烏新平 王秀梅

摘要：真空冷凍干燥和噴霧干燥是目前國(guó)內(nèi)外保健品生產(chǎn)中常用的兩種方法，但在生產(chǎn)杜仲生物發(fā)酵人用保健品方面目前還沒(méi)有研究。本文通過(guò)這兩種工藝的研宄，考察了真空冷凍干燥和噴霧干燥兩種工藝對(duì)生產(chǎn)杜仲生物發(fā)酵人用保健品的感官和性能的影響。文章利用兩種工藝分別處理杜仲生物發(fā)酵液，并從制備的產(chǎn)品質(zhì)量上進(jìn)行優(yōu)缺點(diǎn)分析和比較。結(jié)果表明真空冷凍干燥制備杜仲生物發(fā)酵人用保健品可以最大限度的保留杜仲皮和葉子中的有效活性成分，而且完全保留了活的嗜酸乳桿菌，從而保障了保健品的保健功效。

Abstract： Vacuum freeze drying and spray drying are two commonly methods used in the production of health care products at home and abroad at present. However， there is no research on the health care products of eucommia ulmoides. This article researched the effects of spray drying and cryogenic freeze-drying on the sensory and performance of the health care products of eucommia ulmoides. In article the fermentation broth of eucommia was treated separately by two kinds of techniques and the advantages and disadvantages of the prepared products are analyzed and compared. Results show that the active ingredients of eucommia ulmoides and leaves were maximize preseved by low temperature vacuum freeze-drying and the living acidophilus preserved completely， thus the health care benefits of health care products were protected successfully.

關(guān)鍵詞：杜仲；生物發(fā)酵；人用保健品；工藝；比較

Key words： eucommia；ulmoides；health care products；process；compare

中圖分類號(hào)：TQ920.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-4311（2018）31-0212-03

0 引言

噴霧干燥是物料經(jīng)霧化后與熱空氣接觸，水分經(jīng)瞬間高溫迅速汽化除去從而得到干燥物品，該工藝干燥效果好，物料均勻、流散性好，但因瞬間高溫過(guò)程物料的營(yíng)養(yǎng)成分容易被破壞和活性乳酸菌易被滅活。真空冷凍干燥技術(shù)是把物料先快速凍結(jié)，并在真空低溫狀態(tài)下將水分固態(tài)升華成氣態(tài)，再經(jīng)解吸干燥除去內(nèi)部結(jié)合水，從而達(dá)到干燥脫水的目的，該工藝不僅最大限度地保留了保健品的色香味形和生物活性成分，而且產(chǎn)品結(jié)構(gòu)疏松，產(chǎn)品復(fù)水性和速溶性好，更接近“新鮮食品”，目前雖然廣泛應(yīng)用在國(guó)內(nèi)外保健食品生產(chǎn)中，但在杜仲生物發(fā)酵人用保健品加工中的研究和應(yīng)用還沒(méi)有。

杜仲生物發(fā)酵人用保健品是以杜仲皮和杜仲葉提取液為主，配以蛋白胨、葡萄糖、碳酸鈣等其他營(yíng)養(yǎng)成分制備成適合嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)繁殖的培養(yǎng)基，再無(wú)菌接入嗜酸乳桿菌進(jìn)行培養(yǎng)后制備而成。其充分利用嗜酸乳桿菌發(fā)酵杜仲皮葉營(yíng)養(yǎng)成分，既促進(jìn)了嗜酸乳酸桿菌呈幾何倍數(shù)增長(zhǎng)繁殖，又使得杜仲皮葉中富含的木脂素類（松酯醇二葡萄糖苷雙向調(diào)壓）、桃葉珊瑚甙[1]、京尼平苷、京尼平苷酸[2]（環(huán)烯醚萜甙類化合物具有抗腫瘤活性）、綠原酸[3、4]（苯丙素類具有抗菌作用）、總黃酮類[5]、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)和生物活性成分進(jìn)一步降解為有利于人體吸收的小分子。嗜酸乳桿菌本身是人體腸道內(nèi)的主要益生菌，在生長(zhǎng)繁殖中可以釋放有益于雙歧桿菌等其他益生菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，從而起到增加人體大腸內(nèi)益生菌的數(shù)量，促進(jìn)人體健康的作用。同時(shí)嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)繁殖中的代謝產(chǎn)物多糖類物質(zhì)甘露聚糖肽[6]（增強(qiáng)人體免疫活性、抗腫瘤）和可溶性乳酸鈣，長(zhǎng)期食用后對(duì)康復(fù)人體膝關(guān)節(jié)滑膜炎有一定的效果。

1 儀器、藥品和材料

儀器：島津高效液相色譜儀LC-20A；高速冷凍離心機(jī)CT15RT，上海天美生化儀器設(shè)備工程有限公司；生物潔凈安全柜BHC-1300ⅡA/B3，吳江市凈化設(shè)備總廠；全溫振蕩器DHZ-C太倉(cāng)豪誠(chéng)實(shí)驗(yàn)儀器廠；噴霧干燥設(shè)備（型號(hào)蒸發(fā)量5l/h） 離心噴霧干燥干燥機(jī)，無(wú)錫干燥設(shè)備有限公司；冷凍干燥設(shè)備（型號(hào)1.0平方）上海東富龍科技股份有限公司杜仲皮、杜仲葉由三門峽天緣生物有限公司提供；蛋白胨、牛肉膏和酵母膏生化試劑；氯化鈉、葡萄糖口服試劑、碳酸鈣食品級(jí)；乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基（MRS），青島海博生產(chǎn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品制備

①分別稱取預(yù)先破碎的杜仲皮、杜仲葉，按1：2的比例，分別加水浸泡浸潤(rùn)；然后按1：6和1：5比例加水進(jìn)行兩次浸提提取。設(shè)定杜仲皮提取溫度為98～100℃，提取時(shí)間為1～1：30小時(shí)；設(shè)定杜仲葉提取溫度為70℃，提取時(shí)間為0：40～1：00小時(shí)。合并上述杜仲皮和杜仲葉的提取液，作為一、二、三級(jí)培養(yǎng)液使用。

②將嗜酸乳桿菌無(wú)菌操作接種于含杜仲提取液的培養(yǎng)液中，逐級(jí)進(jìn)行一、二、三級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)。一級(jí)試管培養(yǎng)37～39℃培養(yǎng)22～24h，培養(yǎng)液pH4.2～4.5正常渾濁；二級(jí)三角瓶培養(yǎng)37～39℃搖床培養(yǎng)18～24h，培養(yǎng)液pH4.2～4.5正常渾濁、無(wú)菌膜、無(wú)絮狀物；三級(jí)圓底燒瓶培養(yǎng)37～39℃搖床培養(yǎng)16～18h，培養(yǎng)液pH4.2～4.5正常渾濁、無(wú)菌膜、無(wú)絮狀物，碳酸鈣減少?；罹鷶?shù)在120億/ml以上。

③噴霧干燥樣品。將發(fā)酵過(guò)的培養(yǎng)液經(jīng)噴霧干燥蠕動(dòng)泵進(jìn)行干燥（離心和壓力噴霧干燥均可）。噴霧干燥中干燥溫度、壓縮空氣流量和物料密度是主要因素，選取不同的干燥溫度、壓縮空氣流量和物料密度對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)液進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，正交實(shí)驗(yàn)因素表見(jiàn)表1，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表見(jiàn)表2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。條件設(shè)置如表2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

正交試驗(yàn)結(jié)果表3感官評(píng)分值結(jié)果表明，最佳噴霧干燥實(shí)驗(yàn)優(yōu)選結(jié)果是A2B2C2，即進(jìn)風(fēng)溫度為180℃、壓縮空氣；流量為480l/h、物料密度為1.1g/ml左右，在此條件下得到的綠原酸和京尼平苷及感官評(píng)分65分?？刂七M(jìn)風(fēng)溫度160～180℃，出風(fēng)溫度60～80℃。收集噴霧干燥樣品，即可作為提供壓片、膠囊、造?；蚬δ茱嬃系犬a(chǎn)品的基礎(chǔ)原料。

④真空冷凍干燥（又稱升華干燥）樣品 將發(fā)酵好的培養(yǎng)液倒入冷凍托盤內(nèi)，進(jìn)行低溫冷凍干燥，真空冷凍干燥中物料粘度和真空度是主要因素，選取不同的物料粘度和真空度對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)液進(jìn)行正交試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示。

真空冷凍干燥溫度控制冷凍固化溫度-45～-50℃，物料密度控制在1.1左右，固化后真空升華控制高真空10～40Pa，獲得冷凍干燥品，即可作為提供壓片、膠囊、造?；蚬δ茱嬃系犬a(chǎn)品的基礎(chǔ)原料。

2.2 產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)比較

2.2.1 杜仲生物發(fā)酵培養(yǎng)物真空冷凍干燥樣品檢驗(yàn)項(xiàng)目和方法

①水分：按GB 5009.3-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定。

②乳酸菌：按GB 4789.35-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 乳酸菌檢驗(yàn)。

③綠原酸：HPLC法測(cè)定杜仲雄花和杜仲雄花茶中京尼平苷酸、綠原酸和京尼平苷[7]。

④總黃酮：總黃酮含量比色法測(cè)定[8]。

⑤京尼平苷：HPLC法同時(shí)測(cè)定杜仲皮中京尼平苷酸、綠原酸、京尼平苷和松酯醇二葡萄糖苷[9]。

⑥京尼平苷酸：同⑤。

⑦松酯醇二葡萄糖苷：同⑤。

⑧甘露聚糖肽：同時(shí)高產(chǎn)甘露聚糖肽與乳酶生發(fā)酵條件的研究[10]。

⑨乳酸鈣：按GB 5009.12-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鈣的測(cè)定。

⑩桃葉珊瑚苷：高效液相色譜法測(cè)定杜仲果仁中的桃葉珊瑚苷方法[1]。

2.2.2 杜仲生物發(fā)酵噴霧干燥和真空冷凍干燥檢測(cè)結(jié)果（表6）

2.3 產(chǎn)品性狀、簽別、檢查

感官檢查噴霧干燥樣品顆粒粗糙、顏色深棕，真空冷凍樣品呈多孔海綿狀，顏色淺棕，復(fù)水快。藥味濃。

3 討論與小結(jié)

①冷凍干燥物料干燥過(guò)程是在較低溫度下進(jìn)行，而且基本隔絕了空氣，因此更有效地抑制了熱敏性物質(zhì)發(fā)生生物、化學(xué)或物理變化，并較好地保存了原料色澤和活性物質(zhì)。

②噴霧干燥和真空冷凍干燥兩種制備工藝制得的產(chǎn)品，從質(zhì)量指標(biāo)感官和有效成分等比較可知，噴霧干燥產(chǎn)品中綠原酸、京尼平苷有效成分損失較大，真空冷凍干燥則更好的最大限度的保存了產(chǎn)品的這兩種活性物質(zhì)[11、12]?；钚允人崛闂U菌冷凍干燥品大約50億/克以上，噴霧干燥品嗜酸乳桿菌則未檢出。

參考文獻(xiàn)：

[1]胡江宇，張永康，李輝，李志平，田楊.高效液相色譜法測(cè)定杜仲果仁中的桃葉珊瑚苷[J].生命科學(xué)儀器，2006（03）：39-42.

[2]杜紅巖.杜仲活性成分與藥理研究的新進(jìn)展[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2003（02）：58-61，82.

[3]張康健，董娟娥，馬柏林，高錦明，韓學(xué)文.杜仲次生代謝物部位差異性的研究[J].林業(yè)科學(xué)，2002（06）：12-16.

[4]王嗣岑，賀浪沖，高錦明，張康健，劉麗.RP-HPLC法同時(shí)分離測(cè)定杜仲葉中3種有效成分[J].西北藥學(xué)雜志，2001（01）：15-16.

[5]杜慶鑫，魏艷秀，劉攀峰，杜紅巖.分光光度法測(cè)定杜仲雄花和葉中的總黃酮[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，37（05）：96-100.

[6]馮鎖民，任淑娟，楊穎，王黎，惠樂(lè)妮.同時(shí)高產(chǎn)甘露聚糖肽與乳酶生發(fā)酵條件的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（19）：11889-11891.

[7]戚向陽(yáng)，陳維軍，張聲華.反相高效液相色譜法測(cè)定杜仲中京尼平苷、京尼平苷酸及綠原酸的含量[J].藥物分析雜志，2000（01）：22-24.

[8]尉芹，王冬梅，馬希漢，張康健.杜仲葉總黃酮含量測(cè)定方法研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2001（05）：119-123.

[9]劉慧，張盛，劉仲華.HPLC法同時(shí)測(cè)定杜仲皮中京尼平苷酸、綠原酸、京尼平苷和松脂醇二葡萄糖苷[J].中草藥，2012，43（08）：1547-1549.

[10]金偉華，陳華，張明，蒲志強(qiáng).注射用甘露聚糖肽兩種含量測(cè)定方法的比較[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2016，34（01）：62-65.

[11]李欽，杜紅巖，杜蘭英，赫錦錦，段經(jīng)華.HPLC法測(cè)定杜仲雄花和杜仲雄花茶中京尼平苷酸、綠原酸和京尼平苷[J].中草藥，2009，40（01）：71-72，143.

[12]趙文波，劉起華，李婧海.杜仲的研究與應(yīng)用[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2000（02）：49.