楊陽(yáng)，蔣錫龍，任鳳山*，王詠梅，蘇玲，王鵬飛，高歡歡

（山東省葡萄研究院/山東省葡萄栽培與精深加工工程技術(shù)研究中心，山東濟(jì)南 250100）

蕓苔素內(nèi)酯（Brassinolide，BR），又稱(chēng)為油菜素內(nèi)酯，是一種甾醇內(nèi)酯化合物，廣泛存在于植物花粉、種子、葉片等器官中[1]，可促進(jìn)植物細(xì)胞伸長(zhǎng)和分裂[2]，提高葉片光合能力[3]，促進(jìn)花芽分化[4]，提高坐果率[5]和植物抗性[6]，低濃度就可表現(xiàn)出較高的生理效應(yīng)[7]，具有無(wú)毒、廣譜、高效、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，被公認(rèn)為第六類(lèi)植物激素，已成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。在果樹(shù)[8-9]、蔬菜[10]、苜蓿[11]、油茶[12]等作物上表現(xiàn)出較好的增產(chǎn)及提高品質(zhì)的作用，已廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。

釀酒葡萄具有坐果率高、果穗緊密的特點(diǎn)，果穗過(guò)緊會(huì)導(dǎo)致果粒顏色淺、不均一、花色苷含量減少、果實(shí)風(fēng)味物質(zhì)降低、易發(fā)生爛果等一系列果實(shí)品質(zhì)問(wèn)題[13]，也直接影響葡萄酒的品質(zhì)。在葡萄生產(chǎn)中，通常施用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑赤霉素（GA3）對(duì)過(guò)密過(guò)緊的果穗進(jìn)行疏花疏果、拉長(zhǎng)果穗等處理[14-15]，但有研究表明，使用GA3拉長(zhǎng)和膨大處理后，降低了可溶性糖和VC含量，提高了可滴定酸含量，對(duì)果實(shí)品質(zhì)具有一定影響[16-17]。幼果期施用BR可增加葡萄單果重，提高果實(shí)總糖和花色苷含量，可有效改善葡萄品質(zhì)[18-19]，但在葡萄開(kāi)花前應(yīng)用BR進(jìn)行果穗拉長(zhǎng)處理的效果還鮮見(jiàn)報(bào)道，針對(duì)不同釀酒葡萄品種適宜的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、施用時(shí)期、施用濃度、施用方式等，還沒(méi)有明確的指導(dǎo)建議。

本研究以山東煙臺(tái)地區(qū)的紅色釀酒葡萄‘蛇龍珠’（Cabernet Gernischt）和白色釀酒葡萄‘白玉霓’（ugni Blanc）為試材，在葡萄開(kāi)花前應(yīng)用BR，以拉長(zhǎng)果穗為栽培目的，分析不同施用濃度和施用方式對(duì)兩個(gè)釀酒葡萄果穗拉長(zhǎng)效果和果實(shí)品質(zhì)的影響，旨在為釀酒葡萄的優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)地點(diǎn)為山東省煙臺(tái)市開(kāi)發(fā)區(qū)，選擇植株長(zhǎng)勢(shì)較為一致、土壤類(lèi)型及地勢(shì)較平緩的釀酒葡萄種植園區(qū)。試材為‘白玉霓’和‘蛇龍珠’，均為5年生。單干雙臂栽培，株行距為1 m×2.2 m，產(chǎn)量約400 kg/667m2，常規(guī)管理。

試驗(yàn)地塊土層厚度約30 cm，土壤質(zhì)地為砂質(zhì)壤土，肥力水平中等，ph0.79，有機(jī)質(zhì)6.11 g/kg，堿解氮47.52 mg/kg，有效磷24.00 mg/kg，速效鉀92.17 mg/kg，交換性鈣2135.39 mg/kg，交換性鎂352.56 mg/kg。

試驗(yàn)用試劑為0.02%蕓苔素內(nèi)酯可溶性原粉（德國(guó)克姆萊作物保護(hù)公司）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)置3個(gè)BR濃度，分別為0.02、0.04、0.06 mg/L（處理濃度為換算后的有效成分蕓苔素內(nèi)酯的實(shí)際含量，即將0.02%蕓苔素可溶性原粉分別稀釋10 000倍、5000倍、3333倍液）；2種處理方式，分別為噴花穗、蘸花穗；共6個(gè)處理及1個(gè)未處理對(duì)照CK。每個(gè)處理3個(gè)樹(shù)空（1個(gè)樹(shù)空8 m長(zhǎng)，約8株葡萄），每樹(shù)空為一個(gè)重復(fù)，共計(jì)3個(gè)重復(fù)。

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2017年5月11日（開(kāi)花前10 d左右）進(jìn)行，噴果穗的采用500 mL小噴壺，距離果穗10 cm左右噴施，盡量均勻一致；蘸果穗的采用一次性紙杯，將果穗按入杯中，幾秒鐘后拿出，用手指輕輕彈掉果穗上多余水分。

于果實(shí)成熟采收期（‘白玉霓’于9月16日采收，‘蛇龍珠’于10月1日采收）觀察果穗上果粒的松散程度；采集50穗較一致的果穗稱(chēng)量穗質(zhì)量，采用卷尺測(cè)量果穗長(zhǎng)度；并于果穗上、中、下部位采集100粒用游標(biāo)卡尺法測(cè)量橫、縱徑，并稱(chēng)量百粒質(zhì)量，重復(fù)3次；稱(chēng)量后的果粒用于果實(shí)品質(zhì)的測(cè)定?？偺遣捎梅屏衷噭┓ǎ豢傻味ㄋ岵捎肗aOh滴定法；ph值采用ph計(jì)法；可溶性固形物采用手持糖度計(jì)測(cè)定；花色苷采用比色法。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2007軟件進(jìn)行處理。采用SPSS 13.0進(jìn)行方差分析，鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行結(jié)果的顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果分析

2.1 BR對(duì)釀酒葡萄果穗長(zhǎng)度的影響

表1數(shù)據(jù)顯示，BR處理的果穗長(zhǎng)度均顯著大于未處理CK，在施用方式上以噴花穗效果優(yōu)于蘸花穗處理，但略有不同的是，在‘白玉霓’上，0.02 mg/L時(shí)噴花穗和蘸花穗處理效果無(wú)顯著差異；而在0.04 mg/L和0.06 mg/L時(shí)，噴花穗處理的果穗長(zhǎng)度顯著大于蘸花穗處理；而在‘蛇龍珠’上，3個(gè)濃度處理均以噴花穗效果顯著大于蘸花穗。

在施用濃度上，0.04 mg/L噴花穗處理的‘蛇龍珠’果穗較長(zhǎng)，與CK相比，增加了13.3%，但噴花穗處理間的果穗長(zhǎng)度無(wú)顯著性差異；‘白玉霓’葡萄以0.06 mg/L噴花穗的果穗長(zhǎng)度顯著高于其他處理，與CK相比，增加了15.3%，其次是0.04 mg/L噴花穗處理，增加了12.8%。

2.2 BR對(duì)釀酒葡萄果實(shí)外觀品質(zhì)指標(biāo)的影響

BR拉穗處理后，‘蛇龍珠’和‘白玉霓’果實(shí)的穗質(zhì)量、粒質(zhì)量、橫縱徑以及果穗松散程度均有變化（表1）。且BR各處理均有拉長(zhǎng)果穗的效果，也相應(yīng)增加了果穗的松散程度。

在‘蛇龍珠’上，施用方式對(duì)果實(shí)生長(zhǎng)的影響顯著，0.04 mg/L噴花穗處理有較大的穗質(zhì)量、百粒質(zhì)量以及橫縱徑，分別提高了14.1%、10.1%、10.2%和16.7%，其它處理依次是0.02 mg/L噴花穗、0.02 mg/L蘸花穗以及0.06 mg/L噴花穗處理。蘸花穗處理中，除0.02 mg/L處理具有提高‘蛇龍珠’葡萄外在果實(shí)品質(zhì)指標(biāo)的正效應(yīng)外，0.04 mg/L和0.06 mg/L處理則具有降低各指標(biāo)的負(fù)效應(yīng)，與CK相比，其果實(shí)穗質(zhì)量分別降低了40.3%和24.5%，橫、縱徑也有不同程度的降低，說(shuō)明‘蛇龍珠’對(duì)開(kāi)花前施用的BR較敏感，0.04 mg/L和0.06 mg/L處理抑制了‘蛇龍珠’果實(shí)的生長(zhǎng)。

與‘蛇龍珠’不同，BR處理對(duì)‘白玉霓’影響較大，在0.04 mg/L和0.06 mg/L 蘸花穗條件下，‘白玉霓’仍有較好的外在品質(zhì)指標(biāo)。其中以0.04 mg/L蘸花穗和噴花穗處理的穗質(zhì)量較高，分別提高了42.8%和35%，其次是0.06 mg/L蘸花穗和噴花穗處理，而0.02 mg/L噴花穗和蘸花穗處理則降低了‘白玉霓’的穗質(zhì)量，分別降低了6.2%和4.3%，其它指標(biāo)也有相同的趨勢(shì)。

2.3 BR對(duì)釀酒葡萄內(nèi)在品質(zhì)指標(biāo)的影響

釀酒葡萄的果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)與葡萄酒質(zhì)量息息相關(guān)，表2數(shù)據(jù)顯示，BR處理對(duì)‘蛇龍珠’和‘白玉霓’果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)均有不同程度的影響。其中，BR的施用方式對(duì)‘蛇龍珠’內(nèi)在品質(zhì)指標(biāo)影響較大，與CK相比，3個(gè)噴花穗的處理均提高了‘蛇龍珠’葡萄的總糖、可滴定酸和花色苷含量，降低了果實(shí)的糖酸比，其中以0.04 mg/L噴花穗處理的總糖和可滴定酸含量較高，分別提高了8.6%和11.7%，其次分別是0.06 mg/L和0.02 mg/L處理；而蘸花穗處理的總糖含量與CK無(wú)顯著性差異，但降低了可滴定酸、花色苷含量，提高了果實(shí)糖酸比，以0.04 mg/L處理的總糖、可滴定酸和花色苷含量較低，與CK相比，分別降低了2.9%、18.56%和17.6%。且BR各處理的‘蛇龍珠’葡萄ph值均小于CK。

表1 BR處理的釀酒葡萄果實(shí)外觀品質(zhì)指標(biāo)Table 1 The appearance quality index of wine grape treated with BR

在‘白玉霓’上，BR的施用方式對(duì)總糖含量影響較大，對(duì)可滴定酸含量和ph值影響較小。噴花穗處理的總糖含量顯著高于CK，且顯著高于相應(yīng)濃度的蘸花穗處理，其中以0.04 mg/L噴花穗處理的總糖含量最高，是CK的1.12倍，其次是0.06 mg/L噴花穗處理，為CK的1.09倍；BR處理均顯著提高了‘白玉霓’的可滴定酸含量和ph值，且除0.02 mg/L處理的噴花穗和蘸花穗間有差異外，其它濃度的施用方式處理間無(wú)顯著性差異；各處理中，0.02 mg/L和0.04 mg/L蘸花穗處理的糖酸比低于CK，0.02 mg/L噴花穗處理的糖酸比與CK相差不大，而0.04 mg/L噴花穗處理、0.06 mg/L噴花穗和蘸花穗處理均高于CK，其中以0.04 mg/L蘸花穗的糖酸比最高，是CK的1.10倍，其次是0.06 mg/L噴花穗處理，為CK的1.06倍。

表2 BR處理的釀酒葡萄果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)指標(biāo)Table 2 The internal quality indexes of wine grapes treated with BR

3 討論與結(jié)論

葡萄花穗的拉長(zhǎng)效果與施用時(shí)期和施用濃度有關(guān)，施用時(shí)期早的施用濃度要小，施用時(shí)期晚的施用濃度要大一些[20]。鮮食葡萄生產(chǎn)中，一般在開(kāi)花前15～20 d采用4～5 mg/L GA3對(duì)花穗進(jìn)行處理的拉長(zhǎng)效果較好，但在一定程度上影響果實(shí)品質(zhì)，例如降低可溶性固形物含量，增加總酸[21]。研究表明，BR最突出的作用是促進(jìn)植物細(xì)胞的伸長(zhǎng)和分裂[22]，生產(chǎn)中BR更多的被應(yīng)用在提高葡萄果實(shí)品質(zhì)和樹(shù)體抗性上，尤其在幼果期葉面噴施BR可改善葡萄果實(shí)品質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)葉面噴施0.2 mg/L的BR可有效改善‘紅地球’葡萄的粒質(zhì)量、穗質(zhì)量和可溶性固形物含量[23]；葉噴0.8 mg/L的BR可提高‘蛇龍珠’的花色苷含量[19]。但在開(kāi)花前施用BR來(lái)拉長(zhǎng)葡萄果穗的文章還未見(jiàn)報(bào)道，其施用濃度還不明確。

釀酒葡萄栽培與鮮食葡萄不同，釀酒葡萄果粒本身較小，不需較大的果?？臻g和過(guò)長(zhǎng)的果穗，只要果穗有適當(dāng)?shù)乃缮⒍燃纯?。與產(chǎn)量相比，釀酒葡萄對(duì)品質(zhì)有更高的要求，在拉長(zhǎng)果穗的同時(shí)更要考慮品質(zhì)的形成。本試驗(yàn)是首次采用BR在釀酒葡萄開(kāi)花前進(jìn)行花穗處理，所以選擇的BR處理濃度較低，一方面考慮到BR在較低濃度下有較好的生理效應(yīng)[7]，而開(kāi)花前葡萄花穗對(duì)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑更為敏感[20]；另一方面考慮到釀酒葡萄的激素殘留問(wèn)題。而本試驗(yàn)結(jié)果表明，在BR低濃度（0.02、0.04、0.06 mg/L）條件下對(duì)釀酒葡萄的果穗具有一定的拉長(zhǎng)效果，而更高濃度時(shí)的適應(yīng)性還需要進(jìn)行更多的試驗(yàn)及應(yīng)用研究。值得注意的是，在選擇BR處理花穗時(shí)，要明確藥劑的BR有效濃度，本文中的施用濃度為試劑配制后溶液中BR的有效濃度，而不是含BR的藥劑濃度。

針對(duì)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的施用方式，有研究認(rèn)為，GA3蘸花穗處理的效果好于噴花穗，所以生產(chǎn)中通常使用蘸花穗進(jìn)行果穗拉長(zhǎng)處理[24]，而本試驗(yàn)中‘蛇龍珠’和‘白玉霓’均以噴花穗效果明顯，這一結(jié)果一方面可能與不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的作用方式及機(jī)理存在差異[25]有關(guān)。不同釀酒葡萄對(duì)BR的敏感程度有差異，‘蛇龍珠’在BR噴花穗時(shí)果穗均較長(zhǎng)，且無(wú)顯著差異，說(shuō)明‘蛇龍珠’，對(duì)BR較敏感，而‘白玉霓’果穗長(zhǎng)度是隨BR濃度增加而增加，在0.06 mg/L噴花穗時(shí)有較長(zhǎng)果穗。

從果實(shí)外觀品質(zhì)指標(biāo)上也可說(shuō)明‘蛇龍珠’對(duì)BR較敏感。本試驗(yàn)中，在0.04 mg/L和0.06 mg/L蘸花穗處理時(shí)降低了‘蛇龍珠’的粒質(zhì)量、穗質(zhì)量等外觀指標(biāo)，出現(xiàn)負(fù)效應(yīng)，而‘白玉霓’在0.06 mg/L蘸花穗處理下仍有較高的粒質(zhì)量、穗質(zhì)量等指標(biāo)，說(shuō)明BR在開(kāi)花前處理不同敏感性的品種時(shí)要注意濃度和施用方式的選擇。

有研究認(rèn)為，BR可改變葡萄果實(shí)糖代謝相關(guān)酶活性，調(diào)控果實(shí)中糖的積累和代謝。幼果期噴施1 mg/L的BR可提高‘紫香無(wú)核’的葡萄糖含量[18]，噴施0.8 mg/L的BR可提高‘蛇龍珠’的總糖、還原糖和蔗糖含量[19]。本試驗(yàn)中，雖然噴施的BR濃度較低，但顯著提高了‘蛇龍珠’和‘白玉霓’的總糖含量，這一結(jié)果可能與不同時(shí)期葡萄花穗（果穗）對(duì)BR的適應(yīng)性有關(guān)。施用方式對(duì)‘蛇龍珠’可滴定酸含量影響顯著，噴花穗的可滴定酸增加幅度大于糖的積累，進(jìn)而降低了‘蛇龍珠’果實(shí)糖酸比；但BR施用方式對(duì)‘白玉霓’的可滴定酸含量影響不大，在生產(chǎn)中可通過(guò)在開(kāi)花前選擇不同施用方式對(duì)不同釀酒葡萄品種的糖酸比進(jìn)行調(diào)控，具體調(diào)控時(shí)期和應(yīng)用濃度還需要進(jìn)一步進(jìn)行試驗(yàn)研究。