李夢(mèng)云,張清海,趙 武,薛西銀,常夢(mèng)雅,郭金玲
(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院飼料工程中心,河南 鄭州 450046;2.河南普尼爾生物制藥有限公司,河南 新鄉(xiāng) 453700)
斷奶是仔豬出生后面臨的最大應(yīng)激,飼料與環(huán)境的改變最終導(dǎo)致仔豬在斷奶1周內(nèi)采食降低、負(fù)增重、腹瀉,嚴(yán)重的甚至死亡。其實(shí)質(zhì)則是仔豬腸道損傷,腸道結(jié)構(gòu)和功能的改變,即腸絨毛萎縮,從而誘發(fā)厭食、腹瀉以及生長(zhǎng)抑制等一系列癥狀。因此,調(diào)控仔豬腸道健康,提高仔豬斷奶后日增重、降低仔豬腹瀉和死亡率是提高仔豬生產(chǎn)性能的關(guān)鍵措施。研究表明,仔豬日糧中添加如酸化劑、植物提取物和殼寡糖等飼料添加劑,均能夠調(diào)控腸道健康,緩解并改善仔豬斷奶應(yīng)激綜合征。但以上研究均是以單一或兩種復(fù)合的固態(tài)形式添加,在斷奶仔豬上用液態(tài)的復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑的研究還比較少,特別是針對(duì)其在仔豬斷奶1周內(nèi)的生理變化的研究更是沒(méi)有。因此,本試驗(yàn)旨在研究仔豬在斷奶1周內(nèi)添加復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)仔豬生產(chǎn)性能、腸道微生物及腸道結(jié)構(gòu)的影響,為解決或延緩仔豬斷奶一周內(nèi)腹瀉問(wèn)題而研制新型安全仔豬腸道調(diào)節(jié)劑提供理論數(shù)據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑為斷奶仔豬專(zhuān)用,由河南普尼爾生物制藥有限公司提供,主要成分為酸化劑、中藥提取物、殼寡糖、復(fù)合離子調(diào)節(jié)劑,測(cè)得pH值為3.16,有機(jī)酸含量97.8 g/kg。產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(hào)為預(yù)飼添字(2016)153007。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組 挑選20日齡仔豬105頭,斷奶之前屠宰5頭,余下100頭在21日齡斷奶后分為對(duì)照組和試驗(yàn)組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭豬,對(duì)照組仔豬喂教槽料,試驗(yàn)組豬在每次喂料后補(bǔ)喂復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑。試驗(yàn)從斷奶當(dāng)天至斷奶第8天結(jié)束,共計(jì)7 d。測(cè)定仔豬生產(chǎn)性能、斷奶后第2天、4天和8天各消化道微生物數(shù)量及腸道結(jié)構(gòu)。
1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)豬以圈為單位飼養(yǎng),飼喂顆粒教槽料,日喂5 次,分別為7:00、10:00、13:00、16:00和19:00,每次以吃飽后食槽中略有余料為度,自由飲水。復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑原液用體積比1∶9兌水稀釋后,試驗(yàn)組豬斷奶當(dāng)天開(kāi)始飼喂,每天喂5次,每次在飼喂教槽料后進(jìn)行,喂量為每頭仔豬平均每天50~200 mL,各圈豬飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致,在斷奶后第2、4、8天每個(gè)重復(fù)分別挑體重接近的仔豬屠宰,測(cè)腸道微生物和腸道結(jié)構(gòu)。
1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法
1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 分別于試驗(yàn)的第1天、第8天早上8:00空腹稱(chēng)重,根據(jù)初重和末重計(jì)算平均日增重,并根據(jù)采食量計(jì)算料重比。
1.4.2 腹瀉率 每天上午8:00點(diǎn)定時(shí)觀察仔豬糞便情況,記錄腹瀉頭數(shù),計(jì)算腹瀉率。
1.4.3 腸道微生物區(qū)系 試驗(yàn)第0、2、4、8天,仔豬屠宰后,分別取十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物各5 g,培養(yǎng)乳酸菌、大腸桿菌和雙歧桿菌用,具體方法見(jiàn)文獻(xiàn)[5]。菌群數(shù)量用1 g腸道內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)(IgCFU)/g表示。
1.4.4 小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu) 試驗(yàn)第0、2、4、8天,每個(gè)重復(fù)取十二指腸中部2 cm的腸段,放入4%甲醛溶液中固定,經(jīng)水洗、透明、浸蠟、包埋等處理后,在室溫下切成5 μm厚的切片,用于形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察,100倍顯微鏡下用標(biāo)尺測(cè)量20根最長(zhǎng)絨毛高度和相應(yīng)的隱窩深度。絨毛高度以腸腺開(kāi)口至絨毛頂端的垂直高度為準(zhǔn),隱窩深度為絨毛根部上皮凹陷到固有層的距離,并計(jì)算絨毛高度與隱窩深度比值(V/C)。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件17.0對(duì)對(duì)照組和試驗(yàn)組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響
表1數(shù)據(jù)表明,試驗(yàn)組平均日增重高于對(duì)照組,但未達(dá)到顯著水平(P>0.05),腹瀉率顯著低于對(duì)照組(P<0.05)而采食量與料肉比無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表1 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響
2.2 對(duì)斷奶仔豬腸道微生物的影響 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)斷奶仔豬腸道乳酸菌、大腸桿菌和雙歧桿菌的影響見(jiàn)表2~3、4。數(shù)據(jù)表明,給仔豬補(bǔ)飼復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑,十二指腸和結(jié)腸乳酸菌數(shù)量分別在斷奶后第8天和斷奶后第2天顯著增加(P<0.05)。另外,十二指腸大腸桿菌數(shù)量在斷奶后第2天、空腸大腸桿菌數(shù)量在斷奶后第8天均顯著降低(P<0.05)。十二指腸中雙歧桿菌數(shù)量在斷奶后第8天顯著增加(P<0.05),盲腸和結(jié)腸中雙歧桿菌數(shù)量在斷奶后第2天和第8天均顯著增加(P<0.05)。
表2 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)腸道乳酸菌的影響
表3 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)腸道大腸桿菌的影響
2.3 對(duì)腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響 表5數(shù)據(jù)表明,試驗(yàn)組十二指腸絨毛高度和V/C在斷奶后第2天、4天和8天均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),隱窩深度則在斷奶后第4天和8天顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。
表4 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)腸道雙歧桿菌的影響
表5 復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑對(duì)斷奶仔豬十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
3.1 斷奶仔豬對(duì)生產(chǎn)性能的影響 仔豬斷奶期間,特別是斷奶的第1周,飼料和環(huán)境等多種因素的改變對(duì)仔豬產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激,導(dǎo)致較低的采食量和較嚴(yán)重的腹瀉進(jìn)而影響生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)研究表明,給仔豬斷奶一周內(nèi)補(bǔ)充復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑,可顯著提高平均日增重,降低仔豬腹瀉率。復(fù)合腸道劑調(diào)節(jié)劑對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響可能是多方面的。其中的酸化劑,給仔豬提供可以直接被吸收的能量,滿(mǎn)足仔豬養(yǎng)分需求。并降低胃腸道pH值,抑制病原微生物的繁殖,提高內(nèi)源酶的分泌、并促進(jìn)礦物質(zhì)的溶解,因而有利于提高動(dòng)物生產(chǎn)性能[1]。Ahmed等(2014)[2]研究也表明,斷奶仔豬日糧中補(bǔ)充檸檬酸可提高日增重,改善飼料轉(zhuǎn)化率。另外,植物提取物和寡糖類(lèi)含有的免疫增強(qiáng)劑可提高機(jī)體免疫力,從而提高機(jī)體抗病力,降低腹瀉。 Bontempo等(2014)[3]給斷奶仔豬飲用水中添加有茶葉和石榴中提取的植物提取物,發(fā)現(xiàn)可顯著提高日增重和飼料轉(zhuǎn)化率,并對(duì)仔豬腸道健康有很明顯的改善作用,因而顯著降低了仔豬腹瀉。而且其中的離子平衡調(diào)節(jié)劑,可補(bǔ)充電解質(zhì),維持內(nèi)環(huán)境平衡,也可有效降低腹瀉。
3.2 對(duì)斷奶仔豬腸道微生物的影響 仔豬斷奶一周內(nèi)由于受到斷奶、飼料、病原微生物等各種因素的應(yīng)激,導(dǎo)致胃腸道菌群的失調(diào),進(jìn)而引發(fā)腹瀉,降低仔豬生產(chǎn)性能。而酸化劑、植物提取物和殼寡糖均可調(diào)節(jié)腸道菌群。酸化劑中的有機(jī)酸本身就可以進(jìn)入病原細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),破壞其正常的生理功能,進(jìn)而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖,從而調(diào)節(jié)腸道菌群[4]。冷向軍等[5]在仔豬日糧中添加0.25%復(fù)合酸化劑,發(fā)現(xiàn)顯著降低了結(jié)腸大腸桿菌數(shù)量,增加乳酸桿菌數(shù)量的趨勢(shì)。植物提取物及其活性成分因具有抗菌、抗炎和抗寄生蟲(chóng)等特性,已廣泛應(yīng)用于調(diào)控仔豬腸道健康。劉容珍等[6]研究表明,在仔豬日糧中添加0.3%植物提取物,可使仔豬盲腸內(nèi)的雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)分別增加69.65%和29.69%,而大腸桿菌則下降了84.38%。殼寡糖是一種通過(guò)殼聚糖降解得到的對(duì)生物機(jī)體功能有很大影響的高分子化合物,飼糧中添加殼寡糖可以抑制有害菌的生長(zhǎng),影響腸道菌落形成,改善機(jī)體腸道環(huán)境,從而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[7]。 kong等(2014)[8]斷奶仔豬日糧中添加0.5 g/kg殼寡糖,表明可以提高回腸和結(jié)腸有益菌的含量而抑制有害菌的含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明,給仔豬補(bǔ)飼復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑,在斷奶后1周內(nèi)可顯著增加腸道乳酸菌數(shù)量和雙歧桿菌數(shù)量,顯著降低大腸桿菌數(shù)量,這可能是腸道保健劑中酸化劑、植物提取物和殼寡糖綜合作用的結(jié)果。
3.3 對(duì)斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響 小腸是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收利用的主要場(chǎng)所,腸絨毛高度和隱窩深度反映小腸的功能狀態(tài),絨毛高度越高,隱窩深度越淺越利于飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。李鵬等(2009)[9]在斷奶仔豬日糧中添加0.3%所研制的磷酸型和乳酸型酸化劑均可以顯著增加小腸絨毛高度。Wan等(2017)[10]的最新研究表明,給斷奶仔豬日糧中添加100 mg/kg殼寡糖,顯著提高了十二指腸絨毛高度。華衛(wèi)東等[11]通過(guò)給斷奶仔豬飼喂含有微生態(tài)制劑和酸化劑的復(fù)合仔豬腸道保健劑,發(fā)現(xiàn)可提高養(yǎng)分消化率和消化酶活性,從而改善仔豬生產(chǎn)性能。但他們沒(méi)有測(cè)定腸道菌群和腸道結(jié)構(gòu)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,斷奶一周內(nèi)給仔豬補(bǔ)充復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑,在斷奶第2、4天和第8天均可提高十二指腸絨毛高度,降低隱窩深度,這表明本試驗(yàn)中的復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑可以可改善腸道結(jié)構(gòu),促進(jìn)腸道健康。
給仔豬補(bǔ)飼含有酸化劑、植物提取物、殼寡糖等的復(fù)合腸道調(diào)節(jié)劑,可以調(diào)控腸道微生物,改善腸道結(jié)構(gòu),促進(jìn)腸道健康,從而有效提高仔豬斷奶一周內(nèi)的生產(chǎn)性能,降低仔豬腹瀉率。