蟾蜍）損毀腦和脊髓（腦脊髓穿刺法）。傳統(tǒng)方法進針采用經過體表—背部在顱骨與椎體連接處的中點進針，進行腦脊髓穿刺，簡稱經體表背部腦脊髓穿刺法（體表法）。

具體做法如下：取青蛙（蟾蜍）一只，用自來水沖洗干凈；左手握住青蛙（蟾蜍），食指按壓吻端，拇指按壓背部，使其頭部盡量前俯；右手持探針，從相當于機枕骨大孔處（用探針從兩眼中間開始沿著脊柱方向下滑，針尖觸到凹陷處即是枕骨大孔處，它位于蛙的顱骨與脊柱中間）垂直刺入，然后通過枕骨大也向前刺入顱腔，左右攪動，充分搗毀腦組織；接著將探針抽回至進針處（即枕骨大孔處，注意勿全部拔出探針），再向后刺入椎管，反復提插搗毀脊髓。此時，如青蛙（蟾蜍）四肢松軟、對稱、呼吸消失，表明腦和脊髓已被完全損毀[1-3]。

2.1 體表法缺點

（1）初學者不易掌握進針部位，往往進針部位選不準確，影響后面的毀腦和脊髓。（2）進針點組織連接較緊，進針力度、深度、方向不好把握，此處操作更多靠操作者個人經驗和憑感覺，初學者不易掌握，多數(shù)學生需要多只動物實驗后才能一次性成功刺入顱腔。（3）向前損毀腦腔后，“探針抽回至進針處（即枕骨大孔處，注意勿全部拔出探針），再向后刺入椎管”這步操作對初學者感覺最困難，大數(shù)學生因為不能進入椎管，探針誤入胸腹腔，或者刺破皮膚、誤傷、刺破手。（4）蟾蜍耳后腺分泌物可能會射入操作者的眼部，對操作者造成損傷。（5）如果選用的青蛙（蟾蜍）特別大或者別小，進針點選取、損毀腦和脊髓都比較困難。（6）初學者成功率不高，導致毀腦和脊髓不徹底，影響后續(xù)實驗。

2.2 一步法優(yōu)點

（1）進針點易找。進針點選取部位在體表解剖標志明顯、范圍較大，初學者容易找準部位。（2）進針較易。經口腔蝶篩骨下方進針，因蝶篩骨，骨質有孔，較薄，所以容易進針。（3）方向明確。進針后顱腔范圍大，不會誤入其他組織。進入顱腔后，探針上下左右輕輕擺動，搗毀腦組織，再由前向后進針，出枕骨大孔直接進入脊髓腔。因為青蛙（蟾蜍）顱腔和枕骨大孔解剖連接口較大，動物身體又是平躺著的，正常解剖結構沒有破壞，所以探針由顱腔順勢經枕骨大孔，進入椎管損毀脊髓很容易，特別對初學者。（4）本操作不受青蛙（蟾蜍）大小的影響，尤其對特別小的動物，因為椎管較細，在動物俯屈毀顱腔后，解剖結構發(fā)生改變，探針進入椎管更加困難的情況下，這種方法更顯示出優(yōu)越性。對特別大的青蛙，如果操作者的手較小，一個手拿住動物，并讓動物俯屈較困難。把握進針的力度、準確刺入顱腔和椎管會更困難。經體表法毀損不完全或誤入其他部位的，改用一步法，經過大量試驗都能成功。（5）本方法讓動物平躺在操作者手上，背向下，可避免蟾蜍耳后腺分泌物噴射入眼睛。（6）與體表法相比，使用本方法到損毀腦和脊髓完成所用時間，至少縮短70%，特別是對初學者。（7）與體表法相比，進針點沒有出血和腦脊液的流出，更符合動物倫理學的要求。

3 結語

青蛙（蟾蜍）經口腔一步法毀腦毀脊髓方法是從青蛙（蟾蜍）正常結構中最薄弱的蝶篩骨部位進入顱腔，由顱腔順著自然解剖路徑進入脊髓腔。和現(xiàn)在常規(guī)教學所用方法相比，在體表定位準確性、操作難度、節(jié)省時間、一次性成功率等方面，經過學校三年500多學生教學使用，都有明顯優(yōu)勢，值得在所有學校推廣使用。