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摘要: 該研究采用稀釋涂布法結(jié)合形態(tài)觀察、16S rRNA基因序列分析,對廣西北海川蔓藻(Ruppia maritima)內(nèi)生及根際細菌的物種多樣性進行了研究,并采用瓊脂擴散法和光度計法分析了其粗提物抑制馬爾尼菲青霉菌活性。結(jié)果表明:從川蔓藻中分離到可培養(yǎng)內(nèi)生細菌26株,根際可培養(yǎng)細菌31株。分別將內(nèi)生細菌歸屬為10科12屬13種,根際分離出細菌歸屬為9科14屬19種,其中5株根際細菌可能為潛在新種。獲得8株細菌對馬爾尼菲青霉菌有抑制活性,總陽性率為25.0%。其中,菌株BGMRC 2015、BGMRC 2059、BGMRC 2043的粗提物表現(xiàn)出較強的抑制馬爾尼菲青霉菌效果,其MIC分別為(1.800±0.045)、(1.881±0.061)、(1.604±0.021)mg·mL-1。川蔓藻中可培養(yǎng)細菌具有較高的物種多樣性,蘊藏著豐富的新物種資源,且富含抑菌活性良好的菌株。
關(guān)鍵詞: 川蔓藻, 細菌, 物種多樣性, 馬爾尼菲青霉菌, 抑菌活性
中圖分類號: Q939.1文獻標識碼: A文章編號: 1000-3142(2018)07-0924-10
Abstract: The purpose of this study was to investigate the diversity of endophytic and rhizospheric bacteria of Ruppia maritima collected from Beihai City and antifungal activities against Penicilliosis marneffei. The endophytic and rhizosphere bacteria isolated from Ruppia maritima were analyzed by method of dilution butteron on plate. 16S rRNA gene sequencing was employed to explore species diversities and the effects of the crude extract from bacteria against Penicilliosis marneffei with agar diffusion method and spectrophotometer method. Total of 26 strains of endophytic bacteria and 31 strains of rhizosphere bacteria were isolated from Ruppia maritina. Thirteen species of endophytic bacteria were obtained and classified into twelve genera and ten families. Nineteen species of bacteria were isolated from rhizosphere and belonging to fourteen generas and nine families. And five strains in the rhizosphere were potential new genera. Crude extracts of eight strains showed inhibition effect against Penicilliosis marneffei, three of which had strong antifungal activities, and their MIC50 were (1.800 ± 0.045), (1.881 ± 0.061) and (1.604 ± 0.021) mg·mL-1. Endophytic and rhizospheric bacteria of Ruppia maritima are genetically diverse and most of them showed strong inhibition effects against Penicilliosis marneffei.
Key words: Ruppia maritima, bacteria, species diversity, Penicilliosis marneffei, antifungal activities
馬爾尼菲青霉菌(Penicilliosis marneffei)是一種獨特的具有傳染性的二相性真菌,在東南亞地區(qū)的艾滋病患者中最為常見,通常能感染AIDS患者及使用類固醇皮質(zhì)激素的病人,可作為診斷AIDS的一個輔助指標(Huang et al, 2013)。馬爾尼菲青霉菌是一種條件致病菌,容易感染免疫功能低的人群,并引發(fā)播散性的馬爾尼菲青霉病。近年來,激素和免疫抑制劑以及廣譜抗生素使用廣泛,加上介入治療和器官移植的開展,艾滋病病人增加迅速,原發(fā)性和繼發(fā)性免疫功能低的人群逐漸擴大,因此馬爾尼菲青霉病不斷增多。若不能及時獲得確診和有效的抗真菌治療,其死亡率極高(Wong et al,2001)。目前,治療馬爾尼菲青霉菌病的藥物有氟康唑、伊曲康唑、兩性霉素B等,往往都是兩種及兩種以上藥物結(jié)合使用。氟康唑作為首選藥物,其副反應小,但治療青霉菌療效差,復發(fā)率高。因此,尋找到低劑量、高活性及副反應小的馬爾尼菲青霉菌抑制劑顯得尤為重要。
川蔓藻是一種分布廣泛的底棲水生維管束植物,是全球溫帶、亞熱帶海域及鹽湖地區(qū)中發(fā)生自然恢復的先鋒植物,具有強的耐鹽性和去除氮磷能力。據(jù)報道,川蔓藻中的化學成分具有很好的生物活性,Dellagreca et al(2000)從川蔓藻中分離到7種具有抑制小球藻和羊角月牙藻活性的半日花烷型二萜類化合物。目前,川蔓藻的研究工作大部分集中在培育、防護、生態(tài)作用及其內(nèi)在成分影響因素上,而關(guān)于川蔓藻相關(guān)微生物研究未見報道,且馬爾尼菲青霉菌體外活性篩選的研究也鮮有報道。對廣西北海灘涂川蔓藻(Ruppia maritima)中可培養(yǎng)內(nèi)生和根際細菌進行多樣性分析,并展開細菌發(fā)酵粗提物對馬爾尼菲青霉菌的抑制活性研究,以期為廣西北海灘涂川蔓藻開發(fā)利用以及臨床耐藥性馬爾尼菲青霉菌抑制劑的研發(fā)提供前期基礎(chǔ)。
1材料與方法
1.1 材料
1.1.1 樣本2015年4月27日直接在廣西北海灘涂(108°50′42″ E,21°55′25″ N)采集川蔓藻。用密封袋裝好,并將根部周邊土壤一起裝在密封袋內(nèi),帶回處理。
1.1.2 試劑和儀器試劑:培養(yǎng)基原料、TAE緩沖液、2×EasyTaq SuperMix、引物(27f和1492r)、DNA Marker、GoldView核酸染料等購自北京康為世紀生物科技有限公司;Chelex-100樹脂購自美國BioRad公司;其他有機試劑均為國產(chǎn)的分析純試劑。儀器:SW-CJ-2F型超凈工作臺(杭州佳濾設(shè)備有限公司),HH.B11-BS-II型恒溫培養(yǎng)箱(東莞市恒宇儀器有限公司),恒溫振蕩器(美國CRYSTAL),VB-55型高壓滅菌鍋(德國SYSTEC),MINIB-100型金屬浴(杭州米歐儀器有限公司),MINI-6k型迷你離心機(常州市國旺儀器制造有限公司),Tgradient型PCR擴增儀(德國Biometra),電泳儀(美國BioRad),N1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本EYELA),凝膠成像儀(Carestream),VCX750細胞破碎儀(美國Sonics)。
1.1.3 培養(yǎng)基(1)分離培養(yǎng)基:2216E,M10,M7,M9和AGG,詳情見表1。(2)純化培養(yǎng)基為改良的ISP2固體培養(yǎng)基。其中,酵母提取物為2.0 g,麥芽提取物為2.0 g,葡萄糖為2.0 g,瓊脂為14.0 g,海水為1 000 mL。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基為改良的ISP2液體培養(yǎng)基。(4)指示菌培養(yǎng)基為PDA固體培養(yǎng)基和RPMI 1640液體培養(yǎng)基。
1.1.4 指示菌馬爾尼菲青霉菌,購買于北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司。
1.2 菌株的分離純化
1.2.1 植物組織預處理參照溝葉結(jié)縷草表面滅菌方法(王棟等,2008),先將川蔓藻用無菌水清洗,再用75%的酒精溶液浸泡2 min,最后用無菌水沖洗3遍以去除酒精。收集川蔓藻的最后1次漂洗液(表面消毒后的),并涂布在ISP2平板上,28 ℃培養(yǎng)72 h后若未見菌落生長,說明川蔓藻表面消毒徹底。取樣品0.5 g進行研磨,先在研磨好的樣品中加入1 mL的無菌水,混合均勻后,制成10-1的植物懸液,然后依次制成10-2、10-3稀釋度的樣液,待用。
1.2.2 根際預處理用滅菌的竹簽輕輕撥開川蔓藻根部土壤,使其根系暴露出來,收集根須表面附著的土壤(距離根須5 mm以內(nèi)),先稱取2.0 g土壤樣品裝于20 mL無菌水(內(nèi)有玻璃珠)的錐形瓶中,手動搖勻,使其充分均質(zhì)即可,然后依次制成10-2、10-3稀釋度的樣液,盡快涂布處理。
1.2.3 接種分別取各梯度稀釋后的樣液0.2 mL,接種于5種分離培養(yǎng)基中,每個濃度梯度平行接種于2個平板,28 ℃培養(yǎng)21 d后觀察形態(tài)變化,并挑選不同的菌落進行純化,同時記錄菌落數(shù)和形態(tài)特征。將純化后的菌株制成凍干牛奶管于4 ℃中保存,同時制成20%(v/v)甘油管保存于-80 ℃中。
1.3 16S rRNA的系統(tǒng)發(fā)育分析
用chelex-100樹脂提取菌種的DNA(周雙清等,2010),PCR擴增參照Walsh et al(1991)的方法進行。擴增和測序引物均為細菌通用引物,即27F(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCA-3′)和1492R(5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)。PCR反應條件:94 ℃預變性8 min,94 ℃變性50 s,55 ℃退火45 s,72 ℃延伸90 s,共30個循環(huán),循環(huán)結(jié)束后,72 ℃延伸維持10 min。將擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測合格后,委托上海美吉生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司廣州分公司進行測序。將5株潛在新種的PCR擴增產(chǎn)物條帶切膠回收,連接pEASY-T1克隆載體后,轉(zhuǎn)化至Trans-T1感受態(tài)細胞中,通過藍白篩選,挑取陽性克隆子,采用PCR法驗證克隆的片段大小并送上海美吉生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司廣州分公司測序。將測序結(jié)果利用DNAStar軟件進行整理,用EzTaxon服務器(http://www.eztaxon.org/)進行在線比對;選取同源性最高的菌株序列作為參比對象,用MEGA5.0軟件,采用Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)樹,用Boostrap 1 000次檢測各分支的置信值,對各菌株的系統(tǒng)發(fā)育地位進行分析(Tamura et al, 2011)。
1.4 細菌粗提物對馬爾尼菲青霉菌的敏感性
1.4.1 瓊脂擴散法篩選活性菌株采用改良的瓊脂擴散法(韋高和李菊裳,2005)測定馬爾尼菲青霉菌擴散區(qū)域大小。挑取少量菌體,接種于RPMI 1640液體培養(yǎng)基中,于25 ℃、180 r·min-1下?lián)u床培養(yǎng)24 h,制備菌懸液。將1%菌懸液(v/v)加入滅菌后的PDA固體培養(yǎng)基(冷卻至55 ℃左右)中混勻,將15 mL培養(yǎng)基倒入滅菌平皿中。待培養(yǎng)基凝固,然后將培養(yǎng)好的馬爾尼菲青霉菌打成直徑為6 mm的菌餅(初始菌餅)貼于平皿中,使有菌絲面朝下貼于每個含待測菌的PDA固體培養(yǎng)基中,每個板4塊菌餅,陰性對照為PDA固體培養(yǎng)基,25 ℃恒溫培養(yǎng)。隔天觀察一次結(jié)果,并用游標卡尺測定馬爾尼菲青霉菌擴散區(qū)域大小,每個實驗重復2次。
1.4.2 光度計法確定MIC值根據(jù)真菌藥物敏感試驗的標準化文件中的M38-A2(絲狀真菌稀釋法藥物敏感試驗的參考方法-第二版)說明,設(shè)計體外抑制馬爾尼菲青霉菌活性測定實驗。
1.4.2.1 陽性對照組濃度值的確定參照體外抗真菌藥敏實驗微量稀釋(Morace et al, 2002)、酶標儀測定抗菌物質(zhì)抑菌活性(周子雄等,2014)和氣絲狀真菌吸光度測定(Kajimura & Kaneda, 1996)。在無菌條件下,使用96孔板進行實驗。以馬爾尼菲青霉菌作為目的菌株,將菌接種于PDA培養(yǎng)基上,25 ℃培養(yǎng)3 d,用RPMI 1640液體培養(yǎng)基配制孢子懸浮液,使得培養(yǎng)液中孢子濃度為0.4~5×104 cfu·mL-1。將100 μL孢子懸浮液加入96孔板中,用少量DMSO溶解兩性霉素B(AMB)和酮康唑(KET),分別加入96孔板中,使其終濃度分別為0.001、0.01、0.1、1及10 μg·mL-1。平衡5 min后,測定540 nm波長的OD值,記為OD1值;將96孔板放置25 ℃培養(yǎng)3 d后,測定540 nm波長的OD值,記為OD2值。以DMSO作為空白對照。實驗重復2次,確定兩性霉素AMB的MIC100(完全抑制真菌的最小抑制濃度的MIC,下同)和酮康唑KET的MIC80(抑制80%真菌最小抑制濃度的MIC,下同),重復實驗驗證,最終確定兩性霉素B(AMB)和酮康唑(KET)對馬爾尼菲青霉菌最低抑制濃度MIC值。
計算公式:
抑制率=△OD空白組-(OD1-OD2)△OD空白組×100%。
1.4.2.2 細菌粗提物的制備將活性好的細菌置于ISP2固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),取生長于對數(shù)期后的菌株接種于裝有100 mL發(fā)酵培養(yǎng)液的500 mL錐形瓶中,每株菌接種6瓶,180 r·min-1,28 ℃培養(yǎng)7 d。發(fā)酵液用細胞破碎儀處理20 min,將處理后的發(fā)酵液用1∶1(v/v)乙酸乙酯萃取3次,每次間隔至少20 min。濃縮干燥后,置于干燥器中保存,備用。
1.4.2.3 菌株發(fā)酵粗提物的最小抑制濃度MIC50將馬爾尼菲青霉菌接種于PDA固體培養(yǎng)基上,25 ℃培養(yǎng)3 d,用RPMI 1640液體培養(yǎng)基配制孢子懸浮液,使得培養(yǎng)液中孢子濃度為0.4~5×104 cfu·mL-1。用DMSO和RPMI 1640液體培養(yǎng)基將菌株發(fā)酵粗提物配制一系列濃度藥液。取100 μL菌懸液和100 μL藥液加入96孔板中,藥液終濃度為1.25、2.5、5.0 mg·mL-1。每濃度設(shè)置3個平行,以4 μg·mL-1酮康唑為陽性對照組,DMSO為空白對照。記錄和計算數(shù)據(jù),每組實驗重復兩次。
2結(jié)果與分析
2.1 川蔓藻中內(nèi)生及根際細菌多樣性分析
采用5種分離培養(yǎng)基,從川蔓藻組織和根際中分別分離到可培養(yǎng)內(nèi)生細菌26株和31株,按照菌落的大小、形態(tài)、顏色和出現(xiàn)時間等進行細菌排重,選取44株細菌進行16S rRNA基因序列對比,獲得13種內(nèi)生細菌及19種根際細菌,隸屬于14科24屬(表2)。
初步鑒定結(jié)果表明,川蔓藻內(nèi)生細菌隸屬于3門8科12屬。根據(jù)13株內(nèi)生細菌及其參比菌株的16S rRNA基因序列構(gòu)建的N-J系統(tǒng)進化樹(圖1)。初步鑒定結(jié)果表明,川蔓藻根際細菌隸屬于4門8科14屬。根據(jù)19株根際細菌及其參比菌株的16S rRNA基因序列構(gòu)建的N-J系統(tǒng)進化樹(圖2)。
從川蔓藻根際中分離到5株細菌的16S rRNA基因序列(約1 500 bp),它們與其最近緣的典型菌株序列相似性低于97%。菌株BGMRC 2019與紅桿菌科的有效發(fā)表菌株Albidovulum xiamenense YBY-7T (HQ709061),BGMRC 2046與Stappia_f科的有效發(fā)表菌株Stappia indica B106T (EU726271),BGMRC 2048與黃桿菌科的有效發(fā)表菌株Hwangdonia seohaensis HD-3T(JX546142),BGMRC 2050與根瘤菌科的有效發(fā)表菌株Rhizobium sphaerophysae CCNWGS0238T(FJ154088),BGMRC 2054與紅桿菌科有效發(fā)表菌株Oceanicola litoreus M-M22T(JX291104)發(fā)育關(guān)系最密切,其相似率分別為93.46%、95.96%、95.27%、96.10%和96.03%?;?6S rRNA基因序列,5株潛在新種與其所在菌科中鄰近菌株構(gòu)建的N-J系統(tǒng)進化樹,均能與其相似菌株在進化樹上聚為一簇,在采用Maximum-Likelihood法和Maximum-Parsimony法構(gòu)建的系統(tǒng)進化樹中5株菌種同樣形成了一個獨立分枝。由此推測,菌株BGMRC 2019、BGMRC 2046、BGMRC 2048、BGMRC 2050及BGMRC 2054分別為紅桿菌科、Stappia_f科、黃桿菌科、根瘤菌科及紅桿菌科中的一個潛在新分類單元。
2.2 不同培養(yǎng)基對內(nèi)生及根際細菌的分離效果
采用5種分離培養(yǎng)基,從川蔓藻組織及其根際中分離到細菌共57株,其中將44株細菌進行測序比對,它們在不同培養(yǎng)基上的分離效果如圖3所示。從5種分離培養(yǎng)基的分離效果來看,M10培養(yǎng)基(含有水解酪素)分離到的細菌種類最多,包含12個菌屬;M9培養(yǎng)基(含有精氨酸、寡營養(yǎng))分離到的細菌種類最少。根據(jù)菌落數(shù)的統(tǒng)計結(jié)果,AGG、M10、M7、M9和2216E培養(yǎng)基上菌落數(shù)分別為1.2×105、1.8×105、4.0×104、6.0×104和5.0×104 cfu·mL-1。M10分離培養(yǎng)基獲得13株細菌,隸屬于12屬,其獲得的菌株數(shù)和多樣性均較高;M9分離培養(yǎng)基獲得5株細菌,獲得的細菌數(shù)較少,且多樣性較少。就新穎性而言,16S rRNA基因序列相似性小于97%的菌株共有5株,占分離細菌總數(shù)的8.77%。其中2株潛在新菌(2048和2054)從M10培養(yǎng)基分離獲得,4株(2019,2046,2048和2050)潛在新菌從2216E培養(yǎng)基分離獲得。
2.3 內(nèi)生及根際細菌的屬級水平上的韋恩圖分析
在屬級水平上對川蔓藻組織及其根際來源細菌進行venn分析(圖4),從川蔓藻組織來源的13株細菌,隸屬于12屬,而從根際來源的19株細菌,隸屬于14屬。韋恩圖顯示,從川蔓藻組織和根際中獲得細菌種類存在較大的差異,共同含有兩個屬Pseudomonas sp.和Bacillus sp.。
2.4 細菌發(fā)酵粗提物對馬爾尼菲青霉菌的抑制活性
2.4.1 活性菌株篩選結(jié)果對分離純化的32株細菌進行活性篩選,結(jié)果表明,有8株細菌具有抑制效果,總陽性率為25.0%。其中,有3株細菌表現(xiàn)出極強的抑制效果(圖6)。馬爾尼菲青霉菌擴散的區(qū)域越小,其生長受到抑制作用越大,反之則越小??瞻讓φ瞻宓鸟R爾尼菲青霉菌擴散區(qū)域達到18~25 mm,實驗組的馬爾尼菲青霉菌擴散區(qū)域小于12 mm,含BGMRC 2043菌液板上未觀察到馬爾尼菲青霉菌擴散區(qū)。
2.4.2 光度計法確定MIC值重復實驗結(jié)果顯示,兩性霉素B(AMB)的MIC100為(3.573±0.121)μg·mL-1,酮康唑(KET)的MIC80為(3.828±0.074)μg·mL-1,DMSO對馬爾尼菲青霉菌無抑制作用。
選取3株活性高的菌株進行抑菌活性效果測定。表3結(jié)果顯示,在藥液濃度為1.25 mg·mL-1時,2015和2059菌對馬爾尼菲青霉菌的抑菌率均很相近,而2043菌株的抑菌率是2015和2059菌的近兩倍;在藥液濃度為2.5和5.0 mg·mL-1時,2015、2059和2043菌對馬爾尼菲青霉菌的抑菌率均很相近。用SPSS軟件計算3株細菌粗提物抑制50%馬爾尼菲青霉菌的藥物濃度,即MIC50。2043菌株粗提物的抑菌效果最佳,其MIC50為(1.604±0.021)mg·mL-1;2015和2059菌的抑菌效果相近,其MIC50值分別為(1.800±0.045)、(1.881±0.061)mg·mL-1。另外,陽性對照選用4 μg·mL-1酮康唑,其抑菌率為0.859 2±0.012。
3討論
存在于潮間帶生態(tài)系統(tǒng)中的微生物類群具有高生產(chǎn)力和多樣性,它們不斷將凋亡的潮間帶生物中的營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為植物可利用的C、P等,同時潮間帶植物莖、葉、根的滲出物又為微生物的生長提供養(yǎng)分,使其周圍的微生物多樣性更加豐富(楊雋嫻,2008)。與南方沿海潮間帶生長的紅樹植物相比,近海潮間帶鹽生植物的研究相對較少。圖 5培養(yǎng)1周后馬爾尼菲青霉菌的抑制效果川蔓藻作為一種鹽生植物生存在潮汐帶間,與陸地人工培育的川蔓藻的生存環(huán)境極其不同,其代謝途徑會為了適應生存環(huán)境而發(fā)生相應改變。為了掌握廣西北海灘涂上川蔓藻中可培養(yǎng)的內(nèi)生與根際細菌組成,本研究分別對川蔓藻的組織與根際進行采樣,利用5種培養(yǎng)基,從中分離獲得了大量細菌資源。研究發(fā)現(xiàn),川蔓藻內(nèi)生及根系呈現(xiàn)出較高的細菌生物多樣性,從川蔓藻中分離到可培養(yǎng)內(nèi)生細菌26株,歸屬為10科12屬13種;根際可培養(yǎng)細菌31株,歸屬為9科14屬19種,其中5株根際細菌為潛在新物種。其中,在植物內(nèi)和根際中均分離到優(yōu)勢菌屬Pseudomonas sp.和Bacillus sp.,其能廣泛分布在動植物內(nèi)部及其生長的環(huán)境,兩者間即存在著相互競爭,又相互產(chǎn)生作用。普遍認為,根際土壤細菌是植物根部內(nèi)生細菌主要來源,它在植物根系的微生物環(huán)境中對物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)化起重要作用(龐欣等,2000)。結(jié)果顯示,在植物內(nèi)和根際中分離到兩個共同屬,即Pseudomonas sp.和Bacillus sp.,這一結(jié)果與部分研究報道大相庭徑。陸松柳等(2011)研究發(fā)現(xiàn),植物根際微生物的數(shù)量、類群、優(yōu)勢種等存在很大差異,這主要與植物根系分泌物的種類和數(shù)量有關(guān)系,分泌物會隨植物種類的不同而存在差異。根系分泌物是植物作用于濕地微環(huán)境的重要途徑之一(夏北成等,1998),植物通過根系分泌物的釋放來改變根際微生物群落結(jié)構(gòu)。土壤環(huán)境受到植物生長的影響,使得土壤微生物群落的結(jié)構(gòu)和多樣性發(fā)生改變,受植被影響的土壤環(huán)境中土壤微生物群落多樣性比其他未受植被影響土壤環(huán)境中的微生物群落多樣性要高很多。
對這32株細菌進行抑菌活性研究,發(fā)現(xiàn)有8株細菌對馬爾尼菲青霉菌有抑制作用,總陽性率為25.0%;其中,有3株細菌表現(xiàn)出極強的抑菌活性。該3株細菌為BGMRC 2015、BGMRC 2059和BGMRC 2043,分別與Bacillus vietnamensis 15-1T、Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum FZB42T和Pseudomonas mosselii CIP 105259T相似性最高。其中,BGMRC2043的MIC50為(1.604±0.021)mg·mL-1。多種芽孢桿菌屬的細菌通過競爭營養(yǎng)空間、產(chǎn)生脂肽類抗生素、誘導植物系統(tǒng)抗性等,具有抗菌、抗腫瘤和抗炎癥等生物活性(唐金山等,2008)。對于菌株P(guān). mosselii CIP 105259T,Nishanth et al(2016)系統(tǒng)地進行了該菌代謝產(chǎn)物的活性實驗分析,其代謝產(chǎn)物中有活性小分子Pseudopyronine B,具有很好的抑制革蘭氏陽性細菌、抗植物病原真菌、抑制細胞增長及抗癌等活性。本研究發(fā)現(xiàn),P. mosselii CIP 105259T對馬爾尼菲青霉菌也具有極強的抑制活性,本研究豐富對P. mosselii CIP 105259T菌株抑菌活性的認識,也為開發(fā)新的抗生素及活性藥物等下游工作提供很好的依據(jù)。
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