鄭曉瑞，鐘桂云，韋權(quán)堃

(江門職業(yè)技術(shù)學(xué)院 材料技術(shù)系，廣東 江門 529090)

隨著社會(huì)的不斷發(fā)展和進(jìn)步，化妝品逐漸成為了現(xiàn)代人生活中不可缺少的一部分。人們對(duì)于化妝品品質(zhì)的要求也越來(lái)越高，開發(fā)有益于人體健康且兼顧美容保健作用的綠色化妝品具有廣闊的市場(chǎng)前景。植物類化妝品具有良好的應(yīng)用基礎(chǔ)，在中國(guó)古代，人們利用植物的汁液來(lái)美容和滋潤(rùn)皮膚，通過果實(shí)或者枝葉的簡(jiǎn)單處理，就直接使用，但其有效成分不明確，效率低。現(xiàn)有的植物提取工藝多從植物的有效成分入手，進(jìn)行有效成分的單體分離，導(dǎo)致提取成本上升，原料浪費(fèi)，難以普及。其實(shí)，一種植物里面，有活性的成分是多種多樣的，如果能將其提取出來(lái)并直接使用，對(duì)于化妝品行業(yè)來(lái)說(shuō)，既提高了效率，又降低了提取成本。

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，含有豐富的黃酮物質(zhì)，具有多種生物活性[1-2]，黃酮類物質(zhì)作為一種護(hù)膚因子，具有抗氧化、防衰老、美白防曬、抗輻射、保濕以及抑菌等功效。目前國(guó)內(nèi)對(duì)陳皮的研究主要集中其在藥理方面的應(yīng)用，比如抗腫瘤、抗過敏、抗炎和抗氧化等作用[3-5],而對(duì)陳皮美容功效的文獻(xiàn)報(bào)道較少。

因此，本文研究了陳皮提取物的紫外吸收性能，并采DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)考察陳皮提取物的防曬、抗氧化等功效，以期為陳皮資源在化妝品的研發(fā)和應(yīng)用上提供一定的參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要試劑與儀器

陳皮購(gòu)買于江門市國(guó)大藥房，粉碎后備用。乙醇、丙二醇，均為分析純，國(guó)藥試劑公司。DPPH(1、1-二苯基-2-苦基肼自由基，Sigma-Fluka公司產(chǎn)品)，YP202電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，U-4100型紫外-可見分光光譜儀(UV-Vis)，日本HITACHI公司；KQ-100DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)過程

1.2.1 防曬能力評(píng)價(jià)方法

利用紫外可見分光光度計(jì)，測(cè)定陳皮提取液的紫外吸收光譜，然后分別計(jì)算陳皮提取液在UV，UVB和UVA的平均吸光度值，評(píng)價(jià)其紫外線吸收能力即防曬能力[6-7]。

1.2.2 陳皮防曬成分的提取工藝

在實(shí)驗(yàn)中，以陳皮提取物對(duì)紫外光譜吸收度作為評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，依次考察各因素對(duì)超聲波提取工藝的影響。

1.2.2.1 萃取劑與吸光度的關(guān)系

準(zhǔn)確稱取陳皮樣品90、120、150、180mg各兩組，在第一組和第二組中分別加入丙二醇和75%乙醇2種不同的溶劑各20mL，浸潤(rùn)后在30℃超聲波提取20min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，測(cè)其在200～400nm之間的紫外吸收光譜，并計(jì)算其UVC，UVB和UVA的平均吸光度值。

1.2.2.2 料液比對(duì)吸光度值的影響

精確稱取樣品8份，每份為90、110、150、220、280、320、380、390mg分別加入丙二醇各20mL，浸潤(rùn)后在30℃，超聲波提取20min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，紫外吸收光譜測(cè)定同上。

1.2.2.3 超聲時(shí)間對(duì)吸光度值的影響

精確稱取樣品6份，每份為320mg，分別加入丙二醇20mL，浸潤(rùn)后在30℃超聲波提取，提取時(shí)間分別為20min、40min、60min、80min、100min、120min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，紫外吸收光譜測(cè)定同上。

1.2.3 陳皮提取液對(duì)DPPH自由基的清除實(shí)驗(yàn)

1.2.3.1 DPPH溶液的配置

準(zhǔn)確稱取DPPH試劑40mg，用75%乙醇溶解，轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用75%乙醇定容，搖勻，得質(zhì)量濃度160mg/L的DPPH溶液，避光置于冰箱中冷藏備用[8]。

1.2.3.2 樣品溶液的配置

陳皮提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干，準(zhǔn)確稱取陳皮提取物40mg，用75%乙醇溶解，轉(zhuǎn)入100mL的容量瓶中，用75%乙醇定容，搖勻，得質(zhì)量濃度為400mg/L的樣品溶液，置于冰箱中冷藏備用。

1.2.3.3 清除DPPH自由基能力的測(cè)定

準(zhǔn)確量取1.6mL DPPH溶液，加入2.4mL75%乙醇，混勻，在λ=517nm測(cè)吸光度作為Ac值。分別準(zhǔn)確量取各樣品溶液0.6、1.0、1.2、1.4，加入1.6mLDPPH液及1.8%、1.4%、1.2%、1.075%乙醇混合均勻，并將試管避光置于冰水浴中，避光反應(yīng)30min后，在λ=517nm測(cè)吸光度作為Ai。另外準(zhǔn)確稱量各樣品溶液0.6、1.0、1.2、1.4mL，加入75%乙醇，使每只試管體積4mL, 在λ=517nm測(cè)吸光度作為Aj。

按下式計(jì)算自由基清除率K值。

K=1-(Ai-Aj)/Ac

2 結(jié)果與討論

2.1 陳皮防曬成分最佳提取工藝

在實(shí)驗(yàn)中，以陳皮提取物對(duì)紫外光譜吸收度作為評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，依次考察各因素對(duì)超聲波提取工藝的影響，結(jié)果如下。

2.1.1 溶劑種類

以陳皮黃酮提取液對(duì)紫外光譜吸收度作為評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，溶劑種類對(duì)超聲波提取工藝的影響見圖1。由圖1可知，乙醇依然是比較好的提取溶劑，但是在高濃度，以丙二醇作為提取液，提取效果要優(yōu)于乙醇。

圖1 溶劑對(duì)提取液防曬活性的影響Fig.1 The UV absorption valuespectra ofleaves of dried orange samples

2.1.2 料液比

料液比對(duì)超聲波提取工藝的影響見圖2。

由圖2可知，隨著料液比的增加，陳皮提取物的防曬活性也在增加，在0.0900∶20～0.3200∶20(g/mL)時(shí)，達(dá)到最大值。但是隨著料液比的繼續(xù)增加，陳皮提取物的防曬活性反而減少。原因可能是，原料一定的情況下防曬成分溶出率一定，料液比過大時(shí)，陳皮沒有得到充分浸提，另外過分增加提取溶劑丙二醇的體積，也為后續(xù)的回收工作帶來(lái)負(fù)擔(dān)。因此，最佳的料液比為0.3200∶20(g/mL)。

圖2 料液比對(duì)提取液防曬活性影響Fig.2 The effect on the sunscreen activity of different solid-liquid ratio

2.1.3 提取時(shí)間

提取時(shí)間對(duì)超聲波提取工藝的影響見表1。

表1 超聲提取時(shí)間對(duì)陳皮黃酮提取液的防曬活性的影響Table 1 The effect on the sunscreen activity of different time

由表1可知，當(dāng)提取時(shí)間在20～80min時(shí)，陳皮提取物的防曬活性，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，80min后，提取率不再增加。這是因?yàn)槌晽l件下提取時(shí)間過長(zhǎng)，有可能會(huì)導(dǎo)致陳皮中防曬成分受到一定的損失，因此，確定最佳的提取時(shí)間是80min。

2.2 陳皮提取液對(duì)DPPH自由基的清除實(shí)驗(yàn)

不同濃度陳皮提取物對(duì)DPPH自由基清除能力見圖3。

圖3 陳皮提取物對(duì)DPPH自由基的清除率Fig.3 Scavenging effect of dried orange extract on DPPH radical

結(jié)果顯示，陳皮提取物具有清除DPPH自由基的能力，隨著陳皮提取物濃度的增加，對(duì)DPPH自由基的清除率能力有逐步增強(qiáng)的趨勢(shì)，說(shuō)明陳皮提取物對(duì)DPPH自由基的清除能力與其濃度存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。

3 結(jié)論

通過紫外吸收光度的測(cè)定、清除DPPH自由基實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了陳皮提取液具有廣譜的紫外吸收能力、對(duì)DPPH自由基有很好的清除作用。同時(shí)找出陳皮用丙二醇提取時(shí)間最短且效果最好的提取方法：在室溫，料液比0.3200∶20(g/mL)，超聲波提取80min的條件下效率最高。綜上所述，陳皮提取液具有多種美容功效，有望作為一種全新的中草藥活性添加劑應(yīng)用到化妝品中。