萬瑛
(江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇鎮(zhèn)江212001)
糖尿病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升態(tài)勢(shì),糖尿病足是2型糖尿?。═2DM)嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥,是因糖尿病周圍神經(jīng)病變和(或)下肢動(dòng)脈粥樣硬化引發(fā)的周圍小動(dòng)脈閉塞,或皮膚微血管病變以及細(xì)菌感染所引起的足部畸形、潰瘍及壞疽等病變,給患者帶來難以承受的痛苦,嚴(yán)重者可以導(dǎo)致截肢,甚至死亡[1-2]。
研究表明,炎癥在T2DM及糖尿病足的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用[3-7]。白細(xì)胞介素(IL)是一類在免疫細(xì)胞的活化、增殖與免疫調(diào)節(jié)及在炎癥反應(yīng)中起著重要作用的細(xì)胞因子。IL-6生物效應(yīng)十分復(fù)雜,可以促進(jìn)糖皮質(zhì)激素合成,刺激破骨細(xì)胞活性和角質(zhì)細(xì)胞生長,參與炎癥反應(yīng)等,高水平的IL-6可引起足部潰瘍部位的免疫損傷[8]。IL-18在炎癥以及免疫反應(yīng)中亦發(fā)揮十分重要的作用,其自發(fā)現(xiàn)以來一直作為研究熱點(diǎn)而備受關(guān)注。研究顯示,高血糖本身即可影響IL-18濃度,IL-18可依賴細(xì)胞內(nèi)NF-κB和PI3K途徑增強(qiáng)T細(xì)胞接觸激活的單核細(xì)胞分泌致炎因子的功能[9]。除此之外,IL-18又因其炎癥中心介質(zhì)的重要作用,可誘導(dǎo)一些促炎細(xì)胞因子,如TNF-α、IL-1β以及IL-8等的生成[10]?;谘装Y在糖尿病足發(fā)生發(fā)展中的重要作用以及IL-18在炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的中心地位,本研究檢測(cè)糖尿病足患者血清IL-18和IL-6濃度,以期為早期預(yù)防糖尿病足和指導(dǎo)抗炎治療提供臨床依據(jù)。
選擇2016年1月至2017年12月在江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院住院的糖尿病足患者100例(糖尿病足組),男61例,女39例;同期內(nèi)分泌科住院的無足部潰瘍的T2DM患者100例(T2DM組),男66例,女34例。糖尿病足的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2011年國際糖尿病足工作組發(fā)布的《糖尿病足國際臨床指南》[11];糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國糖尿病協(xié)會(huì)2012年發(fā)布的《糖尿病診療標(biāo)準(zhǔn)(2012)版》[12]。入院后采集患者的一般資料,包括年齡、性別和糖尿病病程等內(nèi)容,記錄糖尿病足和T2DM患者的臨床癥狀,足潰瘍的Wagner分級(jí)。建立數(shù)據(jù)庫,系統(tǒng)錄入患者資料。
患者入院后首次檢查時(shí),空腹12 h后采集血液標(biāo)本,2 000 r/min離心15 min,分離血清,保存于 -80℃。
采用美國貝克曼庫爾特公司AU5800全自動(dòng)生化分析儀及配套原裝試劑測(cè)定空腹血糖、總膽固醇和三酰甘油。采用日本愛科來HA-8180及配套原裝試劑測(cè)定HbA1c。所有操作均嚴(yán)格依據(jù)試劑說明書進(jìn)行。
采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清IL-18和IL-6濃度(試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司)。白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞采用日本Sysmex公司配套原裝試劑,于Sysmex XN3000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行檢測(cè)。
應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);計(jì)量資料以±s表示。風(fēng)險(xiǎn)因素分析采用Logistic回歸分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
糖尿病足組患者年齡和病程均顯著高于T2DM組,三酰甘油含量明顯低于T2DM組患者(均P<0.01);而兩組性別構(gòu)成、BMI、空腹血糖和 HbA1c
間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。
表1 兩組臨床基線特征比較
糖尿病足組IL-18、IL-6、白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞水平均明顯高于T2DM組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。
表2 兩組炎癥指標(biāo)比較
以臨床診斷為應(yīng)變量,年齡、糖尿病病程、三酰甘油、IL-18、IL-6、白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞為自變量,進(jìn)行單因素Logistic回歸分析。結(jié)果見表3,中性粒細(xì)胞、IL-18和IL-6是糖尿病足發(fā)生的危險(xiǎn)因素。進(jìn)一步進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,如表4所示,IL-18和IL-6是糖尿病足發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
表3 單因素Logistic回歸分析結(jié)果
表4 多因素Logistic回歸分析結(jié)果
免疫與炎癥因子參與糖尿病足的發(fā)生發(fā)展過程[13-14],因此,檢測(cè)炎癥因子水平對(duì)早期防治糖尿病足,減少糖尿病足終點(diǎn)事件的發(fā)生具有重要意義。糖尿病足患者年齡大、病程長,機(jī)體免疫能力與組織修復(fù)能力均下降,并發(fā)癥發(fā)生率高。由于飲食限制、糖利用障礙、營養(yǎng)物質(zhì)消耗等,糖尿病足患者三酰甘油水平較低,導(dǎo)致機(jī)體營養(yǎng)不良、潰瘍難以愈合,亦是糖尿病足形成原因之一。
T2DM及糖尿病足的發(fā)生、發(fā)展與諸多因素密切相關(guān),目前研究普遍認(rèn)為其與自然免疫力和低度炎癥性因素關(guān)系密切[15]。目前研究已證實(shí),IL-18是一種具有多向性效應(yīng)的促炎癥因子,對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用,樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、呼吸道上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞可分泌IL-18[16-17]。本研究顯示,與T2DM患者相比,糖尿病足患者血清中IL-18濃度顯著升高,同時(shí)多因素Logistic分析提示IL-18濃度是糖尿病足發(fā)生、發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。在高血糖條件下,促炎因子IL-6等的釋放,可介導(dǎo)炎癥發(fā)生,對(duì)機(jī)體組織器官造成損傷。此外,IL-6可促進(jìn)血管緊張素原的合成,繼續(xù)誘導(dǎo)多種炎癥因子的釋放,如 TNF-α[18],TNF-α進(jìn)而又激活中性粒細(xì)胞釋放IL-6,形成正反饋循環(huán)。本研究亦表明IL-6介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是糖尿病足發(fā)生、發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
綜上所述,在糖尿病患者中監(jiān)測(cè)血清炎癥因子IL-18和IL-6濃度有助于判斷病情進(jìn)展和指導(dǎo)治療,為臨床早期防治糖尿病足提供重要依據(jù)。