陳林偉，王 琴，彭德熹，袁成業(yè)，蔡寶昌，王 翼，王姝梅

（1．南京中醫(yī)藥大學泰州附屬醫(yī)院，泰州 225300；2．南京中醫(yī)藥大學，南京 210023；3．南京理工大學泰州科技學院，泰州 225300）

氣血雙補酒是江蘇省中醫(yī)院名老中醫(yī)孟景春教授的臨床經驗方，是由人參、黃芪、當歸、炒白芍、陳皮、玉竹、酒黃精、制何首烏、枸杞子9味中藥組成的復方制劑，具有補益氣血、通陽散結、復脈固脫等功效，臨床上常用于治療心力衰竭、心肌缺血、冠心病、心絞痛、免疫力低下以及惡性腫瘤等疾病[1－2]。國內外已有相關文獻報道對其提取工藝、化學成分以及微量元素進行了分析研究，該復方制劑含有大量的揮發(fā)性成分，對其治療心血管疾病有著重要的作用，但目前文獻中并未見對本方所含揮發(fā)性化學成分進行系統(tǒng)報道，因此本研究采用氣相色譜－質譜聯(lián)用儀（GC－MS）分析研究氣血雙補酒中的揮發(fā)性化學成分，為其藥效物質基礎的研究和質量控制提供一定的參考依據(jù)。

1 儀器與試藥

儀器型號為Agilent5975CMSDGC－MS，包括7693自動進樣器；乙酸乙酯（分析純，批號：20140201，南京維之誠化學試劑有限公司）；無水硫酸鈉（分析純，批號：20140501，南京化學試劑有限公司）；娃哈哈純凈水；氣血雙補酒樣品來自南京中醫(yī)藥大學泰州附屬醫(yī)院制劑室；復方中各單味藥經南京中醫(yī)藥大學蔡寶昌教授鑒定。

2 實驗方法

2.1 揮發(fā)油的提取 稱取氣血雙補酒1 000 mL，置于2 000 mL圓底燒瓶中，水蒸氣蒸餾提取10 h，至揮發(fā)油不再增加，經無水硫酸鈉脫水后得到揮發(fā)油，同法提取人參、黃芪、當歸、炒白芍、陳皮、玉竹、酒黃精、制何首烏、枸杞子，得到各藥材的揮發(fā)油，本實驗揮發(fā)油提取率為5．1%。以上揮發(fā)油溶液經無水硫酸鈉脫水，通過0．45μm有機濾膜制備即得。

2.2 色譜條件 BP5－5%苯基二甲基聚硅氧烷柱（30 m×250μm×0．25μm），初始溫度為 60℃，進樣口的溫度設置為270℃；以5℃/min升溫速度慢慢升至200℃，保持6 min；然后再以5℃/min升溫速度緩慢升至240℃，保持5 min。高純氦氣為載氣，分流比例為20∶1，流速設置為30 mL/min，每次進樣2 μL，Gassaver：關閉。

2.3 質譜條件 離子源的溫度為230℃，設置接口溫度為270℃，電子的能量設置為70 eV，四級桿的溫度設置為50℃，質量掃描的方式選擇為全部掃描范圍：50～550 amu，設置電子倍增器的電壓值為1 553 V。每次進樣為2μL，樣品進樣2針，使用Nist 11．0標準譜圖庫進行檢索分析。

3 結果與數(shù)據(jù)分析

實驗結果通過質譜軟件Chem Station和NIST 11.0標準的質譜檢索庫進行檢索分析，并比對標準質譜譜圖進而鑒定化學成分一共得到39種揮發(fā)性成分，且各揮發(fā)性成分匹配率均在90%以上，成分鑒定的結果詳情見表1。通過優(yōu)化的色譜質譜條件，對氣血雙補酒中含有的揮發(fā)性成分進行全面的GC-MS分析，采用面積歸一化法來測定揮發(fā)性各成分的含量，并分析得到氣血雙補酒揮發(fā)性成分的總離子流圖，見圖1。

表1 GC-MS鑒定氣血雙補酒中的揮發(fā)性成分Tab.1 Componentsidentified of QXSBJ by GC-MS

圖1 氣血雙補酒揮發(fā)油的總離子流圖Fig.1 GC-MSchromatogram of QXSBJ

本實驗通過水蒸氣蒸餾的方法提取出氣血雙補酒中的揮發(fā)性化學成分，同時采用GC-MS技術對揮發(fā)油提取物進行揮發(fā)性化學成分分析研究，利用譜庫檢索結合藥材色譜峰歸屬對氣血雙補酒揮發(fā)油進行定性分析，應用峰面積百分比法計算相對量，另對各色譜峰進行藥材歸屬研究[3-4]。GC-MS分析結果顯示，Ethyl acetate為溶劑峰，其含量最高，其次氣血雙補酒中富含Isocetic acid（10.24%）、Terpineol（10.01%）、Gamma.-Terpinene（9.95%）、（+）-2-carene（9.74%）、D-Limonene（9.67%）等揮發(fā)性成分。色譜峰歸屬研究表明，來源于人參的揮發(fā)性成分有9個、來源于黃芪的揮發(fā)性成分有11個、來源于當歸的揮發(fā)性成分有25個、來源于炒白芍的揮發(fā)性成分有5個、來源于陳皮的揮發(fā)性成分有20個、來源于玉竹的揮發(fā)性成分有7個、來源于酒黃精的揮發(fā)性成分有6個、來源于制何首烏的揮發(fā)性成分有8個、來源于枸杞子的揮發(fā)性成分有2個。

本實驗通過GC-MS法能夠快速有效地分析氣血雙補酒中的揮發(fā)性成分，為氣血雙補酒藥效物質基礎的研究和質量控制提供參考。