劉向紅，楊亞軍，李兆林，劉 旭

（寧夏康亞藥業(yè)股份有限公司，寧夏銀川 750002）

依帕司他（epalrestat 1），化學(xué)名 5-［（1Z，2E）-2-甲基-3-苯基-2-丙烯亞基］-4-氧代-2-硫代-3-噻唑烷乙酸，是一種醛糖還原酶抑制劑，由小野公司在1992年在日本上市，臨床上用于治療糖尿病及其并發(fā)癥，如神經(jīng)病變、末梢神經(jīng)障礙癥、震動(dòng)感覺(jué)異常、心搏異常、角膜上皮病變、視網(wǎng)膜病變和微血管病變等[1，2]，其結(jié)構(gòu)式（見(jiàn)圖1）。

圖1 依帕司他結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formula of epalrestat

依帕司他的合成方法已有不少文獻(xiàn)報(bào)道，總結(jié)文獻(xiàn)方法主要有如下幾種合成方法：方法一[3]，以3-羧甲基羅丹寧和α-甲基肉桂醛作為起始原料，進(jìn)行縮合反應(yīng)一步制得依帕司他。方法二[4]，以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發(fā)生縮合反應(yīng)，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸經(jīng)烴化、環(huán)合制得中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以冰醋酸為反應(yīng)溶劑，在無(wú)水醋酸鈉催化下與α-甲基肉桂醛進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基羅丹寧的收率為80%，得到依帕司他的收率為60%，總收率為48%。方法三[5]，該方法采用“一鍋煮”的方法，以甘氨酸為起始原料，先和二硫化碳、濃氨水發(fā)生縮合反應(yīng)，所得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，不經(jīng)過(guò)分離，反應(yīng)液先蒸除低沸點(diǎn)物質(zhì)，然后直接加入氯乙酸經(jīng)烴化、環(huán)合反應(yīng)制得中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以冰醋酸為反應(yīng)溶劑，在無(wú)水醋酸鈉催化下與α-甲基肉桂醛進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基羅丹寧的收率為85.3%，得到依帕司他的收率為64%，總收率為54.6%。方法四[6]，是以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發(fā)生縮合反應(yīng)，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸鈉經(jīng)烴化、環(huán)合制得重要中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以無(wú)水乙醇為反應(yīng)溶劑，在濃氨水催化下與α-甲基肉桂醛進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得依帕司他。此方法制得3-羧甲基羅丹寧的收率為86.0%，得到依帕司他的收率為85.2%，總收率為73.3%。

圖2 依帕司他的合成路線Fig.2 Synthetic route of epalrestat

在深入研究和細(xì)致比較文獻(xiàn)報(bào)道的工藝路線的基礎(chǔ)上，沿用以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發(fā)生縮合反應(yīng)，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸鈉經(jīng)烴化、環(huán)合制得重要中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以無(wú)水乙醇為反應(yīng)溶劑，在濃氨水催化下與α-甲基肉桂醛進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得依帕司他粗品，合成路線（見(jiàn)圖2）。

在粗品精制中用甲酸、乙酸及四氫呋喃等溶劑精制得到的產(chǎn)品2Z-異構(gòu)體含量都在0.5%以上，與日本原研藥不高于0.2%的要求差距較大，不符合化學(xué)原料藥達(dá)到或者接近國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)要求[7]。依帕司他對(duì)光不穩(wěn)定，暴露在光甚至它的溶液在室溫下也會(huì)發(fā)生雙鍵的異構(gòu)化，很難保證產(chǎn)品質(zhì)量，為了保證患者的用藥安全，在對(duì)依帕司他合成的同時(shí)，開(kāi)發(fā)了一種高質(zhì)量依帕司他的精制方法。通過(guò)對(duì)精制條件的摸索，最終發(fā)現(xiàn)在避光條件下用1，4-二氧六環(huán)溶解，過(guò)濾，濾液溫度降至50℃～60℃時(shí)，加入80%甲醇水溶液，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，所得成品的異構(gòu)體雜質(zhì)可以控制在0.2%以下，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。此工藝已完成100 L反應(yīng)釜中試放大，且重現(xiàn)性較好。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 色譜條件

照高效液相色譜法（《中國(guó)藥典》2015版四部通則0512）實(shí)驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.4%醋酸（62:38）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為396 nm，流速為1 mL/min；柱溫為30℃。

1.2 測(cè)定方法

嚴(yán)格避光操作，取本品約20 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇15 mL超聲溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；立即取對(duì)照溶液20 μL，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度使主成分峰高約為滿量程的20%，再取上述兩種溶液各20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的2～3倍，在相對(duì)保留時(shí)間為1.0的物質(zhì)為依帕司他主峰，在相對(duì)保留時(shí)間為0.65～0.87的雜質(zhì)峰為依帕司他立體異構(gòu)體，供試品溶液如顯立體異構(gòu)體峰，其峰面積不得大于對(duì)照品溶液主峰面積的1.5倍（1.5%）。

1.3 依帕司他精品的制備方法1

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，800 mL 98%甲酸溶解，加熱回流30 min后，趁熱過(guò)濾，降溫析晶，降溫至55℃保溫析晶4 h抽濾，少量甲酸洗滌，產(chǎn)品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他21.6 g，液相檢測(cè)純度92.18%（見(jiàn)圖3），收率43.2%。

1.4 依帕司他精品的制備方法2

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，500 mL四氫呋喃溶解，加熱至回流，趁熱過(guò)濾，降溫至45℃～50℃保溫析晶4 h抽濾，濾餅少量四氫呋喃洗滌，產(chǎn)品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他36.0 g，液相檢測(cè)純度92.18%（見(jiàn)圖4），收率72.0%。

圖3 甲酸精制色譜圖Fig.3 The HPLC spectrum of formic acid refined epalrestat

1.5 依帕司他精品的制備方法3

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品98.7 g，1，4-二氧六環(huán)200 mL，加熱至完全溶解，過(guò)濾，濾液溫度降至50℃～60℃，加入780 mL 80%的甲醇水溶液，攪拌均勻，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，抽濾，濾餅用少量無(wú)水甲醇（10 mL×3）洗滌，避光50℃真空干燥8 h，得橙黃色細(xì)針狀結(jié)晶性粉末79.5 g，純度99.73%（見(jiàn)圖5），收率為80.5%。熔點(diǎn)225℃～227℃。

圖4 四氫呋喃精制色譜圖Fig.4 The HPLC spectrum of tetrahydrofuran refined epalrestat

圖5 依帕司他精品液相圖Fig.5 The HPLC spectrum of refined epalrestat

2 結(jié)果和討論

在參考文獻(xiàn)基礎(chǔ)上合成了依帕司他粗品，避光下用1，4-二氧六環(huán)先將粗品溶解，過(guò)濾，濾液溫度降至50℃～60℃，加入80%的甲醇水溶液，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，抽濾，所得依帕司他精品純度可達(dá)99.7%，異構(gòu)體雜質(zhì)可以控制在0.2%以下。本方法操作簡(jiǎn)單，周期短，可重現(xiàn)性強(qiáng)，所得產(chǎn)品收率高，對(duì)依帕司他的質(zhì)量控制具有重要參考價(jià)值。