崔 瑩

（臨滄市農(nóng)業(yè)學(xué)校，云南臨滄 677099）

1 黃花蒿青蒿素概述

菊科植物黃花蒿（Artemisia annua L）在我國(guó)用作抗瘧中藥已有二千多年的歷史，利用黃花蒿生產(chǎn)的青蒿素系列藥物治療瘧疾不僅療效好、療程短，而且副作用小，是我國(guó)擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的中藥品種之一，也是迄今為止為數(shù)不多的通過(guò)美國(guó)FDA認(rèn)證的中藥品種。青蒿素是我國(guó)中醫(yī)藥科學(xué)和醫(yī)藥科技對(duì)人類抗瘧疾事業(yè)的重大貢獻(xiàn)，自20世紀(jì)80年代以來(lái)受到全世界的普遍關(guān)注。隨著我國(guó)對(duì)青蒿素類藥物的不斷創(chuàng)新和開發(fā)，以及全球?qū)χ委煇盒辕懠菜幬镄枨蟮募眲≡鲩L(zhǎng)，我國(guó)青蒿素類藥物顯現(xiàn)出巨大的國(guó)際市場(chǎng)潛力。青蒿素雖然能夠人工合成，但成本高，合成難度大，毒性和副作用大，未能投入工藝化生產(chǎn)。目前使用的青蒿素主要還是從植物黃花蒿葉片中提取的，因此提高栽培黃花蒿中青蒿素含量的研究就顯得十分必要[1]。以往的研究中，研究者注重改善黃花蒿的生長(zhǎng)條件，如改善光照條件、種植密度，施用一些植物激素等措施來(lái)增加青蒿素的含量。對(duì)于植物生長(zhǎng)中營(yíng)養(yǎng)三要素氮、磷、鉀的合理使用則很少進(jìn)行研究，韋中強(qiáng)等[2]開展了黃花蒿苗期N、P、K追肥配比試驗(yàn)，N水平、K水平及K種類等試驗(yàn)。結(jié)果表明N、P是影響黃花蒿產(chǎn)量的主要因素，N、P有互補(bǔ)作用，K是影響青蒿素含量的主要因素[3]。但云南省栽培黃花蒿多以育苗移栽為主，移栽后要覆蓋地膜，栽培時(shí)肥料以基肥的形式一次施入。因此以追肥的方式施肥不適于云南省黃花蒿栽培的具體情況。本文以一個(gè)黃花蒿優(yōu)良種源為研究對(duì)象進(jìn)行小區(qū)試驗(yàn)，探討了不同氮、磷、鉀肥配比對(duì)黃花蒿青蒿素含量及產(chǎn)量的影響[4]。

2 材料與方法

2.1 材料 供試品種為元陽(yáng)種源。

2.2 試驗(yàn)地條件 實(shí)驗(yàn)地選在云南省農(nóng)科院實(shí)驗(yàn)基地。土壤為紅壤土，土壤有機(jī)質(zhì)含量為5.64%，PH6.8，全N2.42 g/kg，全P0.95 g/kg，全K5.67 g/kg，速效N188.92 mg/kg，速效P9.67 mg/kg，速效K50.50 mg/kg。

2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇土地肥力基本一致的地塊，每一種NPK組合為一個(gè)處理，三個(gè)重復(fù)，隨機(jī)排列。每個(gè)處理為一個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積13 m2。每個(gè)小區(qū)種植黃花蒿20株。

施用的肥料為尿素、普鈣、硫酸鉀，以基肥的形式一次施入。在黃花蒿初蕾期進(jìn)行收獲，每個(gè)小區(qū)單獨(dú)收獲，按照五點(diǎn)取樣法，隨機(jī)采收5株黃花蒿，記錄其株高、莖基粗、分枝數(shù)、冠副、葉、蕾鮮重。不同處理化肥施用量見表1。

表1 不同處理化肥施用量（單位：kg/667 m2）（折合純養(yǎng)分含量）

2.4 青蒿素含量測(cè)定 采用薄層層析—紫外分光光度法測(cè)定青蒿素含量，準(zhǔn)確稱取已烘干研碎的黃花蒿葉10 g置于500 mL茄形瓶中，加入200 mL石油醚（30～60 ℃），回流提取2 h，回收溶劑后用5 mL氯仿將樣品轉(zhuǎn)移至小瓶，備用。另取備用硅膠板，將小瓶中樣品取100 uL點(diǎn)樣于硅膠板上在正己烷：乙酸乙脂（6∶1）展開劑中，展開40 min，顯色標(biāo)準(zhǔn)品部分，刮下相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品部分的樣品，在紫外分光光度計(jì)中比色測(cè)定吸光值以計(jì)算青蒿素含量。青蒿素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方程C=17.311A+0.348 5，r2=0.999 8。

2.5 試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法 采用DPS軟件統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)處理采用Duncan新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)。

3 結(jié)果與分析

3.1 氮磷鉀肥配比使用對(duì)黃花蒿產(chǎn)量因素的影響 詳情見表2。

表2 不同NPK配比使用對(duì)黃花蒿產(chǎn)量因素的影響

表2結(jié)果表明，不同N、P、K肥料配比對(duì)黃花蒿的黃花蒿株高、莖基粗、分枝數(shù)影響不大。不同肥料配比處理間沒(méi)有顯著差別。但對(duì)黃花蒿冠幅、葉蕾鮮重有很大的影響，其中N∶P∶K=1∶1∶2對(duì)冠幅、葉蕾鮮重影響最大，與對(duì)照相比達(dá)到了5%的顯著水平，說(shuō)明在N、P肥足量使用的基礎(chǔ)上，增加K肥的使用量能增加黃花蒿分枝的長(zhǎng)度，分枝長(zhǎng)度增加，著生于分枝上的葉片數(shù)也增加，因此鮮產(chǎn)量也得以增加。

3.2 氮磷鉀肥配比使用對(duì)黃花蒿青蒿素含量的影響 詳情見表3。

表3 不同NPK配比使用對(duì)黃花蒿青蒿素含量的影響

青蒿素為一種倍半萜類化合物，是黃花蒿體內(nèi)的一種次生代謝產(chǎn)物。黃花蒿葉片中青蒿素含量直接影響到黃花蒿產(chǎn)品的使用價(jià)值。青蒿素的體內(nèi)合成機(jī)理十分復(fù)雜，涉及到多個(gè)合成前體及多個(gè)酶類。表3結(jié)果表明，不同N、P、K肥料配比對(duì)黃花蒿的青蒿素含量有很大的影響，其中以N∶P∶K=1∶1∶2影響最大，青蒿素含量平均值為1.056 67%，比對(duì)照增加了65.1%，達(dá)到了5%的顯著水平。比N∶P∶K=1∶1∶1的處理比對(duì)照CK增加了32.81%，N∶P∶K=1∶0.5∶1的處理比對(duì)照CK增加了3.65%。

4 討論

黃花蒿種植一般是選擇荒山、荒地。從本試驗(yàn)結(jié)果看在N、P、K三種單質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素中以K肥對(duì)黃花蒿的產(chǎn)量和青蒿素含量影響最大，在N、P肥供應(yīng)充足的情況下，增施K肥能獲得較好的產(chǎn)量和青蒿素含量。原因可能是K肥促進(jìn)了黃花蒿的生長(zhǎng)發(fā)育，提高了黃花蒿體內(nèi)酶的活性，從而促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，使青蒿素得以在植株體內(nèi)大量積累。

5 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，在種植黃花蒿時(shí)，要保證肥料的供應(yīng)充足，最佳的施肥比例為N∶P∶K=6 kg∶3 kg∶6 kg，這樣處理的黃花蒿長(zhǎng)勢(shì)良好，冠幅、葉蕾鮮重、青蒿素含量均高于其他處理。