段梅梅 付佳佳

肺癌屬于常見(jiàn)的惡性腫瘤，目前在全球范圍內(nèi)患者死亡率占所有癌癥首位，在我國(guó)男性群體中，肺癌比較高發(fā)，且近年來(lái)始終呈現(xiàn)出逐年升高的發(fā)病趨勢(shì)，加之該病發(fā)病初期具有一定的隱匿性，因此大部分患者確診時(shí)已經(jīng)喪失了最佳手術(shù)根治時(shí)機(jī)[1]。而對(duì)于晚期肺癌主要的治療手段包括放療以及化療[2-4]。癌細(xì)胞成功逃避由化療藥物導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡通常是化療過(guò)程中抗藥性形成的一個(gè)決定性的因素，雖然化療藥物理論上可誘導(dǎo)癌細(xì)胞的自發(fā)性凋亡，但若在機(jī)體中存在凋亡抑制基因的過(guò)表達(dá)，亦或是促凋亡基因被抑制后，癌細(xì)胞往往不會(huì)凋亡，進(jìn)而逃避了化療藥物所誘導(dǎo)的凋亡過(guò)程而表現(xiàn)出耐藥性，因此，及時(shí)監(jiān)測(cè)肺癌患者的腫瘤標(biāo)記物顯得十分必要。但由于晚期肺癌患者經(jīng)常無(wú)法獲取其腫瘤標(biāo)本，從而增加了對(duì)其耐藥性以及化療療效的評(píng)估難度[5-6]。本文研究外周血檢測(cè)多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)與基質(zhì)金屬酶-9(martix metalloprpteinase-9，MMP-9)對(duì)肺癌患者化療療效的評(píng)估價(jià)值，旨在為患者化療后療效及預(yù)后評(píng)估提供數(shù)據(jù)參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

選取2015年6月—2017年6月我院收治的肺癌患者60例為觀察對(duì)象。其中男36例，女24例，年齡45～77歲，平均61.2±5.3歲；所有入選對(duì)象均經(jīng)病理檢查確診為非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者,其中有吸煙史19例，無(wú)吸煙史41例。入選標(biāo)準(zhǔn):①所有患者均為初次化療；②未發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移；③所有患者均簽署知情同意書。排除以下：發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移的患者，預(yù)估生存期低于半年的患者。

1.2 研究方法

患者化療方案選用培美曲塞+順鉑方案，培美曲塞500 mg/m2，在第一天靜滴給藥，順鉑劑量60～80 mg/m2，d1-5靜滴； 28 d為1個(gè)療程，治療2個(gè)療程。所有患者均在治療前1周以及化療兩周期后采集清晨空腹外周靜脈血，并在2 h內(nèi)轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心處理，持續(xù)25 min后取上層血清，置于-80℃冰箱中冷凍保存，于檢測(cè)前30 min取出血清標(biāo)本自然化凍，采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)進(jìn)行測(cè)定MMP-9，具體操作按照說(shuō)明書進(jìn)行。

采用免疫組化Envision法檢測(cè)所有患者外周血中MRP蛋白的表達(dá)，具體操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比化療前后MMP-9水平、MRP陽(yáng)性率、化療后小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌患者M(jìn)RP陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 化療前后MMP-9水平對(duì)比

化療前患者M(jìn)MP-9水平為(317.35±32.47)pg/ml，顯著高于化療后的(287.32±28.32)pg/ml(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 化療前后MMP-9水平對(duì)比 (pg/ml，±s)

注：與化療前相比，1)P<0.05

2.2 化療前后患者M(jìn)RP陽(yáng)性率對(duì)比

患者化療前MRP陽(yáng)性率為36.67%(22/60)，顯著低于化療后的68.33%(41/60)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

注：與化療前相比，1)P<0.05

3 討論

在人類機(jī)體中，MMP-9主要來(lái)自于人體多種細(xì)胞分泌產(chǎn)生[7]，包括中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、惡性腫瘤細(xì)胞以及毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞等，主要作用是降解破壞細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中最主要的組成成分Ⅳ型以及Ⅴ型膠原與明膠[8]。通過(guò)患者腫瘤組織直接檢測(cè)多藥耐藥基因的表達(dá)水平是最直接有效反映腫瘤耐藥情況的手段，但由于該檢測(cè)手段只能檢測(cè)一次，而臨床上部分診治較晚的晚期肺癌患者失去了最佳的手術(shù)治療時(shí)間，因此無(wú)法通過(guò)上述方法準(zhǔn)確了解患者肺癌組織耐藥基因的表達(dá)[9]。隨著醫(yī)療水平的不斷提高，通過(guò)患者外周血對(duì)耐藥基因進(jìn)行檢測(cè)應(yīng)用于臨床，在一定程度上可以代替組織檢查，具有一定的可靠性[10-11]。

本文化療前患者M(jìn)MP-9水平顯著高于化療后的MMP-9水平，提示了MMP-9水平確實(shí)與化療療效密切相關(guān)。其中MMP-9基因在正常表達(dá)情況下具有調(diào)節(jié)及維持正常組織功能的作用[12]，但在惡性組織中這一作用完全消失。MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)家族的主要成員之一[13],在腫瘤的侵襲過(guò)程中，ECM表面受體會(huì)與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，從而直接分泌MMPs或直接誘導(dǎo)宿主細(xì)胞分泌MMPs，進(jìn)一步促使ECM出現(xiàn)局部降解，而缺失的ECM對(duì)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)周圍組織起到了推波助瀾的作用，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的侵襲擴(kuò)散，最終影響患者預(yù)后。與此同時(shí)，化療前患者M(jìn)RP陽(yáng)性率顯著低于化療后，表明MRP陽(yáng)性率與化療療效也存在一定相關(guān)性[14]。其中MRP是ATP結(jié)合的盒式膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員之一[15]，與P-gp介導(dǎo)的耐藥機(jī)制類似，它具有識(shí)別以及轉(zhuǎn)運(yùn)與谷胱甘肽形成復(fù)合物的依賴ATP的GS-X泵的作用，從而能將GS-X復(fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外，進(jìn)一步促使了細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度下降，同時(shí)減少了細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，還可以通過(guò)細(xì)胞內(nèi)藥物的再分布減少靶點(diǎn)部位的藥物濃度[16]。另有報(bào)道，MRP在臨床多種類型腫瘤疾病中均有不同程度的表達(dá)，且腫瘤的耐藥性與其高表達(dá)存在密切相關(guān)，隨著患者化療療程的逐漸增加，MRP表達(dá)率也有升高的趨勢(shì)[17-18]。腫瘤細(xì)胞可能會(huì)因?yàn)榛熣T導(dǎo)或其他因素影響而出現(xiàn)耐藥現(xiàn)象，相應(yīng)地使得MRP陽(yáng)性率增加[19]。需要指出的是，本文也存在著一定程度的局限性及不足之處。例如本文的樣本量相對(duì)較少，且缺乏了對(duì)患者進(jìn)行的長(zhǎng)期隨訪，并且還缺少與同級(jí)或者上級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)共同開(kāi)展的協(xié)同性研究，這些情況均可能會(huì)對(duì)此次研究的結(jié)果數(shù)據(jù)及結(jié)論產(chǎn)生一定的影響。為了更好地規(guī)避上述影響因素，今后可考慮進(jìn)一步地?cái)U(kuò)大研究的樣本量，同時(shí)對(duì)患者實(shí)施至少1年的隨訪，并邀請(qǐng)其他同行共同對(duì)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，爭(zhēng)取獲得更具科學(xué)性的數(shù)據(jù)結(jié)果，從而更好地服務(wù)于臨床診治過(guò)程。

綜上所述，MM-9水平越高，患者預(yù)后越差，MRP表達(dá)能間接反映癌組織對(duì)化療藥物的耐受性，臨床上可通過(guò)對(duì)肺癌患者的外周血檢測(cè)MM-9水平以及MRP的表達(dá)，從而有利于對(duì)化療療效及預(yù)后情況進(jìn)行評(píng)估。