任淑珍 劉啟元 陳華杰

（1 福建平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)醫(yī)院 檢驗(yàn)科，福建 福州 350400；2 福建平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)醫(yī)院 病理科，福建 福州 350400）

人乳頭瘤病毒是一種嗜黏膜和皮膚上皮性病毒，是導(dǎo)致宮頸上皮增生和宮頸癌的主要因素。至今為止，已經(jīng)鑒定的HPV病毒約有100多種，約有30多種可以感染人的生殖道黏膜[1]。宮頸癌的發(fā)生與人乳頭瘤病毒感染人體有密切的關(guān)系[2]。世界衛(wèi)生組織的調(diào)查結(jié)果顯示99.9%的宮頸癌患者可以檢測到HPV感染；國際癌癥研究協(xié)會(huì)（IARC）1995年宣布；HPV感染是宮頸癌的主要原因。在目前發(fā)現(xiàn)的約30多種可感染人生殖道黏膜的HPV中，一部分很容易導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生，稱為高危型HPV；WHO及IRAC確認(rèn)的14種高危型包括HPV16、18、31、35、39、45、51、52、56、58、59、66及68[3]。從HPV感染到發(fā)展成為宮頸癌發(fā)展成為宮頸癌一般需要經(jīng)歷數(shù)年到10年左右時(shí)間，提早檢測高危型HPV進(jìn)而積極治療將有助于清除女性生殖道的持續(xù)感染，防止其向?qū)m頸癌演變。早發(fā)現(xiàn)、早治療，從而降低宮頸癌的發(fā)生率和病死率。本文分析平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)婦女宮頸感染人乳頭瘤病毒狀況，發(fā)現(xiàn)總感染率為8.6%，低于中國婦女以人群基礎(chǔ)的HPV感染狀況的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示HPV的總感染為16.1%[4]。HPV16型導(dǎo)致了全世界一半以上的宮頸癌[5]。而本地區(qū)的16型感染率為1.52%，且感染人群在30～39歲和40～49歲婦女，分別占總感染率的43.36%、34.97%。

1 資料與方法

1.1 一般資料：統(tǒng)計(jì)我院2015年7月開始開展HPV檢測以來至2017年2月檢測HPV總例數(shù)1646例。最小年齡20歲，最大年齡71歲，平均年齡46歲。

1.2 儀器與試劑：CobasZ480熒光PCR儀。上海透景生命科技股份有限公司提供的人乳頭瘤病毒核酸檢測與16/18型試劑盒，采用2+12型，即可具體分型16、18型和其他混合型12種（31、33、35、39、41、51、52、56、58、59、66、68）。北京華運(yùn)安特科技有限責(zé)任公司提供的ZJY-全自動(dòng)雜交儀、雜交液。嚴(yán)格按照試劑說明要求操作以及按《基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理辦法》執(zhí)行操作。

1.3 方法：以統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)取女性非經(jīng)期宮頸脫落細(xì)胞，在采樣前不對陰道進(jìn)行沖洗，采用杭州醫(yī)國仁生物科技有限公司提供的專用宮頸刷采集標(biāo)本，將宮頸刷置入宮頸，約2 cm位置，于宮頸外口鱗狀上皮、柱狀上皮交界處，沿宮頸外口旋轉(zhuǎn)3～4圈，然后取出，置入上海透景生命科技股份有限公司提供的配套細(xì)胞保存液中，嚴(yán)格按照保存液要求將標(biāo)本保存于4 ℃冰箱中。檢測時(shí)，取出宮頸刷，充分漂洗，使用洗脫液做離心處理，保留管底細(xì)胞，加入裂解液，以說明書指示為依據(jù)，提取DNA，以CobasZ480熒光PCR儀擴(kuò)增檢測。每周集中檢測1次標(biāo)本。

1.4 結(jié)果分析與判定：取出雜交儀、雜交液，并做預(yù)熱處理，以標(biāo)記探針處理低密度基因芯片，并將其放置于雜交平臺(tái)上；對擴(kuò)增產(chǎn)物加熱、冰浴，然后置于檢測孔，實(shí)施導(dǎo)流雜交；以封阻液行封閉處理，倒出封阻液，置入酶標(biāo)液，行孵育處理，處理時(shí)間為3 min。以沖洗緩沖液對沖洗膜進(jìn)行沖洗，以NBT/BCIP底物做顯色處理，時(shí)間為5 min。根據(jù)顯色情況分析結(jié)果。以肉眼觀察情況做出判定，呈現(xiàn)藍(lán)紫色圓點(diǎn)則判定為陽性，視為感染，若有多個(gè)陽性點(diǎn)，則判定為混合感染。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對各年齡組婦女感染HPV感染率進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 感染情況分析：統(tǒng)計(jì)2015年7月13日HPV開展以來至2017年2月27日我院門診及住院女性宮頸脫落細(xì)胞HPV檢測，共檢測1646例。HPV總感染例數(shù)143例，總感染率為8.69%。低于全國感染水平，混合型感染例數(shù)103例，感染率為6.26%。16型感染例數(shù)25例，感染率為1.52%，18型感染率為15例，感染率為0.91%。其中16型、18型、混合型同時(shí)陽性2例，18型、混合型同時(shí)陽性1例，即多重混合感染共5例。

2.2 年齡分布情況：見表1。

表1 不同年齡組HPV感染分布情況

2.3 各年齡組占總感染率比較：運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對各年齡段進(jìn)行分組比較，顯示30～39歲、40～49歲感染率高，分別占37.77%、40.56%，P＞0.05無統(tǒng)計(jì)意義。20～29歲、30～39歲占總感染率的11.19%、37.77%，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)意義。得出結(jié)論，平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)HPV感染主要在30～39歲、40～49歲年齡段性活躍期，和性接觸傳染直接相關(guān)。

3 討 論

HPV持續(xù)感染是引起宮頸癌的必要不充分條件，其中HPV16和HPV18型感染是導(dǎo)致宮頸癌最主要的因素[5]。引發(fā)HPV的原因極為復(fù)雜，每個(gè)地區(qū)HPV感染率、各不相同，基因型分布也存在一定差異。我國大規(guī)模多中心的流行病學(xué)研究顯示，宮頸鱗癌中最常見的HPV型分別為HPV16和18型，分別占76.7%和7.8%，隨后依次HPV52（占2.2%），HPV58（占2.2%）和HPV（占2.1%），將HPV風(fēng)險(xiǎn)分層管理有助于提高宮頸癌的篩選效率。由于HPV16和HPV18的高致癌風(fēng)險(xiǎn)，對HPV16、18型陽性人群的篩選和臨床轉(zhuǎn)診十分必要。而致癌風(fēng)險(xiǎn)次之的其他幾種高危型別，對其檢測結(jié)果為陽性的患者通常的處理辦法為定期復(fù)查，筆者認(rèn)為沒有必要對12種型別進(jìn)行分型檢測，因而對本地區(qū)采用透景2+12高危HPV檢測，經(jīng)濟(jì)，實(shí)用。

目前，針對HPV感染者，多予以宮頸癌預(yù)防疫苗控制，以降低其轉(zhuǎn)化為宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。因此盡早診斷、預(yù)防，并指導(dǎo)臨床采取針對性預(yù)防措施十分必要。熒光PCR檢測特異性較好。在研究中筆者對我院門診、住院女性應(yīng)用熒光PCR檢測予以HPV檢測，分析平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)婦女的HPV感染情況，考慮到HPV16、18型是最有致癌風(fēng)險(xiǎn)的基因型，本次研究以HPV16、18型研究為主，在此基礎(chǔ)上將感染嚴(yán)重的混合型納入研究，分析感染率以及年齡分布情況，以期為臨床防治提供科學(xué)指導(dǎo)。至于HPV感染以及分型和宮頸病變和宮頸癌的關(guān)系，還有待后續(xù)研究。

經(jīng)本次數(shù)據(jù)分析顯示，本地區(qū)HPV總感染率為8.69%，而我國感染率為16.1%，提示平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)婦女HPV感染率低于平均水平，發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)低。另外研究發(fā)現(xiàn)該地區(qū)30～49歲年齡段的感染率最高，明顯高于其他年齡段，提示這一年齡段女性為該地區(qū)HPV感染的高危人群。關(guān)于HPV感染人群，國內(nèi)外研究指出各地區(qū)的年齡流行特征各不相同，綜合來看各種基因型HPV感染年齡分布特征呈現(xiàn)出“單峰曲線”、“雙峰曲線”兩種形式，眾多研究者指出25歲以下、55歲以上為HPV感染的高危年齡。但本次研究結(jié)果顯示平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)婦女HPV感染年齡分布特征有其自身特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)其感染者集中于30～49歲，對于其原因，仍需要進(jìn)一步分析，知道該地區(qū)應(yīng)針對性控制HPV感染。整體來看，平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)HPV感染情況并不十分嚴(yán)重，可能與近年來的防控措施有關(guān)，但是仍不可掉以輕心，需加強(qiáng)防控，最大限度降低HPV感染率及其向?qū)m頸癌轉(zhuǎn)化的風(fēng)險(xiǎn)。研究顯示30～49歲為該地區(qū)HPV感染的多發(fā)年齡，因此在防治過程中要重點(diǎn)關(guān)注這一年齡段女性。

HPV診斷能有效、準(zhǔn)確鑒別宮頸癌前病變，因此控制HPV感染的關(guān)鍵在于加大篩查力度、定期檢測，一般認(rèn)為篩查年齡應(yīng)該從21歲開始，21歲以下HPV感染發(fā)生率很低，而55歲女性進(jìn)入絕經(jīng)期，也增加了宮頸癌變的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，因此篩查范圍必須囊括老年女性。本次研究顯示30～49歲婦女為該地區(qū)HPV感染的多發(fā)年齡，因此應(yīng)重點(diǎn)對這一年齡段女性進(jìn)行篩查，推廣、普及這一年齡段女性的HPV篩查。對于發(fā)生HPV感染的患者，盡早予以宮頸癌疫苗控制，以降低宮頸癌的發(fā)生率。這樣能夠提升HPV感染的防治效果，保證女性的身心健康。

綜上所述，平潭綜合實(shí)驗(yàn)區(qū)婦女HPV感染率相對低于我國平均水平，感染年齡集中在30～49歲，應(yīng)作為控制重點(diǎn)人群。