熊雪，桂維陽(yáng)，劉沫含，陳繼輝，張英俊,3,4*

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院，江蘇 南京 210095；2.河北民族師范學(xué)院，河北 承德 067000；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，北京 100193；4.農(nóng)業(yè)部草地管理與合理利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

土壤鹽分已經(jīng)成為限制全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力的主要環(huán)境因素之一[1-2]。在全球的干旱和半干旱地區(qū)，約有50%的灌溉土地受到鹽堿化的影響，區(qū)域內(nèi)的非灌溉土地同樣也會(huì)發(fā)生鹽堿化[3]。在自然界中，由于降雨、灌溉、土壤淋溶、蒸發(fā)等多種因素的相互作用，導(dǎo)致土壤中的鹽分分布存在空間和時(shí)間上的異質(zhì)性[4-6]，同一株植物的根系可能會(huì)處于不同的鹽分濃度下[7]。目前關(guān)于植物品種耐鹽性的研究都是在均勻的鹽脅迫條件下進(jìn)行的，而對(duì)于不均勻鹽脅迫下品種耐鹽性的比較研究未見報(bào)道。研究不均勻鹽脅迫下不同品種的耐鹽性是對(duì)植物耐鹽性研究的一個(gè)重要補(bǔ)充，也為耐鹽性品種的選育提供重要的參考依據(jù)。

紫花苜蓿(Medicagosativa)作為全球廣泛種植的栽培牧草，素有“牧草之王”的美稱[8]，具有相對(duì)較強(qiáng)的耐鹽性和改良土壤鹽堿性的作用[9-10]。但不同的紫花苜蓿品種耐鹽性相差較大，且不同鹽堿條件下的同一品種耐鹽性也存在差異[11-14]。在鹽脅迫下各種耐鹽機(jī)制在不同的品種中分別被激活，并產(chǎn)生相應(yīng)的抗性反應(yīng)。所以綜合考慮鹽脅迫下植物的光合作用效率、水分吸收、膜質(zhì)過氧化程度等生理指標(biāo)，可以作為品種耐鹽性評(píng)估的重要參考依據(jù)[2]。本試驗(yàn)選取6個(gè)紫花苜蓿品種作為研究對(duì)象，分別在均勻鹽脅迫和不均勻鹽脅迫下測(cè)定其植株生長(zhǎng)速率、地上生物量、地下生物量、水分吸收、電導(dǎo)率、丙二醛、葉綠素等指標(biāo)，并通過隸屬函數(shù)法對(duì)不同鹽分處理下紫花苜蓿品種的耐鹽性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，以期為紫花苜蓿耐鹽性評(píng)價(jià)及新品種選育提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用6個(gè)紫花苜蓿品種分別為：中苜一號(hào)、阿爾岡金、WL353LH、WL298HQ、WL343HQ和WL354HQ，中苜一號(hào)由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所提供，其余品種購(gòu)自北京正道生態(tài)科技有限公司。

1.2 材料培養(yǎng)與脅迫處理

選取均勻一致的紫花苜蓿種子用70%的乙醇清洗30 s，再用5%的次氯酸鈉消毒15 min，后用蒸餾水反復(fù)沖洗4～5次，將整齊的種子播種于滅菌的濕砂中。7 d后待紫花苜蓿全部出苗，主根長(zhǎng)度為3～5 cm時(shí)，選取整齊一致的幼苗，剪去根尖(5 mm)以促進(jìn)其側(cè)根生長(zhǎng)，便于后面的分根試驗(yàn)。然后將幼苗置于營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行水培(營(yíng)養(yǎng)液濃度逐漸增大，至第10天為全濃度營(yíng)養(yǎng)液)。每隔一天更換一次營(yíng)養(yǎng)液，進(jìn)一步培養(yǎng)4 d后取長(zhǎng)勢(shì)良好的幼苗移到分根裝置中。營(yíng)養(yǎng)液組成及濃度為：2.5 mmol·L-1Ca(NO3)2、2.5 mmol·L-1KNO3、1 mmol·L-1MgSO4、0.5 mmol·L-1NH4H2PO4、0.1 mmol·L-1EDTA-FeNa、0.2 μmol·L-1CuSO4、1 μmol·L-1ZnSO4、20 μmol·L-1H3BO3、0.005 μmol·L-1(NH4)6Mo27O4和1 μmol·L-1MnSO4。分根裝置由兩個(gè)0.35 L的塑料杯和一塊中間帶有圓孔的泡沫板組成，植物根系穿過圓孔固定于泡沫板上，將植物的根系分為均勻的兩部分分別置于兩個(gè)塑料杯中，以便使植物根系同時(shí)處于不同的鹽分濃度處理下。

分根裝置中培養(yǎng)5 d后，對(duì)各植物幼苗進(jìn)行不同的鹽濃度處理。試驗(yàn)共分為4個(gè)處理，包括對(duì)照0/0 mmol·L-1NaCl處理，不均勻鹽脅迫0/200 mmol·L-1NaCl處理以及均勻鹽脅迫100/100、200/200 mmol·L-1NaCl處理(“/”兩邊代表左右兩端根系)，每個(gè)處理8個(gè)重復(fù)。為避免鹽分振蕩，所有幼苗的鹽分濃度均每隔24 h逐漸增加，直到4 d后達(dá)到最終濃度。試驗(yàn)于2017年6-8月在人工氣候室中進(jìn)行，光/暗周期為14 h/10 h，溫度為白天25 ℃/夜晚20 ℃，空氣相對(duì)濕度為白天55%/夜晚90%。

1.3 測(cè)定指標(biāo)

1.3.1植物生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定 植物最終脅迫15 d后進(jìn)行取樣，分別取植物地上部分、左右兩側(cè)根系于105 ℃殺青30 min，在65 ℃烘箱中烘干48 h至恒重，分別測(cè)定其地上部分及兩側(cè)根系的干重。測(cè)量脅迫前及脅迫15 d后紫花苜蓿的主莖高度計(jì)算其生長(zhǎng)速率，每個(gè)處理6次重復(fù)。

1.3.2水分吸收的測(cè)定 所有分根裝置中的營(yíng)養(yǎng)液體積均為350 mL，每次更換營(yíng)養(yǎng)液及脅迫15 d后用量筒測(cè)量裝置中的剩余營(yíng)養(yǎng)液體積，并設(shè)置無(wú)植物培養(yǎng)的裝置計(jì)算營(yíng)養(yǎng)液蒸發(fā)量，最終計(jì)算得出植物水分吸收量，每個(gè)處理7次重復(fù)。

1.3.3生理指標(biāo)的測(cè)定 采用Arnond[15]的丙酮提取法測(cè)定葉綠素(chlorophyll, Chl)含量；采用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量[16]；采用酸性茚三酮比色法測(cè)定脯氨酸(proline, Pro)含量[17]。采用電導(dǎo)率法測(cè)定細(xì)胞膜透性[16]。每個(gè)處理3次重復(fù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0對(duì)各指標(biāo)的測(cè)定值進(jìn)行方差分析。試驗(yàn)中采用相對(duì)值進(jìn)行品種間的耐鹽性比較，即各指標(biāo)的測(cè)定值與對(duì)照的比值。利用隸屬函數(shù)法[18]對(duì)各指標(biāo)的相對(duì)值進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)并對(duì)其耐鹽性進(jìn)行排序。

隸屬函數(shù)分析方法如下：

Yij=(Xij-Xjmin)/(Xjmax-Xjmin)

(1)

Yij=1-(Xij-Xjmin)/(Xjmax-Xjmin)

(2)

式中：Yij為i品種j指標(biāo)的隸屬函數(shù)值；Xij為i品種j指標(biāo)的均值；Xjmax為各品種j指標(biāo)均值的最大值；Xjmin為各品種j指標(biāo)均值的最小值。若j指標(biāo)與抗鹽性呈正相關(guān)，用公式(1)；若j指標(biāo)與抗鹽性呈負(fù)相關(guān)，用公式(2)。

2 結(jié)果與分析

2.1 紫花苜蓿生長(zhǎng)速率的變化

鹽脅迫下，植株生長(zhǎng)受到抑制。紫花苜蓿的植株生長(zhǎng)速率不論在哪種鹽脅迫處理下均呈下降趨勢(shì)。不同品種同一濃度鹽脅迫下植株生長(zhǎng)速率表現(xiàn)不同，同一品種低鹽脅迫和不均勻鹽脅迫下與高鹽脅迫下的植株生長(zhǎng)速率表現(xiàn)也不同(表1)。用植株生長(zhǎng)速率的相對(duì)值反映植物耐鹽性的高低，植株的相對(duì)生長(zhǎng)速率值越大則該品種越耐鹽，相對(duì)生長(zhǎng)速率值越小則越不耐鹽。在3種濃度處理下中苜一號(hào)的相對(duì)生長(zhǎng)速率均最高，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性。在濃度為100/100和0/200 mmol·L-1NaCl處理下，WL353LH相對(duì)生長(zhǎng)速率值最低，200/200 mmol·L-1NaCl處理下WL298HQ相對(duì)生長(zhǎng)速率值最低，表現(xiàn)出較弱的耐鹽性(表1)。

2.2 紫花苜蓿生物量的變化

鹽脅迫下，植物地上生物量均呈下降趨勢(shì)，鹽脅迫對(duì)紫花苜蓿地上部分生物量的影響要大于對(duì)根系的影響。在濃度為100/100 mmol·L-1NaCl 處理下，品種WL353LH、WL298HQ和WL354HQ的地上生物量顯著低于對(duì)照(P<0.05)，而中苜一號(hào)、阿爾岡金和WL343HQ的地上生物量與對(duì)照無(wú)顯著差異。當(dāng)濃度達(dá)到200/200 mmol·L-1NaCl 時(shí)各品種的地上生物量均顯著降低(P<0.05)，其中對(duì)中苜一號(hào)的地上生物量影響最小，對(duì)WL298HQ的地上生物量影響最大。而在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)下，中苜一號(hào)和WL354HQ的地上生物量與對(duì)照相比差異不顯著，不均勻鹽脅迫對(duì)阿爾岡金的地上生物量影響最大，表現(xiàn)出較低的耐鹽性(表2)。

表1 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種生長(zhǎng)速率Table 1 The plant growth rates of six alfalfa varieties under different salt stress

注：同行不同小寫字母表示各處理間差異顯著(P<0.05)。下同。

Note: The different lowercase letters in the same line indicate significant differences between salt treatments(P<0.05). The same below.

相比地上部分，鹽脅迫對(duì)地下生物量的影響較小。當(dāng)鹽脅迫濃度為100/100 mmol·L-1NaCl處理時(shí)，只有阿爾岡金和WL298HQ的地下生物量顯著低于對(duì)照(P<0.05)。當(dāng)鹽濃度增加到200/200 mmol·L-1NaCl時(shí)，阿爾岡金、WL353LH、WL298HQ的地下生物量顯著低于對(duì)照(P<0.05)。當(dāng)紫花苜蓿各品種處于不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理時(shí)，只有阿爾岡金的地下生物量顯著降低(P<0.05)(表2)。

表2 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種地上生物量和地下生物量Table 2 The aboveground biomass and underground biomass of six alfalfa cultivars under different salt stress

2.3 紫花苜蓿水分吸收的變化

本研究中，6個(gè)紫花苜蓿品種的水分吸收在均勻和不均勻的鹽脅迫下均受到不同程度的抑制。在均勻的(100/100 mmol·L-1NaCl)處理下，除中苜一號(hào)外，其余5個(gè)品種的水分吸收量都顯著降低(P<0.05)(表3)。根據(jù)其水分吸收的相對(duì)值變化可以得出，WL298HQ的水分吸收相對(duì)值最低，耐鹽性較弱。而在200/200 mmol·L-1NaCl處理下，WL343HQ的水分吸收下降最大，表現(xiàn)出較弱的耐鹽性。在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理下，中苜一號(hào)和WL354HQ的水分吸收量與對(duì)照差異不顯著，耐鹽性較強(qiáng)，阿爾岡金的水分吸收相對(duì)值最小，耐鹽性較弱(表3)。此外，在不均勻鹽脅迫下紫花苜蓿各品種83%～91%的水分吸收來自無(wú)鹽脅迫處理一端，且顯著高于0/0處理一端的水分吸收量。

表3 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種水分吸收Table 3 The water uptake of six alfalfa cultivars under different salt stress

2.4 紫花苜蓿細(xì)胞膜透性的變化

紫花苜蓿在均勻和不均勻的鹽脅迫下，細(xì)胞膜均受到一定程度的傷害。與對(duì)照相比，各品種在幾種鹽分濃度下電導(dǎo)率均顯著增加(P<0.05)，細(xì)胞膜透性增大(表4)。在鹽脅迫下，電導(dǎo)率的相對(duì)值增加越大，證明細(xì)胞膜受到的傷害越嚴(yán)重，植物的耐鹽性越差。相比之下，在100/100 mmol·L-1NaCl處理下，中苜一號(hào)和WL354HQ的耐鹽性稍強(qiáng)，WL298HQ和WL353LH的耐鹽性較弱。當(dāng)鹽分濃度達(dá)到200/200 mmol·L-1NaCl時(shí)，WL354HQ和WL343HQ的耐鹽性稍強(qiáng)，阿爾岡金的耐鹽性較弱。而在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理下，中苜一號(hào)和WL354HQ的耐鹽性稍強(qiáng)，阿爾岡金和WL353LH的耐鹽性較弱(表4)。

表4 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種細(xì)胞膜透性Table 4 The cell membrane permeability of six alfalfa cultivars under different salt stress

2.5 紫花苜蓿膜質(zhì)過氧化的變化

MDA是細(xì)胞膜質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，可以反映植物受到逆境脅迫傷害的程度。在均勻和不均勻鹽脅迫下，6個(gè)紫花苜蓿品種的MDA含量均顯著增加(P<0.05)。其中中苜一號(hào)在3種鹽濃度處理下MDA含量的變化相對(duì)較小，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性。在均勻鹽脅迫(100/100和200/200 mmol·L-1NaCl)處理下，WL298HQ的MDA含量增加相對(duì)較大，耐鹽性較差。而在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理下，阿爾岡金的細(xì)胞膜質(zhì)過氧化程度最大，表現(xiàn)出較低的耐鹽性(表5)。

2.6 紫花苜蓿葉綠素含量的變化

鹽脅迫下植物的光合作用受到抑制，葉綠素含量隨著鹽脅迫濃度的增加而降低。在均勻鹽脅迫(100/100 mmol·L-1NaCl)處理下，與對(duì)照相比，中苜一號(hào)和WL353LH的葉綠素含量變化不顯著，其余品種葉綠素含量均顯著降低(P<0.05)。中苜一號(hào)和WL353LH的葉綠素含量相對(duì)值較高，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性，WL343HQ的耐鹽性相對(duì)較弱。當(dāng)鹽脅迫濃度增加為200/200 mmol·L-1NaCl時(shí)，6個(gè)紫花苜蓿品種的葉綠素含量均顯著降低(P<0.05)。其中阿爾岡金的葉綠素含量下降最大，說明其在該濃度下光合作用受到嚴(yán)重抑制，耐鹽性較弱。在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理下，WL298HQ的耐鹽性相對(duì)較強(qiáng)，阿爾岡金的耐鹽性較弱(表6)。

表5 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種丙二醛含量Table 5 The MDA contents of six alfalfa cultivars under different salt stress

表6 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種葉綠素含量Table 6 The chlorophyll contents of six alfalfa cultivars under different salt stress

2.7 紫花苜蓿脯氨酸含量的變化

Pro作為滲透調(diào)節(jié)劑參與鹽脅迫下植物的滲透調(diào)節(jié)。但是目前關(guān)于Pro含量與植物耐鹽性的關(guān)系一直存在爭(zhēng)議[18-20]。本研究中鹽脅迫對(duì)6個(gè)紫花苜蓿品種的Pro含量影響均較大，在受到鹽脅迫后各品種均顯著增加(P<0.05)。但各品種的Pro含量與耐鹽性表現(xiàn)存在一定的不一致性，并不是Pro的含量越高，品種在鹽脅迫下的生長(zhǎng)越好(表7)。所以不能明確Pro含量與植物抗鹽性的關(guān)系。

2.8 紫花苜蓿各品種耐鹽性綜合評(píng)價(jià)

因?yàn)镻ro含量與植物耐鹽性的關(guān)系存在不一致性， 不計(jì)算其隸屬函數(shù)值。 本研究選取各鹽分濃度下植株生長(zhǎng)速率、地上和地下生物量、水分吸收、電導(dǎo)率、MDA和葉綠素含量變化的相對(duì)值作為耐鹽性綜合評(píng)價(jià)的指標(biāo)。經(jīng)相關(guān)性分析得出各指標(biāo)與植物耐鹽性的正負(fù)相關(guān)關(guān)系，各性狀的相關(guān)性均達(dá)到了顯著或極顯著水平(表8)。通過隸屬函數(shù)法分別計(jì)算均勻鹽脅迫(100/100、200/200 mmol·L-1NaCl)和不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)下的隸屬度平均值，并進(jìn)行排序。結(jié)果得出在100/100 mmol·L-1NaCl處理下，6個(gè)紫花苜蓿品種的耐鹽性為中苜一號(hào)>WL354HQ>WL343HQ >WL353LH>阿爾岡金>WL298HQ(表9)。0/200 mmol·L-1NaCl處理下耐鹽性為中苜一號(hào)>WL354HQ>WL298HQ>WL343HQ>WL353LH>阿爾岡金(表10)。200/200 mmol·L-1NaCl處理下耐鹽性為中苜一號(hào)>WL354HQ>WL343HQ>WL353LH>阿爾岡金>WL298HQ(表11)。

表7 不同鹽脅迫下6個(gè)紫花苜蓿品種脯氨酸含量Table 7 The proline contents of six alfalfa cultivars under different salt stress

表8 相對(duì)值相關(guān)性分析Table 8 Correlation analysis of relative values

注：*表示各相對(duì)值的顯著性關(guān)系：*P<0.05，**P<0.01，***P≤0.001。Chl: 相對(duì)葉綠素含量。

Note：Correlations are significant at *P<0.05, **P<0.01, ***P≤0.001. Chl: Relative chlorophyll contents.

表9 不同紫花苜蓿品種在100/100 mmol·L-1鹽脅迫下耐鹽性綜合評(píng)價(jià)Table 9 Comprehensive evaluation of salt tolerance of alfalfa varieties under 100/100 mmol·L-1 salt stress

表10 不同紫花苜蓿品種在0/200 mmol·L-1 鹽脅迫下耐鹽性綜合評(píng)價(jià)Table 10 Comprehensive evaluation of salt tolerance of alfalfa varieties under 0/200 mmol·L-1 salt stress

表11 不同紫花苜蓿品種在200/200 mmol·L-1 鹽脅迫下耐鹽性綜合評(píng)價(jià)Table 11 Comprehensive evaluation of salt tolerance of alfalfa varieties under 200/200 mmol·L-1 salt stress

3 討論

評(píng)價(jià)植物的耐鹽性通常包括直接測(cè)定和間接測(cè)定兩種方法。直接指標(biāo)的測(cè)定包括植株生長(zhǎng)速率、生物量、存活率等，本研究中紫花苜蓿在鹽脅迫(均勻、不均勻)處理下植株生長(zhǎng)速率、生物量等均呈降低趨勢(shì)，這些指標(biāo)的相對(duì)變化情況可以直接反映出植物對(duì)鹽脅迫的抗性強(qiáng)弱[21]。這也是其他品種比較試驗(yàn)中常用的耐鹽性評(píng)價(jià)指標(biāo)[11-13]。

間接測(cè)定一般利用一些生理生化指標(biāo)作為耐鹽性的鑒定指標(biāo)，如水分吸收、電導(dǎo)率、MDA、葉綠素、抗氧化物質(zhì)等[22-23]。當(dāng)鹽分存在于植物根際時(shí)會(huì)降低土壤滲透勢(shì)，導(dǎo)致植物吸水困難，形成生理干旱，進(jìn)而抑制生長(zhǎng)[24]。已有的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)植物處于不均勻的鹽脅迫下，低鹽或無(wú)鹽一端的補(bǔ)償吸水作用對(duì)于促進(jìn)植物不均勻鹽脅迫下的生長(zhǎng)具有重要作用[7,25]。因此將水分吸收情況作為評(píng)價(jià)植物耐鹽性，特別是在不均勻鹽脅迫下耐鹽性的重要指標(biāo)。植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常代謝起著重要作用。相對(duì)電導(dǎo)率可以反映植物細(xì)胞膜受到傷害的程度，相對(duì)電導(dǎo)率越大，細(xì)胞膜透性增強(qiáng)，說明植物細(xì)胞受到的傷害越大。而膜透性增大的程度也取決于植物抗逆性的強(qiáng)弱[26]。王運(yùn)琦等[27]研究表明細(xì)胞質(zhì)膜透性可以作為紫花苜蓿耐鹽性評(píng)價(jià)的指標(biāo)之一。另外，MDA作為細(xì)胞膜質(zhì)過氧化產(chǎn)物同樣可以反映植物細(xì)胞膜受傷害程度，作為植物耐鹽性強(qiáng)弱的指標(biāo)之一[21,28]。葉綠素作為植物體內(nèi)重要的光合物質(zhì)反映植物光合作用的強(qiáng)弱，鹽脅迫會(huì)降低植物葉片中的葉綠素含量進(jìn)而影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育[29-30]。在鹽脅迫下維持植物葉片較高的葉綠素含量可以增強(qiáng)耐鹽能力[31]。劉晶等[18]對(duì)兩個(gè)紫花苜蓿品種耐鹽性的比較研究也得出植物的MDA和葉綠素含量與鹽害的結(jié)果相對(duì)應(yīng)。本研究中，紫花苜蓿各品種的水分吸收、電導(dǎo)率、MDA和葉綠素含量與耐鹽性存在顯著的相關(guān)性，可以作為耐鹽性的評(píng)價(jià)指標(biāo)。Pro作為逆境脅迫下的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)在鹽脅迫下研究得較多，但是關(guān)于Pro是否可以作為耐鹽性判定的指標(biāo)存在不同的意見。王玉祥等[32]對(duì)苜蓿的研究發(fā)現(xiàn)，在鹽脅迫下Pro積累的含量越多，說明植物體耐鹽性越強(qiáng)，可以將Pro作為植物抗鹽性的評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。而本研究發(fā)現(xiàn)，隨著鹽脅迫濃度的增加，Pro含量顯著上升，但是各品種的Pro含量與耐鹽性表現(xiàn)存在不一致性，劉晶等[18]的研究也得出了相同的結(jié)論。還有學(xué)者認(rèn)為Pro積累的快慢可以體現(xiàn)植物對(duì)鹽脅迫反應(yīng)的敏感程度，但其含量的高低不能反映植物的耐鹽程度[33]。因此Pro含量與植物耐鹽性的關(guān)系還需要進(jìn)一步的驗(yàn)證。

植物在受到鹽脅迫后會(huì)產(chǎn)生一系列的復(fù)雜機(jī)制來抵抗鹽害，不同測(cè)定指標(biāo)下6個(gè)紫花苜蓿品種的耐鹽性存在一定的差異，因此利用多種指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，能更好地反映植物耐鹽性的強(qiáng)弱。研究發(fā)現(xiàn)，中苜一號(hào)無(wú)論在哪種鹽脅迫處理下均表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性，而阿爾岡金的耐鹽性較弱，特別是在不均勻鹽脅迫下，其水分吸收、光合作用受到抑制，細(xì)胞膜透性增加，進(jìn)而引起生物量降低，屬于鹽分敏感品種。此外，品種WL298HQ在均勻和不均勻鹽脅迫下的耐鹽性差異較大，在均勻鹽脅迫下細(xì)胞膜受到氧化損傷，植株生長(zhǎng)速率和生物量降低，表現(xiàn)出較低的耐鹽性。而在不均勻鹽脅迫下，WL298HQ耐鹽性中等，可能由于不均勻鹽脅迫下該品種的某一耐性機(jī)制保護(hù)了植物細(xì)胞膜免受損傷，提高了生長(zhǎng)速率和生物量。值得注意的是，在0/200 mmol·L-1NaCl處理下，WL298HQ具有相對(duì)較高的水分吸收含量和地下生物量，根據(jù)前人關(guān)于不均勻鹽脅迫對(duì)植物影響的研究[7]，認(rèn)為無(wú)鹽一端根的補(bǔ)償性生長(zhǎng)和補(bǔ)償吸水作用可能在其不均勻鹽脅迫下提高耐鹽性中發(fā)揮重要作用?？梢酝茢郬L298HQ在均勻和不均勻鹽脅迫下的耐鹽機(jī)制不同，在今后的研究中值得深入探討。

4 結(jié)論

不論在哪種鹽脅迫(均勻、不均勻)處理下，各紫花苜蓿品種均表現(xiàn)為生長(zhǎng)速率下降，地上、地下生物量降低，水分吸收和葉綠素含量減少，膜透性、MDA和Pro含量增加，鹽脅迫抑制了植物生長(zhǎng)，且各指標(biāo)存在品種差異。通過對(duì)各個(gè)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)得出，均勻和不均勻鹽脅迫下各品種的耐鹽性不同，在均勻鹽脅迫(100 mmol·L-1和200 mmol·L-1NaCl)處理下各品種的耐鹽性為中苜一號(hào)>WL354HQ>WL343HQ>WL353LH>阿爾岡金>WL298HQ，而在不均勻鹽脅迫(0/200 mmol·L-1NaCl)處理下則為中苜一號(hào)>WL354HQ>WL298HQ>WL343HQ>WL353LH>阿爾岡金。中苜一號(hào)在不同鹽脅迫處理下均表現(xiàn)出較高的耐鹽性，而阿爾岡金耐鹽性較差，WL298HQ在均勻與不均勻鹽脅迫下的耐鹽性差異較大，其他品種的耐鹽性居中。