耿 悅

（江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院 江蘇南京210019）

0 引 言

《中國藥典》2015年版[1]（ChP2015）二部規(guī)定硫酸核糖霉素原料藥及其制劑的含量測定采用抗生素的微生物檢定法，該法的優(yōu)點(diǎn)是能真實(shí)反映藥物的抗菌活性，缺點(diǎn)是操作繁瑣，測定條件要求高，檢驗(yàn)周期長，測定誤差大，不能滿足快速檢驗(yàn)和中間體質(zhì)量控制的要求。本文根據(jù)硫酸核糖霉素具有旋光性的特點(diǎn)，擬對旋光法快速測定硫酸核糖霉素原料藥及其制劑含量的可行性進(jìn)行考察。

1 儀器與試劑

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

電子天平（Mettler Toledo XS205）；旋光儀（Anton Paar MCP300）；pH 計(jì)（Mettler Toledo）。

1.2 藥品及試劑

硫酸核糖霉素工作對照品（無錫福祁，批號20170701，干燥失重 3.6%，含量以干燥品計(jì)，706核糖霉素，單位 mg）；注射用硫酸核糖霉素（19批抽檢樣品）；蒸餾水自制。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取硫酸核糖霉素工作對照品適量，用蒸餾水溶解并稀釋制成濃度為 2.06×104、1.36×104、1.03×104、6.99×103、3.43×103、1.72×103μg/mL 的溶液。用1dm 測定管依次測定旋光度，以效價(jià)（C）為橫坐標(biāo)，旋光度（α）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)直線回歸，得回歸方程為：

2.2 回收率實(shí)驗(yàn)

取硫酸核糖霉素原料藥適量，制成 10mg/mL溶液（約含 6900核糖霉素，單位 mL），依次測定，代入回歸方程計(jì)算。其平均回收率為 100.7%，RSD為0.6%（n＝6）。

2.3 專屬性實(shí)驗(yàn)

取新霉胺（已知雜質(zhì)）對照品 0.03744g，置10mL容量瓶，加水定容。按2.2配制供試品溶液，分別加入新霉胺對照品溶液 1.5mL，測定其回收率分別為102.17%、102.09%，已大于102.0%。當(dāng)供試品溶液中新霉胺含量大于 2.0%時(shí)，旋光效價(jià)法將帶來較大誤差。本次 19批樣品新霉胺含量在 0.1%～0.2%（藥典有關(guān)物質(zhì)方法測得），可以用來測定。

2.4 pH值對旋光度的影響

按2.2配制供試品溶液，分別用硫酸溶液和氨試液調(diào)節(jié) pH 值為 4.5、5.0、6.5、7.1、7.4，取上述供試品溶液適量，測定其旋光度，帶入回歸方程計(jì)算，并測定其回收率，分別為 101.6%、100.5%、98.6%、98.3%、94.7%，在堿性條件下旋光度會明顯降低，在pH值為4.5～7.1范圍測定較為準(zhǔn)確。

2.5 溫度對旋光度的影響

按 2.2配制供試品溶液，分別在 15、20、25、30℃測定旋光度，帶入線性方程計(jì)算，回收率分別為100.0%、100.3%、101.7%、104.1%。上述結(jié)果表明，在15～25℃，溫度對測定影響較小。

2.6 溶液的穩(wěn)定性

按 2.2配制供試品溶液，分別在第 0、1、2、3、4、5、6、7、8h測定其旋光度，9次測定值RSD為0.4%，說明溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

3 結(jié) 果

3.1 19批樣品的比旋度測定

對抽檢的 19批注射用硫酸核糖霉素（為原料藥直接灌裝）進(jìn)行了比旋度的測定，結(jié)果為+45～+46°。第 17版《日本藥局方》[2]規(guī)定比旋度應(yīng)為+42～+49°（ChP2015暫未控制該品種比旋度），可見 19批樣品均符合規(guī)定。

3.2 19批樣品旋光效價(jià)測定法與微生物效價(jià)測定法比較

我們測定了 19批抽檢樣品的旋光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其旋光效價(jià)，并與微生物效價(jià)法測定值進(jìn)行比較。19批抽檢樣品，旋光效價(jià)法測定結(jié)果在 701～713核糖霉素（單位 mg），微生物效價(jià)法測定結(jié)果在704～707核糖霉素（單位 mg）。旋光效價(jià)的誤差為-0.9%～+0.8%。

旋光效價(jià)測定值與微生物效價(jià)測定值比較，P＝0.633＞0.05，2種方法所測結(jié)果之間無顯著性差異。

4 結(jié) 論

本文建立了利用旋光法測定硫酸核糖霉素效價(jià)的方法，適用于硫酸核糖霉素原料藥和注射用硫酸核糖霉素。該方法具有實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡單、實(shí)驗(yàn)操作簡便快捷、實(shí)驗(yàn)成本低、無污染、短時(shí)間內(nèi)即可完成測定等優(yōu)點(diǎn)，且溫度、pH 值、放置時(shí)間等因素在一定范圍內(nèi)變化對測定干擾不顯著。

該法適用于企業(yè)中間品控制或企業(yè)內(nèi)控方法，并且可作為快速檢驗(yàn)方法之一，用于監(jiān)督抽驗(yàn)藥品初篩和快檢。