張 翔, 于 璐, 徐東炯, 顧娟娜, 吳禮裕

(1. 常州市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心, 江蘇 常州 213001； 2. 常州市人居環(huán)境檢測(cè)防治中心, 江蘇 常州 213001)

0 引 言

底棲動(dòng)物是水生態(tài)系統(tǒng)的重要組成[1]，對(duì)其監(jiān)測(cè)現(xiàn)已成為水環(huán)境生物監(jiān)測(cè)的重要部分[2]，是江蘇省政府率先批復(fù)實(shí)施的《江蘇省太湖流域水生態(tài)環(huán)境功能區(qū)劃(試行)》[3]中是水生態(tài)健康指數(shù)的重要組成，直接關(guān)系到太湖流域水生態(tài)管理目標(biāo)。

底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)是環(huán)境監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室底棲動(dòng)物的監(jiān)測(cè)和研究的基礎(chǔ)，其完善程度直接影響到底棲動(dòng)物分類(lèi)鑒定的準(zhǔn)確性和可信性，是實(shí)驗(yàn)室不可或缺的一部分。針對(duì)生物多樣性研究，國(guó)內(nèi)各大高校及科研院所會(huì)依據(jù)研究方向和內(nèi)容建設(shè)其標(biāo)本庫(kù)，但大多集中在植物、魚(yú)類(lèi)、獸類(lèi)、禽類(lèi)和鳥(niǎo)類(lèi)等，專(zhuān)門(mén)建設(shè)針對(duì)底棲動(dòng)物的標(biāo)本庫(kù)以海洋底棲動(dòng)物為主，淡水極少涉及，且無(wú)完善的管理規(guī)則。這使得國(guó)內(nèi)擁有底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的單位無(wú)法正常交流標(biāo)本，也無(wú)法提升底棲動(dòng)物的研究水平。本文致力于底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)建設(shè)的步驟和質(zhì)量控制研究，覆蓋實(shí)驗(yàn)室管理中對(duì)人員、器材、物料、環(huán)節(jié)、方法的規(guī)定，相關(guān)實(shí)驗(yàn)室可直接將其用作底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)建設(shè)與管理的規(guī)范參考文件。

1 底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)建設(shè)目的和現(xiàn)狀

對(duì)于底棲動(dòng)物標(biāo)本的分類(lèi)鑒定，主要依靠科研院所和環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的論文、書(shū)籍，現(xiàn)雖已是彩色圖片與個(gè)體特征介紹的圖文并茂形式，但其浸制標(biāo)本庫(kù)的建設(shè)依然不健全，“一個(gè)標(biāo)本勝千言”[4]，這不僅涉及生物監(jiān)測(cè)、科研工作，更是對(duì)環(huán)境管理、環(huán)境保護(hù)的準(zhǔn)確性、科學(xué)性、推廣性有重要現(xiàn)實(shí)意義。

底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)構(gòu)成主要為浸制標(biāo)本，部分為干制標(biāo)本和玻片標(biāo)本，其建設(shè)是生物監(jiān)測(cè)應(yīng)用于環(huán)境管理的支撐，也是底棲動(dòng)物監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化、QA/QC的一部分，在科研、監(jiān)測(cè)中占有重要地位。在國(guó)外主要依托博物館對(duì)標(biāo)本進(jìn)行收集和管理。歐美的大型自然歷史博物館均已將標(biāo)本視為世界文化遺產(chǎn)，只要出于科研需要，任何國(guó)家和地區(qū)的人員均有權(quán)使用，而且一般都得到博物館的支持和幫助。但在國(guó)內(nèi)博物館的標(biāo)本主要以保存為主，許多標(biāo)本都難以借出[5]。

2 底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的建設(shè)

2.1 標(biāo)本獲取與固定

野外采集底質(zhì)，為獲得小型個(gè)體和早期生命階段的各種底棲無(wú)脊椎動(dòng)物使用60目標(biāo)準(zhǔn)篩洗凈樣品[6]，僅為獲得大型底棲無(wú)脊椎動(dòng)物使用40目標(biāo)準(zhǔn)篩洗凈樣品，經(jīng)專(zhuān)業(yè)知識(shí)人員挑揀其中的底棲動(dòng)物裝入樣本瓶(PET、PP材質(zhì))，用80%乙醇溶液初步固定，固定液分多次加入并晃動(dòng)樣本瓶，保證標(biāo)本從麻醉到固定，否則將因劇烈脫水導(dǎo)致標(biāo)本破壞，固定后液面必須沒(méi)過(guò)標(biāo)本最高處1倍。當(dāng)挑揀中存在大個(gè)體軟體動(dòng)物時(shí)，需單獨(dú)存放，最好以10%福爾馬林(4%甲醛)溶液固定，固定液面沒(méi)過(guò)標(biāo)本最高處；如加入80%乙醇溶液固定，則固定后液面必須沒(méi)過(guò)標(biāo)本最高處1倍。

75%乙醇溶液因其滲透性強(qiáng)和吸收蛋白質(zhì)水分的原因，使得生物細(xì)胞脫水變性達(dá)到殺菌目的，進(jìn)而保存標(biāo)本；10%福爾馬林(4%甲醛)溶液因能很快與蛋白質(zhì)反應(yīng)變性達(dá)到殺菌目的，同時(shí)將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換為可阻止標(biāo)本腐爛的不溶性樹(shù)脂，進(jìn)而保存標(biāo)本[7]。但兩者在使用中，由于標(biāo)本挑揀時(shí)不可避免地帶入少量水分和生物個(gè)體含水率高的原因，使得固定液濃度在加入時(shí)就會(huì)下降，而受兩種固定液固定標(biāo)本原理的不同，初次添加的固定液以80%乙醇溶液和10%福爾馬林(4%甲醛)溶液為宜。在配置固定液前必須檢視乙醇原液和甲醛原液，原液純度達(dá)工業(yè)級(jí)以上，但液體必須清澈透亮，不能存在沉淀或雜質(zhì)。特別是甲醛原液，高濃度甲醛原液在低溫下會(huì)形成乳白色固體沉淀，剩下溶液實(shí)際為含甲醛極少的水[8]，萬(wàn)不可棄去沉淀后做原液使用。配置固定液所使用的水干凈清澈，不苛求去離子水或純凈水。配置好的乙醇溶液易揮發(fā)，甲醛溶液對(duì)人體有害，均需密封保藏且盡快使用。

如標(biāo)本需進(jìn)行DNA條形碼識(shí)別時(shí)，需以無(wú)水乙醇(分析純及以上)保存，使用5 ℃已冷卻24 h以上的無(wú)水乙醇保存最佳，可提取含雜質(zhì)較少的DNA。

2.2 標(biāo)本初步篩選

在標(biāo)本固定后1～3 d由分類(lèi)人員將標(biāo)本進(jìn)行初步篩選，剔除挑揀時(shí)帶出的雜質(zhì)，將大小差異較大的標(biāo)本分開(kāi)存放，并置換同濃度的新固定液。在篩選過(guò)程中對(duì)顏色不同的底棲動(dòng)物予以記錄，可文字記錄或直接拍照留存。需進(jìn)行DNA條形碼識(shí)別的標(biāo)本，初次置換下的無(wú)水乙醇保存液需置于5 ℃低溫并做好記錄。

2.3 標(biāo)本分類(lèi)鑒定

由受訓(xùn)后的形態(tài)學(xué)分類(lèi)人員對(duì)獲得的標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒定，需參考現(xiàn)有已發(fā)表的文字、圖片、影像資料和自然歷史博物館的館藏憑證標(biāo)本，分類(lèi)完成時(shí)按各自的門(mén)、綱、目、科、屬、種進(jìn)行歸類(lèi)，盡可能分類(lèi)至屬、種級(jí)別，但必須保證準(zhǔn)確有依據(jù)，單個(gè)結(jié)果由分析人員、審核人員共同作出。淡水底棲動(dòng)物主要包括軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca)、環(huán)節(jié)動(dòng)物門(mén)(Annelida)、節(jié)肢動(dòng)物門(mén)(Arthropoda)、扁形動(dòng)物門(mén)(Platyhelminthes)、線形動(dòng)物門(mén)(Nematomorpha)、線蟲(chóng)動(dòng)物門(mén)(Nematoda)、紐形動(dòng)物門(mén)(Nemertea)等。

2.4 標(biāo)本圖片拍攝

對(duì)已完成形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒定的標(biāo)本，依照整體照、特征照的形式，對(duì)每個(gè)標(biāo)本拍攝不少于2張標(biāo)本圖片，要求能全面反映標(biāo)本的形態(tài)特征，照片與標(biāo)本相對(duì)應(yīng)。

2.5 標(biāo)本DNA條形碼信息

需DNA條形碼識(shí)別的標(biāo)本使用無(wú)菌剪、無(wú)菌手術(shù)刀片獲取動(dòng)物組織：昆蟲(chóng)、甲殼動(dòng)物取足部，環(huán)節(jié)動(dòng)物、軟體動(dòng)物、扁形動(dòng)物取身體軟組織(避開(kāi)消化道)，如個(gè)體實(shí)在太小(如部分搖蚊幼蟲(chóng))，則選取完整個(gè)體，用純水和75%乙醇溶液分別清洗取出的身體組織約5 mg，保證無(wú)雜質(zhì)、無(wú)污染[9]。如所獲取的標(biāo)本DNA條形碼信息非供初建標(biāo)本庫(kù)使用，可用初次置換下的無(wú)水乙醇保存液做提取DNA的材料。接著進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增與產(chǎn)物電泳、基因序列測(cè)定分析以獲得標(biāo)本DNA條形碼信息。

2.6 鑒定完畢標(biāo)本制作與記錄

生物標(biāo)本主要有剝制標(biāo)本、浸制標(biāo)本、干制標(biāo)本和玻片標(biāo)本等類(lèi)型，環(huán)境生物監(jiān)測(cè)底棲無(wú)脊椎動(dòng)物標(biāo)本保存、利用以浸制標(biāo)本為主，以干制標(biāo)本及玻片標(biāo)本為輔。鑒定完畢后大型軟體動(dòng)物外殼滅菌晾干制成干制標(biāo)本；需用顯微鏡觀察的可制成以加拿大樹(shù)膠封片的玻片標(biāo)本；其余均可制成浸制標(biāo)本。浸制標(biāo)本制作時(shí)需先對(duì)底棲動(dòng)物用去離子水清洗，洗去固化的體液及雜質(zhì)殘留，再將較大的底棲動(dòng)物裝入大口密封盒，將較小的其他動(dòng)物標(biāo)本放入透明玻璃制螺紋口標(biāo)本瓶中，加入80%乙醇溶液或5%福爾馬林(2%甲醛)溶液。配置保存液的原液以工業(yè)級(jí)純度及以上為佳，水以去離子水及以上為佳，以免形成少量絮狀沉淀。標(biāo)本容器材質(zhì)以硅硼玻璃、有機(jī)玻璃為佳，蓋上107硅橡膠[10]或泡沫硅橡膠為內(nèi)襯的塑料密封蓋，塑料密封蓋需良好的抗化學(xué)物質(zhì)性，一般PET、PP材質(zhì)均可。標(biāo)本容器大小可依據(jù)標(biāo)本大小定制，常用大口密封盒為1～3 L容積，螺紋口標(biāo)本瓶為20～50 mL容積，固定液面不低于容積的3/4。

干制標(biāo)本的外殼、玻片標(biāo)本的玻片、浸制標(biāo)本的標(biāo)本瓶外均需貼制標(biāo)簽，詳細(xì)記錄標(biāo)本信息：標(biāo)本編號(hào)、物種名稱(chēng)、拉丁文名稱(chēng)、標(biāo)本性別、采集地點(diǎn)、采集日期、保存介質(zhì)、鑒定人員、制作標(biāo)本機(jī)構(gòu)名稱(chēng)。進(jìn)行DNA條形碼識(shí)別的標(biāo)本增加相應(yīng)二維碼標(biāo)識(shí)，表明其特征DNA序列。

完成標(biāo)本制作后，填寫(xiě)記錄：標(biāo)本圖片、標(biāo)本實(shí)物、鑒定記錄都一一對(duì)應(yīng)。

2.7 標(biāo)本審核

對(duì)已制作完成的標(biāo)本，執(zhí)行標(biāo)本審核：先由受過(guò)底棲動(dòng)物分類(lèi)鑒定訓(xùn)練而非鑒定者本人復(fù)核，再由經(jīng)驗(yàn)豐富的底棲動(dòng)物分類(lèi)鑒定主管或科研院所相關(guān)專(zhuān)家審核標(biāo)本制作、標(biāo)本信息是否正確完整，審核完成后，在相關(guān)證明材料上簽字。如審核出現(xiàn)疑問(wèn)的標(biāo)本，可先置于暫存柜，待累積到一定量后，請(qǐng)相關(guān)權(quán)威專(zhuān)家甄別做出審核意見(jiàn)，根據(jù)意見(jiàn)最終完成標(biāo)本審核。

2.8 標(biāo)本入庫(kù)、展示與維護(hù)保養(yǎng)

對(duì)審核完成的標(biāo)本進(jìn)行入庫(kù)，按照標(biāo)本柜中已經(jīng)分區(qū)的動(dòng)物類(lèi)別上架，同時(shí)將文本資料、電子資料歸檔，交由檔案管理部門(mén)統(tǒng)一管理。

對(duì)已入庫(kù)的標(biāo)本可用作展示，主要以標(biāo)本柜為整體進(jìn)行，標(biāo)本柜分區(qū)可對(duì)不同物種進(jìn)行展示，大型軟體動(dòng)物展示效果較好；其他動(dòng)物可以將個(gè)體與顯微鏡照片對(duì)應(yīng)，在標(biāo)本展示區(qū)設(shè)置顯示屏，通過(guò)標(biāo)號(hào)一一調(diào)用其顯微鏡照片，保證科學(xué)性、直觀性。

實(shí)體標(biāo)本入庫(kù)時(shí)保證完好，應(yīng)先對(duì)保存柜需先進(jìn)行一次清潔后移入標(biāo)本瓶。實(shí)體標(biāo)本保存房間保持可通風(fēng)，室溫(20±5) ℃，濕度小于70%，避免陽(yáng)光直射，每3個(gè)月檢視標(biāo)本，固定液減少的添加至原有量，如甲醛溶液因生成仲甲醛而渾濁，乙醇溶液出現(xiàn)發(fā)黃的情況，必須更換原固定液。此外，還需進(jìn)行防塵措施，可設(shè)置防塵緩沖帶和定期對(duì)標(biāo)本瓶外進(jìn)行擦拭以除塵，同時(shí)對(duì)地面塵土進(jìn)行清掃，確保無(wú)塵。標(biāo)本在搬運(yùn)后易出現(xiàn)受損，需及時(shí)維護(hù)到位[11]。

2.9 參考標(biāo)本

為確認(rèn)分類(lèi)鑒定結(jié)果，所有鑒定出的實(shí)物樣品均可作為參考標(biāo)本。單個(gè)點(diǎn)位的參考標(biāo)本需一一記錄，標(biāo)本庫(kù)、暫存柜內(nèi)單個(gè)點(diǎn)位的標(biāo)本信息都需以單獨(dú)的報(bào)表或表格登記，明確：采集地點(diǎn)、采集日期、采樣量、物種名稱(chēng)、學(xué)名、門(mén)類(lèi)、樣品編號(hào)、固定劑成分、鑒定日期、個(gè)體數(shù)量(個(gè))、個(gè)體質(zhì)量(g)、個(gè)體密度(個(gè)/m2)、生物量(g/m2)、鑒定日期、鑒定人員、復(fù)核人員、審核人員。保存方法與一般標(biāo)本相同。參考標(biāo)本確認(rèn)的有關(guān)要求包括：

(1) 參考標(biāo)本的確認(rèn)可進(jìn)行同行評(píng)議，但最終確認(rèn)必須由底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定顧問(wèn)組2～3專(zhuān)家鑒定簽字確認(rèn)，顧問(wèn)組專(zhuān)家為國(guó)內(nèi)大型底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定公認(rèn)的知名專(zhuān)家，不同的人僅負(fù)責(zé)自己的專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域。

(2) 參考標(biāo)本的確認(rèn)具體進(jìn)行如下工作：① 對(duì)制作單位提出的物種鑒定報(bào)告(須闡述鑒定的主要依據(jù))提出質(zhì)詢(xún)。② 判斷待審侯選參考標(biāo)本的鑒定是否正確，確認(rèn)相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室對(duì)該物種的分類(lèi)鑒定能力。③ 判斷待審侯選參考標(biāo)本的主要特征是否典型鮮明，具有普遍性和代表性，是否適合作為參考標(biāo)本。④ 評(píng)估待審侯選參考標(biāo)本的完好性及質(zhì)量，判斷其是否適合作為參考標(biāo)本。⑤ 專(zhuān)家間產(chǎn)生異議，意見(jiàn)不能統(tǒng)一的，以不通過(guò)定論。⑥ 對(duì)意見(jiàn)一致的待審侯選參考標(biāo)本出具參考標(biāo)本鑒定結(jié)果報(bào)告，簽字確認(rèn)。

(3) 必要時(shí)，可咨詢(xún)專(zhuān)家給出相應(yīng)物種分類(lèi)鑒定的方法，經(jīng)驗(yàn)及注意事項(xiàng)等。

2.10 憑證標(biāo)本(模式標(biāo)本)

憑證標(biāo)本是一類(lèi)受權(quán)威專(zhuān)家認(rèn)可、個(gè)體特征明顯、DNA信息明確、標(biāo)本保存完好、記錄完整、需永久保存的實(shí)物標(biāo)本，又稱(chēng)模式標(biāo)本，包括物種發(fā)現(xiàn)時(shí)的正模標(biāo)本、副模標(biāo)本和配模標(biāo)本，但又不局限于物種發(fā)現(xiàn)時(shí)的這幾類(lèi)稀有標(biāo)本。這類(lèi)標(biāo)本可以幫助確認(rèn)其種類(lèi)的特征，也能幫助確認(rèn)新物種的發(fā)現(xiàn)和已知物種的新記錄。所有的憑證標(biāo)本必須在管理部門(mén)、相關(guān)組織機(jī)構(gòu)登記，單獨(dú)保存，單獨(dú)建卡，保存等級(jí)遠(yuǎn)高于一般標(biāo)本，每次維護(hù)保養(yǎng)均需涉及并仔細(xì)檢查，標(biāo)本出現(xiàn)問(wèn)題需及時(shí)處理并將情況公告、上報(bào)。一般來(lái)說(shuō)，普通實(shí)驗(yàn)室的普通人員要接觸到憑證標(biāo)本的可能性小，因此，環(huán)境監(jiān)測(cè)生物實(shí)驗(yàn)室必須建立自己的參考標(biāo)本和參考標(biāo)本庫(kù)。

2.11 樣地標(biāo)本

樣地標(biāo)本是按固定或不固定時(shí)間間隔采集典型樣地的樣品，經(jīng)分類(lèi)鑒定、計(jì)量統(tǒng)計(jì)后獲得，樣地標(biāo)本標(biāo)識(shí)典型樣地、采樣時(shí)間、采樣人員、固定劑成分、已鑒定生物名稱(chēng)及表格(包括學(xué)名)、鑒定日期、鑒定人員等，以浸制標(biāo)本、玻片標(biāo)本、干制標(biāo)本等形式，按典型樣地-采樣時(shí)間-生物類(lèi)型等要素分類(lèi)保存，樣地標(biāo)本為永久保藏標(biāo)本，應(yīng)盡量避免損壞，可從中取樣進(jìn)行研究利用。

2.12 標(biāo)本錄入、查詢(xún)與調(diào)用

標(biāo)本電子數(shù)據(jù)同實(shí)物一同入庫(kù)，數(shù)據(jù)資料在輸入后需經(jīng)復(fù)核、審核，妥善歸檔保存，從而可以進(jìn)行數(shù)據(jù)查詢(xún)和用作水生態(tài)健康管理的原始數(shù)據(jù)予以調(diào)用。

3 底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的管理制度

3.1 底棲動(dòng)物標(biāo)本出入庫(kù)管理制度

(1) 底棲動(dòng)物標(biāo)本入庫(kù)時(shí)經(jīng)制作、復(fù)核、審核后方可入庫(kù)，登記為參考標(biāo)本的單獨(dú)記錄并歸檔，登記為憑證標(biāo)本的除單獨(dú)記錄和歸檔外還需環(huán)境管理部門(mén)登記。所有標(biāo)本供本區(qū)域范圍生態(tài)環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)、生物多樣性保護(hù)規(guī)劃參照和歷史比對(duì)、科研分析和交流、科普活動(dòng)和展覽等項(xiàng)目使用。

(2) 僅在本單位調(diào)用參考標(biāo)本時(shí)，需做好登記：使用標(biāo)本目的、出庫(kù)時(shí)間、歸還時(shí)間、有無(wú)損壞、經(jīng)手人簽名等信息；當(dāng)外單位調(diào)用參考標(biāo)本時(shí)，向本單位做出使用標(biāo)本目的、出庫(kù)時(shí)間、歸還時(shí)間、標(biāo)本由何人何地進(jìn)行使用的說(shuō)明，單位審批同意后即可外借，同時(shí)內(nèi)部也需做好登記。

(3) 憑證標(biāo)本為科研項(xiàng)目的實(shí)施和運(yùn)行提供基礎(chǔ)的支撐、保障作用[12]。其調(diào)用必須向管理部門(mén)、相關(guān)組織機(jī)構(gòu)報(bào)批，同意后方可進(jìn)行操作，并將使用標(biāo)本目的、出庫(kù)時(shí)間、歸還時(shí)間、標(biāo)本由何人何地進(jìn)行使用出具詳細(xì)書(shū)面說(shuō)明，經(jīng)單位審核后方可外借，同時(shí)在實(shí)施過(guò)程中應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況制定細(xì)則。

(4) 底棲動(dòng)物標(biāo)本出庫(kù)后歸還入庫(kù)時(shí)，需要工作人員、管理人員認(rèn)真檢查，保證無(wú)破損、無(wú)遺失[13]。如有破損或遺失情況，應(yīng)及時(shí)上報(bào)并追究出借方責(zé)任，同時(shí)標(biāo)本庫(kù)人員需盡可能對(duì)標(biāo)本進(jìn)行保養(yǎng)修復(fù)。

應(yīng)構(gòu)建長(zhǎng)效性扶持機(jī)制，項(xiàng)目支持不只局限于前期建設(shè)階段，也應(yīng)向中后期運(yùn)行階段延伸。加大政策扶持力度，提高項(xiàng)目資金補(bǔ)助標(biāo)準(zhǔn)，補(bǔ)貼應(yīng)盡可能彌補(bǔ)秸稈收儲(chǔ)人工和運(yùn)輸成本，提高秸稈利用主體積極性。實(shí)行區(qū)別化補(bǔ)貼和獎(jiǎng)勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)，引導(dǎo)產(chǎn)業(yè)發(fā)展向技術(shù)含量高、附加值高的利用方向發(fā)展。拓寬政策扶持廣度，降低項(xiàng)目申報(bào)門(mén)檻，盡可能讓政策惠及每一個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈主體，最大限度調(diào)動(dòng)各方面積極性。政府部門(mén)需密切協(xié)作、形成合力，在財(cái)政、稅收、土地等各方面完善政策優(yōu)惠體系，通過(guò)完善利益鏈驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展，最終形成以政策為導(dǎo)向、企業(yè)為主體、農(nóng)民廣泛參與的秸稈綜合利用長(zhǎng)效機(jī)制。

3.2 底棲動(dòng)物標(biāo)本保藏管理制度

(1) 底棲動(dòng)物標(biāo)本保存房間應(yīng)建立專(zhuān)人負(fù)責(zé)制，指定工作人員和管理人員，每3個(gè)月對(duì)標(biāo)本保存情況、保存設(shè)施檢查記錄并進(jìn)行保養(yǎng)維護(hù)。具備滅火設(shè)施和影像監(jiān)控，保證房間安全，每周對(duì)房間進(jìn)行打掃、通風(fēng)，做好記錄。

(2) 底棲動(dòng)物標(biāo)本保存房間需具備溫濕度調(diào)控器、溫濕度計(jì)或在線溫濕度監(jiān)控，并按時(shí)進(jìn)行記錄，室溫保持(20±5) ℃，濕度小于70%，避免陽(yáng)光直射。

(3) 每3個(gè)月檢視實(shí)體標(biāo)本和電子數(shù)據(jù)，出現(xiàn)保存液渾濁變色、標(biāo)簽脫落或字跡不清、標(biāo)本瓶密封問(wèn)題或損壞、電子運(yùn)行故障時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換、修復(fù)、備份，保證其正常。

4 底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的質(zhì)量控制

4.1 人員質(zhì)控

涉及底棲動(dòng)物項(xiàng)目所有人員需納入單位人員管理程序統(tǒng)一管理，參與底棲動(dòng)物分類(lèi)鑒定和底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)工作的人員，必須由技術(shù)管理部門(mén)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)，具備相應(yīng)資格和經(jīng)驗(yàn)，具有對(duì)結(jié)果做出正確判斷能力和熟知質(zhì)量要求的人員方可上崗。

實(shí)驗(yàn)室底棲動(dòng)物方向技術(shù)管理者應(yīng)為獲得在底棲動(dòng)物研究范圍內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可與計(jì)量認(rèn)證成員，并具有生物專(zhuān)業(yè)或底棲動(dòng)物研究專(zhuān)業(yè)密切相關(guān)的本科以上學(xué)歷和5年以上底棲動(dòng)物研究專(zhuān)業(yè)相關(guān)的工作經(jīng)歷。

建立省級(jí)底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定專(zhuān)家組及顧問(wèn)組，專(zhuān)家組由省內(nèi)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心有10年以上大型底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定經(jīng)驗(yàn)、高級(jí)工程師職稱(chēng)以上的專(zhuān)家組成，顧問(wèn)組由國(guó)內(nèi)外大型底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定知名專(zhuān)家組成。專(zhuān)家組作為底棲無(wú)脊椎動(dòng)物分類(lèi)鑒定QA/QC的管理的執(zhí)行機(jī)構(gòu)，省級(jí)質(zhì)量管理相關(guān)部門(mén)定期組織專(zhuān)家組對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培訓(xùn)、考核、質(zhì)量檢查、同行評(píng)議、實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)及能力驗(yàn)證等工作。顧問(wèn)組作為咨詢(xún)機(jī)構(gòu)提供參考標(biāo)本最終確認(rèn)等咨詢(xún)服務(wù)。每2～3年，必須接受與底棲動(dòng)物研究相關(guān)的一次培訓(xùn)或一次會(huì)議，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室資料應(yīng)保持隨時(shí)更新。同時(shí)相關(guān)的培訓(xùn)、參會(huì)和資料更新需予以留檔備查。

4.2 器材質(zhì)控

涉及底棲動(dòng)物項(xiàng)目所用器材需納入單位儀器設(shè)備管理程序統(tǒng)一管理，對(duì)儀器設(shè)備使用、維修、保養(yǎng)、報(bào)廢進(jìn)行有效控制，所有的儀器設(shè)備均有明顯標(biāo)識(shí)表明其狀態(tài)，對(duì)結(jié)果有影響的采樣設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，均需加以唯一性標(biāo)識(shí)。

底棲動(dòng)物室內(nèi)研究使用的顯微鏡包括體視顯微鏡和正置顯微鏡兩種，攜帶測(cè)微尺和拍照功能為佳，稱(chēng)重所用天平為萬(wàn)分之一天平。需對(duì)顯微鏡、天平定期維護(hù)保養(yǎng)保持性能良好，并做好使用記錄、維護(hù)保養(yǎng)記錄、使用期間核查記錄、修理記錄等。

保存底棲動(dòng)物的保存容器保證密封、堅(jiān)固、具良好的抗化學(xué)物質(zhì)性，存放底棲動(dòng)物的房間保持可通風(fēng)，室溫20±5℃，濕度小于70%，避免陽(yáng)光直射，存放情況需予以記錄。

4.3 標(biāo)本質(zhì)控

底棲動(dòng)物實(shí)體標(biāo)本制作和電子資料制作均需符合生物實(shí)驗(yàn)室底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的相關(guān)要求，實(shí)施質(zhì)量控制可采用(但不限于)以下方式：

(1) 定期使用參考標(biāo)本、憑證標(biāo)本對(duì)不同分類(lèi)級(jí)別進(jìn)行標(biāo)本制作內(nèi)部質(zhì)量控制。

① 準(zhǔn)確度控制。將多個(gè)不同門(mén)、綱、目、科的參考標(biāo)本混合制成定量標(biāo)本，控制分類(lèi)級(jí)別為門(mén)、綱、目、科的底棲動(dòng)物分類(lèi)準(zhǔn)確度；將多個(gè)不同屬、種的參考標(biāo)本不同分類(lèi)特征部位制成概念標(biāo)本，控制分類(lèi)級(jí)別為屬、種的底棲動(dòng)物分類(lèi)準(zhǔn)確度[14]，以公式計(jì)算正確率，控制限為80%，高于此限判為合格；

② 雙樣精密度控制[15]。將某種憑證標(biāo)本和同種的參考標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比觀察，分別描述其分類(lèi)特征的區(qū)別，描述后確認(rèn)其偏差。但標(biāo)本特征不同于理化數(shù)值，不同人員描述均會(huì)產(chǎn)生不同程度的偏差，故有時(shí)也在物種雙名法定名人名字后，添加不同描述人名字予以標(biāo)注，甚至一些新種、亞種的發(fā)現(xiàn)也離不開(kāi)多次描述。精密度僅控制學(xué)術(shù)上公認(rèn)的核心特征，雙樣對(duì)比描述相對(duì)偏差容許值應(yīng)為10%，低于此限判為合格：

式中：X1為憑證標(biāo)本核心特征數(shù)；X2為同種參考標(biāo)本核心特征數(shù)。

(2) 參加同一標(biāo)本不同實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)和能力驗(yàn)證活動(dòng)。

(3) 監(jiān)控同一人員不同標(biāo)本分析制作能力及不同人員對(duì)同一標(biāo)本分析制作能力[16]。

(4) 同一標(biāo)本形態(tài)學(xué)分類(lèi)和DNA條形碼監(jiān)測(cè)結(jié)果比對(duì)分析。

(5) 定期監(jiān)控、審核電子資料，比對(duì)國(guó)內(nèi)外發(fā)表的論文、網(wǎng)站資料與實(shí)體標(biāo)本情況，更新完善電子資料。

4.4 記錄質(zhì)控

涉及底棲動(dòng)物項(xiàng)目所用記錄需納入單位記錄控制程序統(tǒng)一管理，對(duì)記錄的識(shí)別、收集、索引、使用、存檔、維護(hù)和處置進(jìn)行有效控制。

底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)記錄需質(zhì)量記錄和技術(shù)記錄，質(zhì)量記錄有標(biāo)本庫(kù)內(nèi)部審核記錄和標(biāo)本庫(kù)管理體系文件控制記錄；技術(shù)記錄有標(biāo)本采樣分析記錄、標(biāo)本審核記錄、標(biāo)本保存記錄、標(biāo)本庫(kù)流轉(zhuǎn)記錄、參考標(biāo)本檔案記錄、憑證標(biāo)本檔案記錄、人員培訓(xùn)考核記錄、實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)和能力驗(yàn)證記錄、儀器設(shè)備使用維護(hù)運(yùn)行記錄、標(biāo)本質(zhì)量控制評(píng)審記錄。

5 結(jié)論和展望

本文以環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)底棲動(dòng)物的分類(lèi)鑒定和標(biāo)本制作多年經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，詳細(xì)介紹從底棲動(dòng)物標(biāo)本獲取到研究獲得的所有信息，以及這些信息的保存、利用、流轉(zhuǎn)的各個(gè)步驟和對(duì)其進(jìn)行的質(zhì)量控制手段，為獲得真實(shí)、詳細(xì)、準(zhǔn)確、易用的底棲動(dòng)物數(shù)據(jù)做出探索，同時(shí)為豐富和規(guī)范底棲動(dòng)物資源庫(kù)，保護(hù)和宣傳底棲動(dòng)物多樣性做貢獻(xiàn)。

底棲動(dòng)物標(biāo)本庫(kù)的建立對(duì)底棲動(dòng)物的研究、標(biāo)本交流、多樣性發(fā)展有意義重大，在學(xué)校及科研院所展開(kāi)對(duì)其形態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)的研究，可以闡明生物分布、進(jìn)化、交流的各種信息；在環(huán)境監(jiān)測(cè)、水文水利等政府部門(mén)展開(kāi)對(duì)其分布情況的研究，可以闡明環(huán)境污染情況和環(huán)境保護(hù)需要對(duì)應(yīng)的方向，同時(shí)進(jìn)行系統(tǒng)內(nèi)的質(zhì)控和技術(shù)培訓(xùn)；在博物館、資源中心、科教館展開(kāi)對(duì)其收集、維護(hù)、展出，可以達(dá)到對(duì)公眾的教育科普。未來(lái)更可以綜合以上部門(mén)的需求，讓同一標(biāo)本發(fā)揮其不同功能，甚至與世界大型博物館的標(biāo)本進(jìn)行交流，使得標(biāo)本庫(kù)與國(guó)際接軌。