許光勇，王朝軍，周海深，徐 利，盧紀和，麻文靜

（1．北京養(yǎng)豬育種中心，北京 100194；2．中國農業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 100193）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine re productive and respiratory syndrome，PRRS），又稱“豬藍耳病”，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reprodu ctive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種伴有繁殖障礙及呼吸癥狀的傳染病，其臨床上常見妊娠母豬中后期流產、早產，窩均死胎、木乃伊胎和弱仔數(shù)量明顯增多，商品豬伴隨咳嗽、喘及呼吸困難等癥狀[1-2]。有關PRRS，1987年在美國出現(xiàn)，2006年在中國暴發(fā)，迄今仍是危害中國養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的傳染病之一。由于PRRSV屬RNA病毒，其極易變異重組的特征，以及國內疫苗的不當使用，導致出現(xiàn)的PRRSV種類越來越復雜，防控工作也越來越困難。因此，本試驗就陰性法系純種大白豬的PRRS免疫抗體消長規(guī)律進行探討，該結果對臨床防控PRRS具有應用價值。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

50頭法系純種大白母豬來自于新建豬場的后備種豬群，檢測結果顯示，該群PRRS和豬偽狂犬gE抗體均為陰性，豬瘟病原陰性。由于主動和被動淘汰，試驗結束時剩余33頭。

1.2 方法

全部后備種豬肌注經(jīng)典株PRRS減毒活疫苗1頭份，母豬間隔40周再次免疫1頭份。

首免后3周、6周、10周、20周、27周、33周、39周，43周（二免后3周）、59周（二免后19周）、70周（二免后30周）、85周（二免后45周）前腔靜脈采血，分離血清并于-20℃冰箱保存，ELISA法檢測PRRS抗體。

1.3 結果判定

PRRS X3抗體檢測試劑盒，美國IDEXX公司，批號J661。參照試劑盒說明書進行操作，如果S/P值低于0．40，樣品判定為PRRSV抗體陰性；如果S/P值大于或等于0．40，樣品判定為PRRSV抗體陽性。S/P值=（樣本A650－陰性對照平均值）/（陽性對照平均值－陰性對照平均值），CV值又稱離散度=（標準偏差/樣本平均值）×100%，抗體陽性率=（S/P值大于或等于0．4的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）×100%。

2 結果與分析

整個試驗時間為2016年4月至2017年12月，試驗開始有50頭法系純種大白母豬參與，試驗結束時剩余33頭，連續(xù)跟蹤采集血液樣品11次，ELISA法檢測PRRS抗體，試驗結果由33頭有效數(shù)據(jù)整理而得，其S/P值、離散度和抗體陽性率見圖1、圖2。

由圖1結果可知，法系純種大白豬在首次免疫PRRS活疫苗后，S/P均值隨時間推移逐漸下降，但加強免疫后會出現(xiàn)再一次升高，觀察到S/P值的峰值為1．61，出現(xiàn)于首免后3周。離散度隨時間逐漸升高，并于首免后27周達到峰值93．10%，隨后逐漸下降，維持在59．65%～85．16%間，由結果可以看出，再次免疫并不能長期地降低離散度水平。

由圖2結果可知，首次免疫PRRS活疫苗后，抗體陽性率能夠達100%，且高陽性率維持了至少10周時間，然后其值隨時間逐漸降低，再次免疫會暫時提高抗體陽性率。S/P值處于0．4～2．0區(qū)間個體所占比例在首次免疫后10周達到了96．97%，說明法系純種大白母豬對PRRS活疫苗產生了良好的免疫應答。

3 討論

陰性法系純種大白母豬在首次免疫PRRS活疫苗后，抗體S/P均值和陽性率均隨時間推移逐漸下降，再次加強免疫時會出現(xiàn)再一次上升的現(xiàn)象，本結果與施開創(chuàng)等[3]報道的接種PRRS活疫苗能夠提高抗體水平結果一致。離散度或CV值的變化趨勢與前兩者相反，其值隨時間逐漸升高，且長期維持在較高水平。從圖中結果觀察到，S/P均值在首次免疫 3周時為 1．61，6周為 1．14，隨后逐漸下降，在39周時降到0．40，由此得知，S/P值達到峰值時間應該是在首次免疫6周之前的時間，有可能是3周之前；再免后S/P均值會出現(xiàn)升高，但到70周（再免后30周）已經(jīng)降至0．18?？贵w陽性率在首免后10周前，保持在96．97%以上，然后隨時間推移逐漸下降，在39周時降到36．36%；再免后抗體陽性率會出現(xiàn)升高，但到59周（再免后19周）和70周（再免后30周）已經(jīng)分別降至33．33%和3．03%，由此得知，抗體陽性率在后期下降非常迅速。離散度隨時間推移其值逐漸升高，并于首免后27周達到峰值，隨后開始降低，但仍維持在高水平范圍，只有在首免后10周之前處于40%以內，其他時間均處于60%以上，由此得知，陰性法系純種大白母豬在免疫PRRS活疫苗后抗體保持較好的整齊度時間并不會很長。免疫后S/P值個體分布在0．4～2．0區(qū)間內較為理想，該區(qū)間值代表免疫后產生了良好的抗體，由結果得知，在首免后20周之前，S/P值個體分布在0．4～2．0所占比例在72%以上，隨后S/P值低于0．4的個體越來越多，在70周（再免后30周）抗體陰性率達到了96．97%；雖然在首免后3周和再免后3周均出現(xiàn)了3．03%的S/P值大于2．5個體，但很快就下降了，這應該是個體差異所導致。

圖1 大白母豬PRRS免疫抗體S/P均值及CV值變化

圖2 大白母豬PRRS免疫抗體陽性率及S/P值區(qū)間分布百分比

綜上，S/P均值降至0．4時間為免疫后39周，抗體陽性率于免疫后33周為48．48%，認為法系純種大白母豬首免后33周之前抗體應該是有效的。85周抗體陽性率為0%，說明再免抗體陽性持續(xù)時間不超過45周。但如果要使個體離散度更加均勻，應該縮短免疫間隔。因此，養(yǎng)豬生產中若需長期維持豬群處于陽性穩(wěn)定狀態(tài)，認為法系純種大白母豬應該2年免疫3次較為合理。

4 結論

陰性法系純種大白母豬免疫PRRS活疫苗，抗體陽性率和S/P值隨時間推移逐漸下降，再免能暫時提高兩者水平，離散度隨時間先升高后降低，抗體持續(xù)有效時間大概為33周。