黃小紅 李小勇 曹巖 段凱文 羅芬芳 王慧君

(1.江西生物科技職業(yè)學院，江西南昌330200； 2.江西省水產(chǎn)技術推廣站，江西南昌330046；3.上饒市弋陽縣農(nóng)業(yè)局水產(chǎn)站，江西上饒334400)

抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是由生物體經(jīng)過誘導產(chǎn)生的具有抗菌作用的小分子多肽，主要用于宿主防御病原微生物的入侵，是一類重要分子屏障，抗菌肽與傳統(tǒng)的抗生素相比，具有相對分子質(zhì)量較小、熱穩(wěn)定性較強、強堿性、水溶性好、作用機制獨特、活性高、不易產(chǎn)生耐藥性、無免疫原性以及不破壞生物體細胞等諸多優(yōu)勢。天蠶素抗菌肽是抗菌肽眾多族類中非常重要的一種，具有無毒性殘留及抗藥性等優(yōu)點。研究表明，飼料中添加抗菌肽對湘云鯽、吉富羅非魚、鯉魚、鳙魚、草魚、紅姑魚、凡納濱對蝦等水產(chǎn)動物具有提高生長性能、增強機體的抗氧化和免疫功能等作用。盡管目前有抗菌肽作為飼料添加劑在草魚生產(chǎn)中應用，但有關天蠶素抗菌肽在草魚生產(chǎn)中的應用研究報道較少。

本研究以草魚為試驗對象，探討在基礎飼料中添加不同水平的天蠶素抗菌肽對草魚各項生長指標的影響，為天蠶素抗菌肽在草魚健康養(yǎng)殖中的合理使用提供理論參考。

1 試驗材料和方法

1.1 試驗飼料和設計

天蠶素抗菌肽由北京中農(nóng)穎泰生物技術有限公司贈予，飼料原料購于南昌海聯(lián)飼料有限公司和江西九久牧業(yè)有限公司，所用原料經(jīng)粉碎后過40目篩，混勻加水后用小型制粒機制成粒徑2.0mm左右的顆粒，然后烘干放于冰箱冷藏備用。試驗共分空白對照組(基礎日糧不添加天蠶素抗菌肽，0mg/kg)，抗菌肽1組、抗菌肽2組和抗菌肽3組分別在基礎飼料中添加了天蠶素抗菌肽300mg/kg，400mg/kg，500mg/kg?；A飼料配方為豆粕27%、菜粕30%、米糠12.0%、魚粉2.0%、谷朊粉0.5%、α-淀粉16.2%、次粉7.2%、豆油1.5%、磷酸二氫鈣2.0%、魚用多維0.1%、魚用多礦1.0%。

1.2 試驗飼養(yǎng)管理

本次試驗草魚苗購自南昌神龍漁業(yè)，體重為(56.25±2.26)g/尾，試驗地點選擇江西生物科技職業(yè)學院水循環(huán)實訓中心，試驗時選取個體活潑、健康的魚苗置于水循環(huán)系統(tǒng)中暫時養(yǎng)殖2周后，將草魚苗分為4組，每組分3個重復，每個重復共35尾魚，將魚苗隨機放入12個水族箱中，試驗水溫控制在25℃左右，每天早上9:00、下午18:00分別投料1次，喂料同時觀察魚的采食情況，投餌量依據(jù)試驗魚重量以及天氣情況適當增減。同時精確記錄每組飼料投喂量和草魚攝食情況、草魚活動情況及魚死亡情況等。試驗期間每2天換水1/2～1/3，每天24h不間斷充氧。試驗期為49天。

1.3 采樣及指標測定

在試驗開始時和試驗結(jié)束后(禁食24h)，從每組隨機選取草魚15尾(其中每個重復分別5尾)，分別測定草魚的體長、體高及體重，計算增重率(WGR)、成活率、特定生長率(SGR)、相對增重率、餌料系數(shù)(FCR)，公式如下：

特定生長率(SGR，%/d)=100%×(ln終末體重-ln初始體重)/飼養(yǎng)天數(shù)

餌料系數(shù)(FCR)=總投料量/增重量

肥滿度(CF)=體重(g)/體長(cm)3×100%

成活率(SR，%)=存活尾數(shù)/初始尾數(shù)×100%

增重率(WGR，%)=(末均重-初均重)/初均重×100%

1.4 試驗數(shù)據(jù)處理

試驗結(jié)果表示為平均值±標準差(X±SD)。數(shù)據(jù)先采用Excel2010進行處理后，然后用SPSS17.0進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著表示為P<0.05，極顯著為P<0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料添加天蠶素抗菌肽對草魚增重率和特定生長率的影響

飼料添加天蠶素抗菌肽草魚增重較快，與對照組相比，飼料添加不同水平的天蠶素抗菌肽增重率和特定生長率均有升高趨勢，添加500mg/kg天蠶素抗菌肽組末均重、增重率、特定生長率均顯著高于對照組(P<0.05)，分別提高了8.47%、35.05%、25.72%。其他組間差異不顯著(P>0.05)(結(jié)果見表1)。

表1 飼料添加不同水平天蠶素抗菌肽對草魚生長性能的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩標相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2 飼料添加天蠶素抗菌肽對草魚餌料系數(shù)及肥滿度的影響

由表1可見，飼料添加天蠶素抗菌肽有助于降低餌料系數(shù)，與對照組相比，300mg/kg、400mg/kg、500mg/kg天蠶素抗菌肽組餌料系數(shù)分別降低了14.9%、9.78%、11.23%；但差異不顯著(P>0.05)。所有抗菌肽組與對照組相比，肥滿度及成活率差異均不顯著(P>0.05)。但添加抗菌肽組草魚成活率均有升高趨勢。因此，飼料添加天蠶素抗菌肽可提高草魚飼料利用率和成活率，降低飼養(yǎng)成本。

3 討論

隨著現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，工廠化、集約化養(yǎng)殖模式越來越普遍，養(yǎng)殖密度不斷增加，導致水產(chǎn)動物患病率不斷上升，養(yǎng)殖戶普遍采用飼料添加抗生素等來預防疾病和促進魚類生長，導致水產(chǎn)動物抗藥性增強、藥物殘留、水質(zhì)變差等不良反應。抗菌肽作為一種新型的飼料添加劑已在畜牧、水產(chǎn)業(yè)中得到應用，王莉等在日糧中添加天蠶素抗菌肽能提高817肉雜雞的生長性能和免疫功能。孫雪梅等在保育料及教槽料中添加天蠶素抗菌肽后，有明顯提高仔豬日增重并仔豬減少腹瀉的功效，可作為硫酸黏桿菌素替代品添加至飼料中使用。宋瓊莉等研究發(fā)現(xiàn)在青腳麻雞日糧中添加抗菌肽和益生菌復合添加劑，可提高青腳麻雞的生長性能和屠宰性能。丁修良等研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加300 mg/kg抗菌肽Sublancin，可通過提高飼料養(yǎng)分利用率及減少腸道有害細菌數(shù)量，從而提高肉雞生長性能。添加150mg/kg和200mg/kg的天蠶素抗菌肽對湘云鯽有促生長效果，可提高湘云鯽的溶菌酶活性，添加200mg/kg和250mg/kg可使湘云鯽血清中超氧化物歧化酶活性顯著提高。本試驗結(jié)果顯示，在草魚飼料中添加500mg/kg天蠶素抗菌肽組末均重、增重率、特定生長率均顯著高于未添加組，但對餌料系數(shù)、肥滿度、成活率沒有顯著影響。綜合各項指標，本次試驗在草魚飼料中添加天蠶素抗菌肽的適宜量為500mg/kg。這與王四新等試驗使用劑量不同，這可能與抗菌肽種類及試驗動物養(yǎng)殖環(huán)境不同有關。

由此可見天蠶素抗菌肽作為一種新型的綠色環(huán)保產(chǎn)品添加到飼料中，不但可以降低餌料系數(shù)，提高成活率，提高生長性能，同時能夠提高機體免疫力，從而降低養(yǎng)殖成本，提高經(jīng)濟效益。天蠶素抗菌肽的有效使用，將推動養(yǎng)殖業(yè)綠色安全健康發(fā)展。