劉嬋娟，周 珊，陳作棟，趙向輝，許蘭嬌，潘 珂，楊食堂，瞿明仁*，曾衛(wèi)東

(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西 南昌 330045； 2.高安裕豐農(nóng)牧有限公司，江西 高安 330800;3.江西省贛州市寧都縣畜牧局，江西 贛州 342800)

牛肉具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，且脂肪含量低等特點(diǎn)，其需求量在國(guó)內(nèi)呈日益增長(zhǎng)的趨勢(shì)。犢牛的飼養(yǎng)質(zhì)量直接影響整個(gè)肉牛養(yǎng)殖的品質(zhì)及產(chǎn)量。大豆素是大豆異黃酮的主要組分，廣泛存在于豆科植物及蔬菜，水果中。研究表明，大豆素具有非常廣泛的生物學(xué)活性，如雌激素樣作用、抗氧化、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期等，可以預(yù)防人類多種疾病，包括骨質(zhì)疏松、動(dòng)脈硬化、乳腺癌以及前列腺癌等[1-2]。這使得大豆素在動(dòng)物生產(chǎn)中也做了較多研究。日糧中添加大豆素提高了肉用仔公雞的飼料采食量、日增重、免疫器官重、飼料利用率以及血清生長(zhǎng)激素、胰島素樣生長(zhǎng)因子和睪酮水平，降低死亡率[3-5]。飼喂蛋雞大豆素提高了蛋雞產(chǎn)蛋率、日蛋重、蛋殼厚度，降低料蛋比和破蛋率[6-7]。飼喂仔公豬大豆素能夠增加日增重、血清胰島素水平和血糖濃度，降低脲氮和膽固醇濃度，提高生長(zhǎng)速度[8]。大豆素可改善肥育豬的生產(chǎn)性能，使肥育豬的平均日增重提高、料重比降低，提高了肥育豬的細(xì)胞免疫水平和機(jī)體抗氧化能力[9]。用大豆素飼喂奶牛，提高了奶牛的總抗氧化能力[10]。這些研究顯示，目前大豆素在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用主要集中在奶牛、豬、雞等研究上，對(duì)肉牛影響研究相對(duì)較少，本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加大豆素對(duì)肉牛犢公牛生長(zhǎng)性能、抗氧化能力及免疫性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用大豆素購(gòu)買自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司，純度>98%，其他技術(shù)指標(biāo)如下：干燥損失<1%、灰分<0.1%、總重金屬(砷、鉛、鎘、汞)<10 μg/g、總菌落數(shù)<1 000 cfu/g。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物、日糧及設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)選取8頭健康狀況良好，平均體質(zhì)量為(143.8±5.6)kg的6月齡犢公牛。隨機(jī)分為2組，每組4頭牛。對(duì)照組牛飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組牛日糧額外添加300 mg/kg的大豆素。試驗(yàn)共70 d，其中預(yù)試期10 d，正試期為60 d。肉牛單圈飼養(yǎng)，日飼兩次(08:00和18:00)，總飼喂量約為肉牛體質(zhì)量的2.6%，自由飲水?；A(chǔ)飼糧精粗比為4∶6，組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表 1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

每千克預(yù)混料含VA 150 000 IU,VD 320 000 IU,VE 3 000 IU,Fe 3 200 mg,Mn 1 500 mg,Zn 2 000 mg,Cu 650 mg,I 35 mg,Se 10 mg,Co 10 mg,Ca 130 g,P 30 g;綜合凈能、鈣和磷為計(jì)算值，其余為實(shí)測(cè)值

One kg of Premix contained the following:NEmf,Ca and P were calculated values,while others were measured values

1.3 樣品收集與分析

在正試期第1天和第60天分別對(duì)試驗(yàn)犢?？崭狗Q質(zhì)量，記錄每頭牛初始質(zhì)量及末質(zhì)量。第60日晨飼前，用無(wú)抗凝血真空采血管對(duì)每頭牛頸靜脈采血15 mL，靜置30 min后3 500×g離心10 min，取上清液制備血清，于-20 ℃冷凍儲(chǔ)存。

采用試劑盒測(cè)定血清中低濃度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高濃度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，總膽固醇，甘油三酯等含量。葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖濃度[11]。血清尿素氮的測(cè)定用尿素/谷氨酸脫氫酶法。以上所有指標(biāo)測(cè)定均在南昌第一附屬醫(yī)院，使用全自動(dòng)生化分析儀完成。

總過(guò)氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量，采用南京建成生物研究所提供的試劑盒測(cè)定。

IgG,IgA,IgM，三碘甲狀腺氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)，生長(zhǎng)激素(GH)，胰島素樣生長(zhǎng)因子-I (IGF-I)，睪酮含量的測(cè)定，委托中英生物技術(shù)機(jī)構(gòu)完成。

數(shù)據(jù)處理與分析

所有數(shù)據(jù)在Excell表格中初步整理后，用SPSS 17.0中的單因素方差分析進(jìn)行差異顯著性分析，P≤0.01表示差異極顯著，P≤0.05則為有差異顯著性趨勢(shì)。

2 結(jié)果分析

2.1 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛生長(zhǎng)性能的影響

由于限飼，每組犢牛每日干物質(zhì)采食量(DM)相似。然而如表2所示，與對(duì)照組相比，添加大豆素組犢牛的平均日增重高了97.1 g/d，差異顯著(P<0.05)。

表2 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛生長(zhǎng)性能的影響

2.2 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，添加大豆素后，犢牛血清中血糖濃度、總膽固醇、DHL-C、LDL-C含量均低于對(duì)照組，其中DHL-C含量與對(duì)照組存在顯著差異(P≤0.05)，而血糖濃度更是達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。甘油三酯和血清尿素氮含量較對(duì)照組高，其中血清尿素氮含量增加幅度達(dá)到了23.6%(P=0.039)。

表3 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛血清生化指標(biāo)的影響

2.3 日糧中添加大豆素對(duì)犢公牛血清抗氧化指標(biāo)的影響

如表4所示，較對(duì)照組，日糧中添加大豆素使?fàn)倥Ｑ逯蠺-SOD和GSH-Px濃度分別提高了12.2%(P=0.029)和15.5%(P=0.046)，對(duì)MDA的影響不明顯。

表4 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 日糧中添加大豆素對(duì)犢公牛血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，犢牛日糧中添加大豆素，使血液中IgG和IgM含量顯著提高了27.5%(P=0.003)和11.4%(P=0.008)，對(duì)IgA的影響差異不顯著。

表5 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛血清免疫指標(biāo)的影響

2.5 日糧中添加大豆素對(duì)犢公牛血清內(nèi)源激素的影響

如表6所示，與對(duì)照組相比，添加大豆素組犢牛血清中內(nèi)源激素T4(P=0.017)和IGF-I(P<0.001)含量極顯著提高，其中IGF-I提高幅度達(dá)到了49.3%，但睪酮、T3和GH含量差異不顯著。

表6 日糧添加大豆素對(duì)犢公牛血清內(nèi)源激素的影響

3 討論與結(jié)論

大豆素具有廣泛的生物活性[12]，但其對(duì)肉牛的影響報(bào)道較少。本研究在肉用犢公牛上的結(jié)果顯示，日糧中添加大豆素顯著降低了試驗(yàn)動(dòng)物的血糖濃度，HDL-C和總膽固醇含量，此結(jié)果與zhao等[13]在成年閹牛上的研究結(jié)果一致。盡管大豆素在肉牛體內(nèi)降低血糖水平的代謝機(jī)理尚不清楚，但大豆素能加強(qiáng)小鼠體內(nèi)成肌細(xì)胞及脂肪細(xì)胞對(duì)血糖的攝取[14]，也許能解釋試驗(yàn)組降低血糖水平的原因。試驗(yàn)組血清尿素氮含量顯著高于對(duì)照組，與Roseler等[15]在奶牛上的研究結(jié)果一致。

自由基在免疫和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用，但過(guò)多自由基會(huì)引起細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)[16]，而機(jī)體抗氧化酶能消除自由基。T-SOD，GSH-Px和過(guò)氧化氫酶等均屬于抗氧化酶[17]。因此，抗氧化酶活性的測(cè)定對(duì)抗氧化作用有代表意義。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加大豆素能顯著提高血清樣品中T-SOD和GSH-Px活性，說(shuō)明大豆素能提高犢牛機(jī)體抗氧化水平，該結(jié)果與Liu等[18]在泌乳牛和Mishra等[19]在小鼠上的研究結(jié)果相似。

免疫反應(yīng)與動(dòng)物的健康狀況密切相關(guān)[20]。測(cè)定血清免疫球蛋白濃度是評(píng)估機(jī)體免疫水平最常規(guī)的方法。IgG和IgM可參與細(xì)胞吞噬等，在機(jī)體抗感染免疫過(guò)程中發(fā)揮重要作用，雖然IgA會(huì)抑制細(xì)胞吞噬，抗體依賴等[21]。但就本試驗(yàn)中結(jié)果可知，試驗(yàn)組IgG和IgM極顯著高于對(duì)照組，而IgA則差異不顯著，說(shuō)明日糧中添加大豆素可顯著提高犢牛機(jī)體免疫水平。

GH和IGF-1對(duì)于機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育非常重要[22-23]。研究表明，雌激素能影響GH/IGF-I功能發(fā)揮[24]，Breier等[25]和Coxam等[26]研究表明，外源性雌激素能提高牛的血清GH和IGF-I濃度。本研究中，試驗(yàn)組IGF-I顯著高于對(duì)照組，與Kwon和Nam[27]用大豆素誘導(dǎo)MC3T3-El細(xì)胞的結(jié)果一致。本研究結(jié)果顯示，日糧中添加大豆素顯著提高了機(jī)體內(nèi)源激素T4含量，T3有降低的趨勢(shì)，與zhu等[28]在奶牛上的研究結(jié)果一致，也有部分研究結(jié)果顯示，添加大豆素對(duì)T3和T4無(wú)影響[29]，甚至作用效果相反[30]。

本研究結(jié)果顯示，較對(duì)照組，添加大豆素可提高犢牛平均日增重，這可能源自大豆素對(duì)機(jī)體的綜合影響，畢竟更好的生理機(jī)能保證其有更好的生長(zhǎng)狀況。

日糧中添加大豆素增加了犢公牛的日增重，提高了血清T-SOD、GSH-Px、IgG、IgM、IGF-1的含量，表明大豆素能夠改善犢公牛的生產(chǎn)性能，增強(qiáng)犢公牛的抗氧化和免疫能力。