張翠莉 施茗熙

(中國(guó)人民解放軍第903醫(yī)院健康管理中心，浙江 杭州 310000)

我國(guó)是食管癌發(fā)病率最高的國(guó)家之一〔1〕，食管鱗癌(ESCC)發(fā)病率在美國(guó)有逐漸下降趨勢(shì)，而在我國(guó)發(fā)病率仍逐年上升〔2，3〕。而由于目前國(guó)內(nèi)外對(duì)ESCC缺乏早期診斷方法，臨床確診時(shí)已經(jīng)有80%處于中晚期，患者5年生存率僅為15%～20%〔4〕。對(duì)于中晚期ESCC患者，臨床治療主要以放化療為主的綜合治療，但患者總體有效率并不高〔5〕。因此尋找合適的靶點(diǎn)有效判斷ESCC患者放化療療效對(duì)于ESCC患者的臨床治療和預(yù)后具有重大意義。本研究探討血清miR-623表達(dá)水平與老年局部晚期ESCC患者放化療療效的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2015年1月至2017年1月中國(guó)人民解放軍第903醫(yī)院收治的老年局部晚期ESCC患者77例作為研究對(duì)象，患者自愿入組，且簽署知情同意書，男45例，女32例，年齡60～82〔平均(67.38±7.32)〕歲。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)診斷的原發(fā)性ESCC首診患者；②TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期；③年齡≥60歲；④預(yù)計(jì)生存期≥6個(gè)月；⑤無(wú)機(jī)體主要臟器功能障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：①曾接受過(guò)手術(shù)、放療和化療患者；②繼發(fā)性ESCC患者；③合并其他惡性腫瘤患者。

1.3檢查及評(píng)估 采集患者一般資料，包括性別、年齡、病變部位、TNM分期等。并進(jìn)行血常規(guī)、尿常規(guī)、肝腎功能、電解質(zhì)及心電圖檢查；治療前后及時(shí)行胸部增強(qiáng)CT、上消化道造影、上腹部B超/CT檢查；并進(jìn)行全面體格檢查及ECOG全身狀況評(píng)估，細(xì)胞免疫功能評(píng)估等。

1.4治療方案 放療：采用三維適形調(diào)強(qiáng)放療(IMRT)，照射靶區(qū)包括原發(fā)病灶、陽(yáng)性淋巴結(jié)病灶、亞臨床病灶及相應(yīng)的淋巴結(jié)引流區(qū)；處方劑量95%計(jì)劃靶體積(PTV)50～60 Gy/25～30次。放療：從放療第1天開(kāi)始同步化療，化療2個(gè)周期，放療結(jié)束后再鞏固2個(gè)周期，化療方案為60 mg/m2多西他賽 d1，25 mg/m2順鉑，d2～d4，以21 d為1個(gè)周期。

1.5療效評(píng)價(jià)及分組 按照“食管癌放療后近期療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)”(2000年版)進(jìn)行療效評(píng)價(jià)，陽(yáng)性淋巴結(jié)病灶按照實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)1.1版進(jìn)行評(píng)價(jià)，綜合考慮后將患者分為兩組：放化療抵抗組(31例)，患者治療后6個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)局部進(jìn)展或淋巴結(jié)進(jìn)展/轉(zhuǎn)移或血運(yùn)轉(zhuǎn)移；放化療敏感組(46例)，患者治療后6個(gè)月以上未出現(xiàn)局部進(jìn)展、淋巴結(jié)進(jìn)展/轉(zhuǎn)移及血運(yùn)轉(zhuǎn)移。

1.6血清miRNA-623表達(dá)水平檢測(cè) 采用QIAGEN miRNA試劑盒提取血清總RNA，采用QIAGEN逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行定量逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，采用實(shí)時(shí)定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)miRNA-623表達(dá)水平，選取U6作為內(nèi)參，miRNA-623表達(dá)水平分別通過(guò)U6進(jìn)行歸一化，采用2-ΔΔCt計(jì)算miRNA-623相對(duì)表達(dá)量。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)，對(duì)可能影響放化療療效的各因素進(jìn)行單因素分析及多因素Logistic回歸分析，采用受試者工作特征(ROC)曲線分析血清miR-623表達(dá)水平對(duì)老年局部晚期ESCC患者放化療療效預(yù)測(cè)價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1老年局部晚期ESCC放化療療效單因素分析 對(duì)可能影響老年局部晚期ESCC放化療療效進(jìn)行單因素分析，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期及血清miRNA-623表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2老年局部晚期ESCC放化療療效Logistic回歸分析 對(duì)上述單因素分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的各因素采取Logistic回歸分析，結(jié)果顯示臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血清miRNA-623表達(dá)水平進(jìn)入回歸模型(P<0.05)，為影響老年局部晚期ESCC患者放化療療效的重要因素，見(jiàn)表2。

表1 老年局部晚期ESCC放化療療效單因素分析(n)

表2 老年局部晚期ESCC放化療療效Logistic回歸分析

2.3血清miRNA-623表達(dá)水平對(duì)老年局部晚期ESCC患者放化療療效預(yù)測(cè)價(jià)值 采用ROC曲線分析血清miRNA-623表達(dá)水平對(duì)老年局部晚期ESCC患者放化療療效預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示，血清miRNA-623表達(dá)水平對(duì)患者放療療效預(yù)測(cè)曲線下面積為0.867，見(jiàn)圖1。

圖1 血清miRNA-623表達(dá)水平對(duì)老年局部晚期ESCC患者放化療療效的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

miRNA屬于非蛋白編碼的RNA，是由長(zhǎng)的內(nèi)源性表達(dá)的RNA前體所產(chǎn)生，一個(gè)miRNA可調(diào)控多個(gè)基因的表達(dá)〔6，7〕。目前miRNA可用于臨床腫瘤的診斷、病理分型及療效預(yù)測(cè)中，成為一種新興的生物標(biāo)志物〔8〕。研究顯示〔9，10〕，miRNA-623在ESCC組織及癌旁正常組織中表達(dá)具有顯著差異，提示miRNA-623可能與ESCC的發(fā)生發(fā)展具有密切的聯(lián)系。局部晚期ESCC患者臨床治療以聯(lián)合放化療為主，我國(guó)食管癌治療指南對(duì)非手術(shù)患者推薦治療方案為同步放化療〔11，12〕。與單純放療相比，同步放化療患者5年生存率明顯提高，但即使在相同的病理分期及相同的治療方案條件下，進(jìn)行同期放化療的患者在治療中仍存在治療敏感及治療抵抗兩種不同的效果，因此尋找有效的分子標(biāo)志物預(yù)測(cè)患者放化療敏感性，可為患者的臨床治療提供有力的參考依據(jù)〔13，14〕。本研究結(jié)果顯示，ESCC患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血清miRNA-623表達(dá)水平為影響患者放化療療效的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。在臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移因素上，已經(jīng)得到了目前大部分學(xué)者的認(rèn)同，臨床分期越高、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，其放化療后出現(xiàn)局部進(jìn)展或淋巴結(jié)進(jìn)展/轉(zhuǎn)移或血運(yùn)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)也越高〔15，16〕。本研究結(jié)果提示血清miRNA-623表達(dá)水平可作為預(yù)測(cè)老年局部晚期ESCC患者放化療療效的重要指標(biāo)之一。關(guān)于血清miRNA-623表達(dá)水平影響放化療敏感性的機(jī)制，推測(cè)可能與其參與核因子(NF)-κB信號(hào)通路有關(guān)。NF-κB作為一種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，通路的激活可通過(guò)放療誘導(dǎo)而導(dǎo)致ESCC患者放療抗拒〔15，17〕。此外，miRNA-623還可能通過(guò)更為復(fù)雜的信號(hào)通路及靶基因相互調(diào)控發(fā)揮作用，還需要進(jìn)一步深入研究分析〔18，19〕。

綜上所述，ESCC患者臨床分期高、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血清miRNA-623低表達(dá)是影響老年局部晚期ESCC患者同步放化療治療療效的重要因素，血清miRNA-623表達(dá)水平對(duì)患者放化療療效具有良好的預(yù)測(cè)價(jià)值，可作為臨床潛在指標(biāo)之一。