林乾飛

[摘要] 目的 探討磁性酶聯(lián)免疫分析法和流式細(xì)胞術(shù)兩種方法檢測(cè)HLA-B27的臨床價(jià)值，為臨床血液HLA-B27的檢驗(yàn)提供科學(xué)理論依據(jù)。 方法 方便選取該院2017年1—12月在該院檢測(cè)血液HLA-B27的134例患者為研究對(duì)象，所有患者均采用兩種方法進(jìn)行檢驗(yàn)，根據(jù)檢驗(yàn)方法不同，分為對(duì)照組和觀(guān)察組。對(duì)照組采用流式細(xì)胞儀檢驗(yàn)，觀(guān)察組采用磁性酶聯(lián)免疫分析法進(jìn)行檢驗(yàn)，觀(guān)察兩種檢驗(yàn)方法的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值。 結(jié)果 磁性酶聯(lián)免疫分析的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.961，0.985，0.981，0.985，流式細(xì)胞儀的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.961，0.971，0.968，0.973，兩種方法結(jié)果的符合率為97.76%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 磁性酶聯(lián)免疫分析法在檢驗(yàn)血液HLA-B27的靈敏度和特異性較好，具有方面、省時(shí)、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，適合強(qiáng)直性脊柱炎的早期診斷及鑒別，實(shí)用可靠，值得在臨床上應(yīng)用推廣。

[關(guān)鍵詞] 磁性酶聯(lián)免疫分析法；流式細(xì)胞術(shù)；兩種檢測(cè)方法；HLA-B27；臨床價(jià)值

[中圖分類(lèi)號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）06（c）-0188-03

[Abstract] Objective This paper tries to explore the clinical value of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry in the detection of HLA-B27， and to provide scientific theoretical basis for the clinical blood HLA-B27 test. Methods 134 patients with HLA-B27 in the hospital from January to December 2017 were selected conveniently as the study subjects. All patients were tested by two methods. According to the different testing methods， they were divided into control group and observation group. The control group was examined by flow cytometry. The observation group was tested by magnetic enzyme-linked immunosorbent assay. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive value of the two test methods were observed. Results The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay were 0.961，0.985，0.981 and 0.985， respectively. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of flow cytometry were 0.961，0.971，0.968，0.973. The coincidence rate of the two methods was 97.76%. the difference was not statistically significant. Conclusion The magnetic enzyme-linked immunosorbent assay has good sensitivity and specificity in the detection of blood HLA-B27. It has the characteristics of being time-saving， simple， and accurate. It is suitable for the early diagnosis and identification of ankylosing spondylitis. It is practical and reliable， and worthy of clinical application.

[Key words] Magnetic enzyme-linked immunoassay； Flow cytometry； Two detection methods； HLA-B27； Clinical value

HLA-B27屬于HLA-B位點(diǎn)之一，是人體白細(xì)胞抗原。HLA-B27基因?qū)儆冖裥蚆HC基因，表達(dá)在機(jī)體中所有有核的細(xì)胞上，尤其是在淋巴細(xì)胞表面含量較多?，F(xiàn)在研究表明[1-3]，HLA-B27和強(qiáng)直性脊柱炎具有高度的相關(guān)性，HLA-B27檢驗(yàn)已經(jīng)成為臨床上支持強(qiáng)直性脊柱炎診斷的重要依據(jù)。目前檢驗(yàn)HLA-B27的方法有許多，如微量細(xì)胞毒試驗(yàn)、流式細(xì)胞儀檢驗(yàn)法、酶聯(lián)免疫分析法、PCR法等。該文方便選取該院2017年1—2017年12月在該院檢測(cè)血液HLA-B27的134例患者為研究對(duì)象，探討兩種方法檢測(cè)HLA-B27的臨床價(jià)值，取得較好的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取在該院檢測(cè)血液HLA-B27的134例患者為研究對(duì)象，所有患者血液均經(jīng)流式細(xì)胞儀和酶聯(lián)免疫分析法進(jìn)行測(cè)定，分別為對(duì)照組和觀(guān)察組?；颊咧心?1例，女63例，年齡6～85歲，平均年齡（47.0±2.69）歲。該研究的所有流程項(xiàng)目都是在符合倫理委員會(huì)各項(xiàng)條例和批準(zhǔn)的前提下進(jìn)行的，同時(shí)也是獲得了所有參與患者及其家屬的知情同意。

1.2 治療方法

1.2.1 標(biāo)本準(zhǔn)備 兩組患者晨起空腹抽取靜脈血4 mL，分別裝于2支EDTA抗凝管（美國(guó)BD公司）中，每管2 mL，編號(hào)注明性別和年齡，在24 h內(nèi)分別用于酶聯(lián)免疫分析法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.2.2 對(duì)照組 對(duì)照組采用流式細(xì)胞儀對(duì)患者血液進(jìn)行檢驗(yàn)，采用美國(guó)BD公司的FACSCalibur流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢驗(yàn)，HLA-B27試劑盒為BD公司的專(zhuān)用試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，采用專(zhuān)用軟件進(jìn)行血液樣品分析和結(jié)果計(jì)算，將結(jié)果和定界值進(jìn)行比較，大于等于定界值則為陽(yáng)性，否則為陰性。

1.2.3 觀(guān)察組 觀(guān)察組采用美國(guó)Goldsign公司的HLA-B27抗原磁酶免疫試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，采用國(guó)產(chǎn)KHBst-360酶免疫檢測(cè)儀，在波長(zhǎng)450 nm和630 nm下讀取吸光度值（OD值），OD值<0.7則判定為陰性，OD≥0.7則為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料[n（%）]采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)過(guò)不同方法檢測(cè)后，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

兩種方法檢測(cè)后，靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

HLA抗原是人類(lèi)重要組織相容性復(fù)合體（MHC）的表達(dá)產(chǎn)物，在人體免疫系統(tǒng)中負(fù)責(zé)細(xì)胞與細(xì)胞之間的識(shí)別、誘導(dǎo)免疫反應(yīng)以及調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能。近年來(lái)，研究HLA和疾病相關(guān)性的資料證明[4-6]，一些疾病的發(fā)生率盒某些特殊的HLA檢出率密切相關(guān)，這些患者大都是發(fā)病機(jī)理尚不明確，并伴有免疫功能異常和有遺傳傾向性的疾病[7]。

流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記的熒光信號(hào)，對(duì)懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子，實(shí)現(xiàn)高速、逐一的細(xì)胞定量分析技術(shù)，其特點(diǎn)是通過(guò)快速測(cè)定庫(kù)爾特電阻、光散射、熒光和光吸收定量測(cè)定細(xì)胞細(xì)胞體積、DNA含量、酶活性、蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞膜受體及表面抗原等參數(shù)，根據(jù)得到的參數(shù)將性質(zhì)不同的細(xì)胞分開(kāi)，獲得供醫(yī)學(xué)研究用的純細(xì)胞群體。FCM法通過(guò)熒光抗原抗體檢測(cè)技術(shù)，對(duì)細(xì)胞表面抗原進(jìn)行分析，進(jìn)行細(xì)胞分類(lèi)及亞群分析，F(xiàn)CM對(duì)于人體細(xì)胞免疫功能的評(píng)估、各種血液病及腫瘤的診斷和治療均有重要作用。酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法（ELISA法），簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法，是讓抗體和酶復(fù)合物結(jié)合并通過(guò)顯色來(lái)進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。該研究檢查結(jié)果顯示流式細(xì)胞儀的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.961、0.971、0.968、0.973，磁性酶聯(lián)免疫的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.981、0.985、0.981、0.985，與沈靜[8]磁性酶聯(lián)免疫分析的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.958、0.969、 0.965、0.968，流式細(xì)胞儀的靈敏度、特異性及陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為0.979、0.981、0.982、0.987檢測(cè)結(jié)果一致。

該文研究磁性酶聯(lián)免疫分析法在檢驗(yàn)血液HLA-B27的靈敏度和特異性較好，具有方面、省時(shí)、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，適合強(qiáng)直性脊柱炎的早期診斷及鑒別，實(shí)用可靠，值得在臨床上應(yīng)用推廣。

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（收稿日期：2018-03-26）