董敬翠

摘 要：目的：通過指紋圖譜這一質(zhì)量研究方法，對(duì)顆粒狀的板藍(lán)根藥品的實(shí)際質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，重點(diǎn)研究其質(zhì)量的穩(wěn)定程度。方法，結(jié)合HPLC檢測(cè)技術(shù)，確定專屬于本次實(shí)驗(yàn)的分析柱，完成梯度洗脫處理工作，緩沖液為酸堿度適宜的醋酸鈉溶液。對(duì)于一定檢測(cè)條件下的氨基酸指紋圖譜進(jìn)行查看，在移植距離系數(shù)以及角余弦系數(shù)的前提下，對(duì)不同批次的板藍(lán)根樣品的質(zhì)量進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)其據(jù)具體的一致程度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：完成針對(duì)顆粒狀板藍(lán)根的質(zhì)量鑒定工作后發(fā)現(xiàn)，選擇應(yīng)用的HPLC技術(shù)具有較高的穩(wěn)定性、精密度，同時(shí)其重現(xiàn)性也被呈現(xiàn)出來。結(jié)論：本次測(cè)定板藍(lán)根顆粒過程中，選擇的質(zhì)量檢測(cè)方法具有極強(qiáng)的可控性，在實(shí)際的藥物質(zhì)量控制中可以被應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：板藍(lán)根顆粒；指紋圖譜；質(zhì)量控制

中圖分類號(hào)：R927.11 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

板藍(lán)根是一種中藥藥材，是菘監(jiān)植物的根部，該植物屬于十字花科，具有良好的清熱解毒效果，同時(shí)還有利咽涼血的應(yīng)用效果。在將板藍(lán)根藥材制成藥品時(shí)，顆粒是比較常見的劑型，服用方便，在對(duì)病毒性感冒以及流行性感冒進(jìn)行預(yù)防時(shí)，可以使用板藍(lán)根顆粒。該藥品的主要應(yīng)用優(yōu)勢(shì)在于抗病毒活性比較強(qiáng)。為了提升該藥品的實(shí)際藥效，相關(guān)研究人員進(jìn)行了篩選試驗(yàn)，對(duì)其具有的活性進(jìn)行檢測(cè)，其在抵抗病毒時(shí)，內(nèi)部氨基酸起到的作用比較大。在控制該藥品的而質(zhì)量時(shí)，一般也需要對(duì)氨基酸成分進(jìn)行控制，熒光反應(yīng)方法是控制效果極好的方法，但是隨著板藍(lán)根顆粒出現(xiàn)變動(dòng)，該種方法并不能對(duì)控制要求進(jìn)行滿足，板藍(lán)根藥材的實(shí)際用量也失去了控制，先對(duì)質(zhì)量控制方法進(jìn)行探究，探究過程如下：

1 材料與方法

1.1 一般材料

Agilentl l00系列高效液相色譜儀、Agilent自動(dòng)進(jìn)樣器、Agilent DAD檢測(cè)器、BDS C18 色譜柱；對(duì)照品L—纈氨酸、L—精氨酸、L—亮氨酸、L—氨基丁酸、L—脯氨酸、L—天冬氨酸、L—谷氨酸均購自可靠廠家；2，4—二硝基氟苯（DNFB） （批號(hào)D0835）；乙腈（色譜醇），實(shí)驗(yàn)用水為雙蒸水。

1.2 方法

色譜條件：色譜柱：Agilent BDS C18柱（10μm，4.6mm

×250mm）；流動(dòng)相：pH6.4的醋酸鈉緩沖液（A）—乙腈（B）（95∶5），梯度洗脫，0min～5min，保持A∶B=（95∶5）；5min～60min，B線性上升至40%，流速均為1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)360nm。柱溫：室溫。在上述條件下分別準(zhǔn)確吸取混合氨基酸對(duì)照品供試液適量，以0.45μm微孔濾膜過濾，進(jìn)樣5μL，理論塔板數(shù)按精氨酸計(jì)，不低于3000。

精密度試驗(yàn)分析：首先制備混合型的氨基酸溶液，將其作為對(duì)照品使用，配置量為5μL，取樣工作需要開展5次，根據(jù)已有的色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)保留氨基酸的時(shí)間進(jìn)行控制，范圍為0.1%～0.3%，各個(gè)對(duì)照品的峰值面積也確定為0.5%～1.2%，該儀器具有的精密度比較穩(wěn)定，儀器方面并不會(huì)產(chǎn)生影響實(shí)驗(yàn)的問題。

制備供試液：在制備質(zhì)量控制工作之中的供試液時(shí)，需要按照以下方法進(jìn)行，將待檢測(cè)的氨基酸對(duì)照品精準(zhǔn)稱取30mg，稱取對(duì)照品放置在常用的量瓶之中，借助蒸餾水對(duì)溶液定容，將待測(cè)溶液搖晃均勻，靜置狀態(tài)放置一段時(shí)間之后，吸取0.5mL溶液，分別放在多個(gè)小量瓶之中，加入適量的乙腈溶液與醋酸鈉溶液，將其進(jìn)行水浴處理，溫度為60℃，反應(yīng)時(shí)間為30min，取出后，加以冷卻處理，繼續(xù)用蒸餾水進(jìn)行定容。

制備樣品供試液：采用精密稱取的方法獲得2g板藍(lán)根顆粒藥品，加入適量清水，溶解藥品，吸取1mL藥品同樣放置于小量瓶之中，同樣加入適量的乙腈溶液與醋酸鈉溶液，水浴處理?xiàng)l件也保持一致，后續(xù)冷卻定容處理方法均與制備對(duì)照品溶液的方法相同。

重現(xiàn)性研究實(shí)驗(yàn)，對(duì)6批次的板藍(lán)根藥品進(jìn)行檢測(cè)，并繪制相應(yīng)的HPLC圖譜，在選定的板藍(lán)根藥品中，將實(shí)際共有峰的峰面積作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果指標(biāo)，進(jìn)而明確變異系數(shù)數(shù)值比較小，低于0.5%，該圖譜具有的重現(xiàn)性值得肯定。

2 結(jié)果

在進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)時(shí)，首先需要根據(jù)繪制的圖譜來對(duì)質(zhì)量能否保持一致性進(jìn)行判斷，圖譜分析是一種相對(duì)直觀的分析方法，能夠直接展現(xiàn)出最終測(cè)定結(jié)果，直接對(duì)共有峰信息進(jìn)行確定，在有了量化判斷指標(biāo)之后，選擇控制模式的工作也具有了可靠的參照依據(jù)，在確定最終的質(zhì)量控制方法時(shí)，必須要以板藍(lán)根藥品的實(shí)際生產(chǎn)情況為準(zhǔn)，無論是控制模式與質(zhì)量評(píng)價(jià)都要既簡(jiǎn)單又有良好的效果。

通過與混合氨基酸對(duì)照品的色譜圖對(duì)比（如圖1所示），發(fā)現(xiàn)，板藍(lán)根顆粒中以脯氨酸和精氨酸的含量最高，其次是纈氨酸。

3 討論

中藥藥品的成分一般比較復(fù)雜，主要是因?yàn)槠鋬?nèi)部含有的活性成分比較多，這給藥品質(zhì)量檢定工作帶來困難，現(xiàn)有的質(zhì)量測(cè)定技術(shù)并不能完全地將中藥的質(zhì)量信息反映出來，本次選用的指紋圖譜技術(shù)也屬于新型檢定技術(shù)，尚存不確定因素，繪制出的指紋圖譜并不能真實(shí)地對(duì)藥品的藥效有效反映，但是在對(duì)藥品的質(zhì)量進(jìn)行控制時(shí)，應(yīng)用指紋圖譜卻是可行的，尤其是在保障不同批次藥品的質(zhì)量的一致化程度時(shí)，該種方法具有的現(xiàn)實(shí)應(yīng)用價(jià)值更高。

本文選擇的研究方法比較成熟，能夠使衍生化受到的來自于反應(yīng)時(shí)間與反應(yīng)溫度的影響，如果水浴的溫度沒有達(dá)到60℃，需要比較長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間，但是如果溫度升高，超過了60℃，只需要0.5h的時(shí)間就能完成整個(gè)反應(yīng)過程，在高于60℃，低于100℃的溫度范圍之中，即使出現(xiàn)了升高的現(xiàn)象，衍生化現(xiàn)象受到的影響也比較小。

在繪制指紋圖譜的工作結(jié)束后，研究人員還需選出最為合適的控制模式以及標(biāo)準(zhǔn)化的指紋圖譜，否則質(zhì)量控制工作仍舊無法順利進(jìn)行。

總之，相關(guān)人員還需要繼續(xù)調(diào)整制備板藍(lán)根顆粒的方法，消除該顆粒狀藥品的缺陷，提升其藥物應(yīng)用價(jià)值，同時(shí)使其具有的更高的質(zhì)量，在控制藥物質(zhì)量時(shí)，也需選出可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

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