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(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，江蘇 泰州 225300； 2.上海瑞鵬寵物醫(yī)院有限公司宜川路分公司，上海 靜安區(qū) 200040； 3.亳州汽車工業(yè)學(xué)校，安徽 蒙城 233500)

0 引言

禽大腸桿菌病是由禽致病性大腸桿菌感染引起的一類細(xì)菌性傳染病。該病可引起禽類的肝周炎、氣囊炎、心包炎、輸卵管炎和腹膜炎等，并導(dǎo)致不同程度的死亡率。做好禽大腸桿菌病的防控工作，對(duì)于保障養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。

1 發(fā)病情況

某雞場(chǎng)存欄蛋雞約15 200只，在290日齡開始呈現(xiàn)持續(xù)發(fā)病和死亡現(xiàn)象。2周后，產(chǎn)蛋率較發(fā)病前現(xiàn)下降約31%，發(fā)病率為10.7%，死亡率為2.13%。

2 癥狀及剖檢病變

病雞精神沉郁，羽毛粗亂無(wú)光，呼吸困難，采食、飲水減少或廢絕。腹瀉，排黃白色稀薄糞便。部分病雞后腹部明顯脹大下垂，蹲伏少動(dòng)，有的較快死亡，也有的拖延很久，消瘦衰弱致死。剖檢嚴(yán)重或死亡病雞，見腹腔中充滿淡黃色腥臭的液體和凝固的卵黃碎塊。腹腔器官相互粘連，輸卵管黏膜發(fā)炎，有針尖狀出血點(diǎn)和淡黃色纖維素性滲出物沉著，輸卵管腔中有黃白色纖維素性凝塊。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 組織觸片鏡檢

無(wú)菌采集2只病雞的肝組織進(jìn)行觸片、瑞氏染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)存在中等大小的桿菌。

3.2 病原菌的分離培養(yǎng)

無(wú)菌采集雞病變的肝或心組織，于麥康凱瓊脂平板上劃線分離，37℃培養(yǎng)24 h后觀察菌落生長(zhǎng)情況。結(jié)果見麥康凱瓊脂平板上存在中等大小、表面光滑、濕潤(rùn)的紅色菌落(見圖1)。

圖1 麥康凱瓊脂平板分離結(jié)果

挑取中等大小、表面光滑、濕潤(rùn)的紅色菌落接種于普通瓊脂平板進(jìn)行純培養(yǎng)；挑取單個(gè)菌落涂片、染色鏡檢。結(jié)果分離菌是革蘭氏陰性中等大小的桿菌(見圖2)。

圖2 革蘭氏染色結(jié)果

3.3 細(xì)菌生化鑒定

挑取普通瓊脂平板上的純培養(yǎng)物進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)，結(jié)果呈陰性(見圖3)；接著進(jìn)行腸桿菌科編碼鑒定系統(tǒng)規(guī)定的葡萄糖發(fā)酵及賴氨酸脫羧酶及鳥氨酸脫羧酶等11項(xiàng)常規(guī)生化反應(yīng)，結(jié)果：葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣試驗(yàn)陽(yáng)性、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性、H2S試驗(yàn)陰性、吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性、乳糖發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性、衛(wèi)矛醇分解試驗(yàn)陰性、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陰性、脲酶試驗(yàn)陰性、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)陰性(見圖4)。根據(jù)氧化酶試驗(yàn)及常規(guī)生化反應(yīng)的結(jié)果，本次的分離菌鑒定為大腸桿菌。

圖3 氧化酶試驗(yàn)

圖4 常規(guī)生化反應(yīng)11項(xiàng)

3.4 致病性試驗(yàn)

取營(yíng)養(yǎng)瓊脂純培養(yǎng)物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯，37℃培養(yǎng)18 h，腹腔接種小白鼠，0.2 mL/只[1]；對(duì)照組小白鼠腹腔接種無(wú)菌生理鹽水，0.2 mL/只。在12～36 h內(nèi)觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小白鼠存活情況。結(jié)果大腸桿菌分離菌能夠?qū)е滦“资蠼臃N后24 h左右發(fā)病死亡。剖檢死亡小白鼠，取其臟器，用麥康凱瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離，發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)特性及形態(tài)染色結(jié)果均符合大腸桿菌的生物學(xué)特性。

根據(jù)臨床癥狀、剖檢病變及實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，診斷該蛋雞群存在致病性大腸桿菌引起的大腸桿菌病。

4 治療

使用10%的鹽酸多西環(huán)素可溶性粉，混飲，300 mg/L水，連用5 d。同時(shí)，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好衛(wèi)生消毒工作。通過(guò)采取以上措施，1周后雞群基本恢復(fù)正常。

5 分析與討論

5.1 雞大腸桿菌病的病原

雞致病性大腸桿菌是雞大腸桿菌病的病原，可通過(guò)多種途徑感染不同品種、日齡的雞，引發(fā)雞的急性敗血癥、肝周炎、心包炎及卵黃性腹膜炎等多種癥狀。常常采用麥康凱或若伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基進(jìn)行分離，大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上則形成紫黑色帶金屬光澤的菌落。使用生化試驗(yàn)可以鑒定分離菌是否為大腸桿菌，借助于動(dòng)物致病性試驗(yàn)，可以鑒定出分離的大腸桿菌是否具有致病性。

5.2 雞大腸桿菌病的藥物治療

最好根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇敏感度比較高的抗菌藥物進(jìn)行治療。本次雞場(chǎng)大腸桿菌病的治療藥物選擇沒有進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，但是根據(jù)調(diào)查了解該雞場(chǎng)近2年沒有發(fā)生過(guò)雞大腸桿菌病，而且長(zhǎng)時(shí)間沒有使用過(guò)土霉素類抗菌藥物，于是嘗試性選擇多西環(huán)素進(jìn)行治療，若用藥3 d后沒有明顯的療效，需要及時(shí)更換藥物，或者盡早進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

5.3 免疫接種

疫苗是有效預(yù)防雞大腸桿菌病的重要方法之一。因?yàn)榇竽c桿菌血清型眾多，不同血清型大腸桿菌疫苗間的交叉保護(hù)性較低。所以，在選擇疫苗時(shí)，應(yīng)根據(jù)雞場(chǎng)當(dāng)前流行的血清類型而定。本次雞大腸桿菌分離株將進(jìn)一步進(jìn)行血清型鑒定，為制作菌苗奠定基礎(chǔ)。目前，國(guó)內(nèi)外研制的預(yù)防大腸桿菌的疫苗在質(zhì)量、安全性和免疫效果等方面存在一定的缺陷，還有待提高[2]。