李澤銳 高 靜
(1 伊犁州新華醫(yī)院檢驗(yàn)科,新疆 伊犁 835000;2 解放軍第十一醫(yī)院,新疆 伊犁 835000)
乙型肝炎位于世界人口病死率第10位,全球感染人數(shù)約為艾滋病的8倍,我國(guó)為乙型肝炎高發(fā)國(guó)家,流行病學(xué)調(diào)查顯示,人群發(fā)生乙型肝炎概率極高,表面抗原攜帶率大約為15%[1]。臨床上檢測(cè)HBV的方法中酶聯(lián)免疫吸附法為傳統(tǒng)方法,技術(shù)較為成熟,而乙型肝炎五項(xiàng)主要包含乙型肝炎e抗原(HBeAg),乙型肝炎表面抗體(HBsAb),乙型肝炎表面抗原(HBsAg),乙型肝炎核心抗體(HBcAb)和乙型肝炎e抗體(HBeAb)[2]。熒光定量PCR具有高靈敏度、高特異性及高精確度,廣受臨床檢驗(yàn)人員的青睞,而化學(xué)發(fā)光酶免疫法不僅具有高靈敏度、高特異性及廣泛的線性范圍,還具有長(zhǎng)時(shí)間有效的標(biāo)志物及高的自動(dòng)化程度,逐漸于乙型肝炎病毒感染檢測(cè)中應(yīng)用,尤其是乙型肝炎五項(xiàng)。
1.1 一般資料:隨機(jī)選取2012年6月至2015年6月在我院門(mén)診和住院的乙型肝炎患者68離,包括47例男性患者,年齡在21~58歲,平均年齡(43.51±10.04)歲;21例女性患者,年齡在25~57歲,平均年齡(36.19±11.40)歲。乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)符合文獻(xiàn)[2]。
1.2 檢測(cè)儀器和方法。方法一:對(duì)HBV-DNA的檢測(cè)選用羅氏公司的LightCycler2.0PCR儀進(jìn)行檢測(cè),試劑盒選用的為上海普眾華有限公司[3]。方法二:對(duì)血清的乙型肝炎五項(xiàng)檢測(cè)選用的為強(qiáng)生公司的VITROS3600儀進(jìn)行檢測(cè),按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行相關(guān)操作,每天在室內(nèi)進(jìn)行質(zhì)控,每次檢測(cè)包括了對(duì)HBV陰性和HBV陽(yáng)性的重復(fù)檢測(cè)[4]。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)準(zhǔn)確無(wú)誤的用SPASS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。、t檢驗(yàn)表示計(jì)量資料,(%)表示計(jì)數(shù)資料,χ2表示組間對(duì)比,P<0.05差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì):實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,所有乙型肝炎五項(xiàng)血清標(biāo)本檢測(cè)中,HBV-DNA陽(yáng)性標(biāo)本血清學(xué)標(biāo)志物的陽(yáng)性模式共有10種,其中大三陽(yáng)組(HBsAg+,HBcAb+,HBeAg+)和小三陽(yáng)組(HBsAg+,HBcAb+,HBeAb+)所占比例最大,除此之外,HBcAb陽(yáng)性標(biāo)本總計(jì)66例,約占所有HBV-DNA陽(yáng)性標(biāo)本的97.5%。見(jiàn)表1。
表1 10種血清學(xué)模式標(biāo)本的HBV-DNA載量分布
2.2 HBV-DNA的分布:將HBV-DNA載量分為低載量、中載量、高載量 三級(jí)。結(jié)果顯示134組三陽(yáng)組:低載量占17.9%,中載量占17.4%,高載量占64.7%,135組小三陽(yáng):低,中,高載量的相應(yīng)比例分別為81.3%,15.8%,2.9%差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.3 HBeAg與HBeAb陽(yáng)性標(biāo)本中HBV-DNA載量分布:在68例實(shí)驗(yàn)中,對(duì)低中高三組符合相應(yīng)條件的樣本例數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),結(jié)果顯示:高載量組有60.9%的陽(yáng)性標(biāo)本,低載量組有76.7%陽(yáng)性標(biāo)本 ,差異顯著,P<0.05,見(jiàn)表2。
表2 HBeAg陽(yáng)性組與HBeAb 陽(yáng)性組標(biāo)本的HBV-DNA載量分布
熒光定量PCR檢測(cè)和化學(xué)發(fā)光酶免疫法都是定量試驗(yàn),但二者的檢測(cè)原理和檢測(cè)標(biāo)志物存在差異,因此不能直接相比較,HBV-DNA復(fù)制程度的檢測(cè)是熒光定量PCR從分子水平直接進(jìn)行檢測(cè)的,能夠?qū)颊咧委煹念A(yù)后恢復(fù)情況進(jìn)行準(zhǔn)確反映;而化學(xué)發(fā)光酶免疫法僅僅為化學(xué)發(fā)光結(jié)合酶免疫實(shí)驗(yàn)其中的一種技術(shù)[5]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:所有實(shí)驗(yàn)樣本中大三陽(yáng)和小三陽(yáng)所占比例最高,其中小三陽(yáng)組(135組)中低,中,高載量的相應(yīng)比例分別為81.3%、15.8%、2.9%,大三陽(yáng)組(134組)中低載量占16.9%,中載量所占比例為17.4%,高載量所占比例為64.7,兩組差異P<0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HBeAb和HBeAg陽(yáng)性標(biāo)本在HBV-DNA水平存在差異,P<0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
綜上所述,熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙型肝炎五項(xiàng)水平在判斷乙型肝炎病毒感染病程的相關(guān)性具有理想效果,二者的結(jié)合可以多方位全面的反映乙型肝炎患者的病程轉(zhuǎn)歸及其預(yù)后恢復(fù)。