伏 兵， 李 敏， 董萬(wàn)利

腦白質(zhì)病變(white matter lesions，WML)常常在老年人頭部MRI檢測(cè)到，與卒中和癡呆密切有關(guān)[1，2]。WML的危險(xiǎn)因素、機(jī)制尚未明確，研究表明止血因子在WML的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，高水平的纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)IB)會(huì)降低纖溶活性，降低血液流動(dòng)，導(dǎo)致血栓形成[3]，F(xiàn)IB水平升高增加卒中的風(fēng)險(xiǎn)[4]，F(xiàn)IB與缺血性腦卒中復(fù)發(fā)密切相關(guān)[5]。β-纖維蛋白原基因(β-fibrinogen gene，F(xiàn)GB)是FIB分子合成的關(guān)鍵限速步驟，是影響血漿FIB水平的重要因素。研究顯示[6～8]，F(xiàn)GB-455G/A多態(tài)性與腦血管病的關(guān)系密切，可能是缺血性腦血管病的危險(xiǎn)因素，與中國(guó)人群腦梗死發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。目前FIB和WML之間的關(guān)系尚未闡明，F(xiàn)GB-455G/A基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群的WML關(guān)系未見(jiàn)相關(guān)研究。本研究探討FGB-455G/A不同基因型的血漿FIB水平，并闡明FIB和FGB-455G/A基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群WML的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2014年10月～2016年3月于連云港市第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院患者269例，其中男149例，女120例，平均年齡為(63.89±9.58)歲，均為漢族人群且無(wú)血緣關(guān)系，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)，均行頭部MRI檢查。入組標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡45～80歲；(2)符合缺血性腦白質(zhì)病變的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；(3)同意行頭部MRI檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)急性卒中者；(2)既往腦卒中者；(3)其他病因如免疫、缺氧、中毒、遺傳等所致者；(4)服用葉酸及B族維生素者；(5)認(rèn)知功能障礙者；(6)心肺肝腎等功能障礙者；(7)不能完成頭部MRI檢查者。根據(jù)頭部MRI結(jié)果分組：(1)WML組：共收集177例，其中男98例，女79例，平均年齡(66.16±9.12)歲。改良Scheltens評(píng)分≥1分。(2)對(duì)照組：頭部MRI證實(shí)無(wú)腦白質(zhì)病變(改良Scheltens評(píng)分0分)為對(duì)照組。為同期在我科住院患者，共收集92例，其中男51例，女41例，平均年齡(59.54±8.95)歲。

1.2 一般資料 記錄研究對(duì)象 年齡、性別、吸煙史(每天吸煙≥1支，持續(xù)1 y以上)、高血壓(有明確高血壓病史或至少兩次測(cè)量血壓>140/90 mmHg)、糖尿病(有糖尿病病史或出院時(shí)診斷糖尿病)、冠心病史(包括心絞痛和心肌梗死)等臨床資料。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢查 所有患者均常規(guī)禁食8～12 h后，清晨抽取空腹血標(biāo)本，送至我院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測(cè)，包括血常規(guī)、FIB、肝功能、腎功能、空腹血糖、TC、TG、HDL-C、LDL-C等指標(biāo)。

1.4 頭部MRI評(píng)分 采用改良Scheltens量表[10]對(duì)WML組患者行頭部MRI評(píng)分，德國(guó)SIEMNS ESSENZA 1.5T MRI，常規(guī)行T1、T2及FLAIR序列。由兩名不清楚患者臨床信息且經(jīng)驗(yàn)豐富的影像科醫(yī)師獨(dú)立判讀患者的MRI影像。

1.5 基因組DNA提取 抽取所有入組研究對(duì)象肘靜脈血4 ml(用于提取基因組DNA)，置于EDTA 抗凝管中，編號(hào)后放置于-80 ℃冰箱。使用Axygen公司的試劑盒提取基因組DNA，按照說(shuō)明書(shū)操作。

2 結(jié) 果

2.1 腦白質(zhì)病變組血漿FIB水平與改良Scheltens量表評(píng)分的關(guān)系 根據(jù)血漿FIB水平，分析WML組患者不同F(xiàn)IB水平的改良Scheltens量表評(píng)分，結(jié)果顯示，WML改良Scheltens量表評(píng)分與FIB水平呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.006)(見(jiàn)表1)。

2.2 FGB-455G/A各基因型間血漿FIB水平比較 FGB-455G/A位點(diǎn)以GG、GA、AA基因分組，比較各組血漿FIB水平：AA組血漿FIB水平最高，其次GA組，組最低，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(見(jiàn)表2)。

2.3 兩組FGB-455G/A基因頻率和等位基因分布比較 經(jīng)χ2檢驗(yàn)，F(xiàn)GB-455G/A基因型頻率分布兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.093，P=0.955)；WML組的A等位基因頻率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.047，P=0.828)(見(jiàn)表3)。

表1 不同F(xiàn)IB水平改良Scheltens量表評(píng)分比較

表2 FGB-455G/A各基因型間血漿FIB水平比較

表3 兩組FGB-455G/A多態(tài)性分布比較[n(%)]

3 討 論

WML在老年人群的頭CT/MRI檢查中常見(jiàn)，隨著認(rèn)識(shí)的深入，已經(jīng)證實(shí)WML 與認(rèn)知功能障礙、卒中等疾病密切相關(guān)，具有重要的臨床意義。目前WML的發(fā)病機(jī)制仍未闡明，可能與內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙、BBB破壞及慢性腦灌注不足等相關(guān)[11～13]。

FIB是分子量為340 KDa的血漿糖蛋白，血栓形成的前體物質(zhì)，其含量與血漿黏度密切相關(guān)[14]。FIB參與血栓形成、動(dòng)脈粥樣硬化等過(guò)程，是重要的凝血因子。高FIB水平導(dǎo)致血液黏度增高，引起腦小血管的血流動(dòng)力學(xué)異常[15]，腔隙性梗死患者FIB水平明顯升高[16]。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)IB與卒中患者的WML呈獨(dú)立正相關(guān)[17]，與WML的進(jìn)展顯著相關(guān)[18]，證據(jù)支持FIB在WML中起到關(guān)鍵作用。

在腦小血管病患者中血漿FIB水平與WML呈顯著相關(guān)性[19]。Wada等[20]納入667例社區(qū)老年人群，通過(guò)橫斷面研究發(fā)現(xiàn)FIB是WML的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且與WML的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示FIB水平與WML的程度呈正相關(guān)，與上述研究結(jié)果相一致。一些研究報(bào)道結(jié)果相反，血漿FIB水平與WML無(wú)顯著相關(guān)[21，22]，Hainsworth等[23]采用血漿免疫組化標(biāo)記的FIB定量血腦屏障功能障礙，研究發(fā)現(xiàn)FIB與腦白質(zhì)異常無(wú)顯著相關(guān)性，但WML時(shí)，高FIB水平與癡呆的風(fēng)險(xiǎn)增加密切相關(guān)(OR=2.26；95%CI，1.25～4.08，P=0.007)。

近年來(lái)，證據(jù)表明遺傳因素與WML的發(fā)病及進(jìn)展密切相關(guān)。WML不同人群中具有高度遺傳性[24]。明確WML的遺傳因素有利于早期發(fā)現(xiàn)，做到早期診斷、個(gè)體化治療及預(yù)防。既往WML遺傳學(xué)研究[25，26]多集中于腎素-血管緊張素系統(tǒng)的多態(tài)性，有研究顯示其與WML存在一定的相關(guān)性。Hofer等[27]分析來(lái)自10個(gè)隊(duì)列的7773例研究對(duì)象，結(jié)果表明，一些遺傳因素(包括ACE、MTHFR、AGT、TRIM、NOTCH3和APOE4)與中老年WML的進(jìn)展無(wú)顯著關(guān)聯(lián)。

FIB由2組完全對(duì)稱(chēng)的分子構(gòu)成，每組分子由α、β和γ 3條多肽鏈組成，β鏈?zhǔn)荈IB 3條鏈中的核心鏈，當(dāng)β鏈過(guò)表達(dá)時(shí)，F(xiàn)IB水平顯著增加[28]。FIB的β鏈由FGB獨(dú)立基因編碼，F(xiàn)GB基因包含8個(gè)外顯子，編碼461個(gè)氨基酸殘基的β鏈。血漿FIB水平的變化主要有FGB調(diào)控決定，目前研究主要集中分析FGB基因多態(tài)性。FGB-455G/A基因多態(tài)性中發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的位點(diǎn)。由于其對(duì)腦血管病的積極意義，至今仍是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

既往研究[29，30]證實(shí)FGB-455 A等位基因與血漿FIB水平升高正相關(guān)，本研究結(jié)果與之相一致，AA基因型血漿FIB水平顯著高于GG型，可能通過(guò)調(diào)控FIB水平參與了WML的發(fā)病及進(jìn)展。許多研究探討了FGB-455G/A基因多態(tài)性與缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。一項(xiàng)FGB-455G/A基因多態(tài)性與缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)的大樣本薈萃分析，共納入8719各研究對(duì)象，結(jié)果表明，F(xiàn)GB-455G/A多態(tài)性與亞洲人群缺血性卒中風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)，是亞洲成年人缺血性卒中的危險(xiǎn)因素，F(xiàn)GB-455G/A基因多態(tài)性可能是一個(gè)敏感的缺血性腦卒中的預(yù)測(cè)因子[31]。這些研究結(jié)果支持FGB-455G/A基因多態(tài)性與中國(guó)人群缺血性腦卒中密切相關(guān)。

FGB-455G/A基因多態(tài)性與WML的關(guān)系未見(jiàn)研究報(bào)道，與腦小血管病的關(guān)系鮮有報(bào)道。多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)FGB-455A等位基因與多發(fā)腔隙性梗死顯著相關(guān)[32]。在韓國(guó)CSVD人群中，研究發(fā)現(xiàn)FGB-455G/A基因多態(tài)性無(wú)顯著差異性，F(xiàn)GB-455G/A基因多態(tài)性與FIB水平升高顯著相關(guān)[33]。FGB-455G/A基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群WML的發(fā)病及機(jī)制尚未見(jiàn)研究報(bào)道，本研究結(jié)果表明FGB-455G/A基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群WML無(wú)顯著相關(guān)性。有關(guān)FGB-455G/A基因多態(tài)性和WML之間的關(guān)系及機(jī)制還需進(jìn)一步探討。本研究的樣本量較小，以后的研究需要大樣本研究來(lái)闡明這種關(guān)系，圍繞 WML的相關(guān)生物學(xué)標(biāo)志物及基因多態(tài)性等方面開(kāi)展。研究?jī)烧唛g的關(guān)系及機(jī)制有助于篩查WML的高危人群，為WML早期診斷、個(gè)體化治療和預(yù)防決策提供思路和依據(jù)。