劉純岳，林帝金，方俊粵，梁潔滿，勞偉思，林向華

(1.中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院檢驗科，廣州 510120；2.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗科，廣州 510220)

α-L-巖藻糖苷酶(α-L-fucosidase，AFU)是一種溶酶體酸性水解酶，參與含α-L-巖藻糖的糖脂、糖蛋白、糖苷等糖復(fù)合物的水解。眾多研究證實AFU是診斷肝癌的標志酶，可作為原發(fā)性肝癌診斷、療效和預(yù)后的重要監(jiān)測指標[1]。近年來關(guān)于血清AFU水平變化和臨床意義的研究也日益增多，但關(guān)于AFU參考區(qū)間的調(diào)查與建立的研究尚少。在臨床實際工作中，參考區(qū)間(reference intervals，RI)是結(jié)果解釋的有用工具，也是實驗室報告的重要組成部分[2]。但臨床檢驗項目往往會受多種因素的影響，如種族、性別、年齡、地域等[3]，從而導(dǎo)致參考區(qū)間的不同。因此，本研究參照美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)和國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(IFCC)共同修訂的指南《臨床實驗室如何確定和建立生物參考區(qū)間，批準指南-第三版，EP28-A3c》[4]的相關(guān)要求，建立健康成年人的血清AFU參考區(qū)間，為臨床合理應(yīng)用血清AFU提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 依據(jù)美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)和國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(IFCC)共同修訂的指南《臨床實驗室如何確定和建立生物參考區(qū)間，批準指南-第三版，EP28-A3c》文件和中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T402-2012文件[5]，按照分層整群隨機抽樣的原則，從中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院體檢中心隨機抽取2017年4～10月進行全面健康體檢的成年人480例，男性和女性各240例，其中青年組(18～44歲)，中年組(45～59歲)和老年組(≥60歲)各160例，各個年齡組再按性別分組。①納入標準：生化、免疫、血液實驗室檢查均在正常范圍；內(nèi)科體格檢查正常；B超、X光、心電圖檢查正常；無吸煙嗜酒不良嗜好；近期無手術(shù)、藥物治療及住院治療史；無家族遺傳病史的男女個體，其中女性為非妊娠、哺乳、月經(jīng)期；②排除標準[6]：孕婦，哺乳期及月經(jīng)期女性；腦、肺、腎、胰等器官病變；原發(fā)性肝癌、轉(zhuǎn)移性肝癌、先天性肝囊腫和其他良性肝占位病變、急慢性肝炎、肝硬化、腹腔積液；糖尿病、甲狀腺機能亢進、白血病；非肝膽系統(tǒng)腫瘤(胃癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、卵巢癌等)。收集同期中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院消化內(nèi)科、肝膽外科確診為原發(fā)性肝癌的患者119例作為病例組，其中男性91例，女性28例，年齡24～82歲。

1.2 儀器與試劑 采用AU5800全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特有限公司)和中國四川邁克生物科技股份有限公司配套試劑、配套校準液、配套2水平質(zhì)控品。

1.3 研究方法 采用CNPF底物法測定血清AFU，樣本測定前先對儀器進行定標，采用Westgard多規(guī)則進行室內(nèi)質(zhì)控，2015年～2017年度累計變異系數(shù)(change value，CV)<5%。按照WS/T402-2012文件的要求，通過1/3規(guī)則進行判斷，將疑似離群值的檢測結(jié)果和其相鄰值的差(D)和數(shù)據(jù)全距(R)相除，若D/R≥1/3考慮為離群值，應(yīng)將其剔除，并需補足數(shù)據(jù)。實驗數(shù)據(jù)中存在2個疑似離群點。其中最小的一個值(6.5 U/L)與其相鄰點的D為1.8，R為49，D/R=0.04 <1/3，同理，最大的一個值(55.5 U/L)，算得D/R<1/3，故不認為該兩個點為離群點，因而保留所有測定數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.2 各年齡組的AFU結(jié)果比較 青年組(24.18±5.78U/L)，中年組(26.80±6.79U/L)，老年組(26.47±6.47U/L)之間血清AFU結(jié)果的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(中年vs青年t=1.98，P=0.24；老年vs青年t=1.92，P=0.26；老年vs中年t=1.26，P=0.47；均P>0.05)。

2.3 各年齡組不同性別患者血清AFU結(jié)果比較 見表1。各年齡段男性和女性血清AFU結(jié)果的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.78～2.50，均P>0.05)。

組 別男 性女 性tP青年組中年組老年組24.84±5.5627.29±7.1827.03±6.6223.53±5.9626.27±6.3825.91±6.312.501.782.050.1510.3430.274

2.4 不同性別AFU結(jié)果比較 男性組(26.39±6.55 U/L)與女性組(25.23±6.31 U/L)血清AFU結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.96，P=0.68)。

2.6 本研究建立參考區(qū)間的臨床適用性評價 見表2。隨機選取320例健康體檢者(正常對照組)和119例原發(fā)性肝癌患者(原發(fā)性肝癌組)。已知本研究建立的AFU參考區(qū)間為13～38U/L，廠家參考區(qū)間為<40U/L，故以38U/L和40U/L為診斷臨界點計算血清AFU診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度和特異度。

注：.81，s=6.453，n=480。

表2 AFU以38 U/L和40 U/L為診斷臨界點時診斷原發(fā)性肝癌的臨床效能評價

注：原發(fā)性肝癌診斷的金標準為：肝臟占位病灶或者肝外轉(zhuǎn)移灶活檢或手術(shù)切除組織標本，經(jīng)病理組織學(xué)和/或細胞學(xué)檢查診斷為原發(fā)性肝癌[7]。

3 討論

綜上所述，通過研究建立了健康成年人血清AFU參考區(qū)間，使AFU在臨床上能得到更合理、更科學(xué)的應(yīng)用，可供臨床醫(yī)師和檢驗人員作為參考。將更有助于原發(fā)性肝癌的診斷，也為臨床對原發(fā)性肝癌的診斷和治療提供更加準確的實驗依據(jù)。至于血清AFU能否用于原發(fā)性肝癌分期，還有待進一步研究。