王芳，杜鵬，茅向軍

(1. 遵義醫(yī)學院，貴州 遵義 563000；2.貴州省食品藥品檢驗所，貴州 貴陽 550004；3.貴陽醫(yī)科大學附屬醫(yī)院，貴州 貴陽 550004)

清開靈是國家中藥保護品種，由膽酸、豬去氧膽酸、水牛角、黃芩苷、金銀花、梔子、板藍根和珍珠母等8味藥材組成。在病毒感染性疾病的治療方面獨樹一幟，發(fā)揮了西藥不可替代的作用，被譽為中藥的“抗生素”[1]。但該組方中藥味較多、化學成分復雜，質(zhì)量不易控制，隨著臨床應(yīng)用的日益廣泛，發(fā)現(xiàn)與其使用說明書中未提及的不良反應(yīng)報告也逐漸增多[2]。據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理總局網(wǎng)站2015年不良反應(yīng)數(shù)據(jù)公示，清開靈注射劑居于榜首。因而，提高清開靈的質(zhì)量標準刻不容緩。

1 質(zhì)量標準研究

1.1現(xiàn)行質(zhì)量標準注射用清開靈(凍干)現(xiàn)行標準為：YBH02472003-2006(Z)，由國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布實施。但該標準僅對含氮量、黃芩苷、梔子苷、綠原酸和膽酸單一指標進行含量測定，但有時即使含量測定符合相關(guān)規(guī)定，仍難以保證清開靈的質(zhì)量安全，應(yīng)增加其它質(zhì)量控制方法進一步確保該制劑的安全有效。

1.2清開靈質(zhì)量標準國內(nèi)外研究現(xiàn)狀目前針對清開靈質(zhì)量控制方面的研究已有報道，其中研究清開靈君藥中膽酸類成分的文獻較多，但大多是針對膽酸和豬去氧膽酸的定量研究[3-7]。張加余等[8]研究清開靈注射液中膽汁酸類成分的ESI-MS/MS裂解規(guī)律，快速鑒定了14個膽汁酸類成分。Zhang等[9]采用液相-飛行時間質(zhì)譜(LC/TOF-MS)聯(lián)用技術(shù)和液相色譜-離子肼質(zhì)譜法(LC/ion trap MSn)將清開靈注射液中33種化學成分完全檢測出來。江英橋[10]采用LC-MS法分析清開靈注射液的有效成分，鑒定了21個峰；嚴詩楷等[11]采用HPLC/ELSD指紋圖譜技術(shù)結(jié)合星座圖聚類法，測定不同廠家的18批清開靈注射液的指紋圖譜，并評價產(chǎn)品質(zhì)量。嚴詩楷等[12]應(yīng)用高效液相色譜-二極管陣列檢測器-蒸發(fā)光散射檢測器聯(lián)用技術(shù)同時測定清開靈注射液中的五類有效成分。

1.3指紋圖譜清開靈的質(zhì)量控制一般采用黃芩苷等指標成分含量測定的方法，但有時即使含量測定符合規(guī)定，產(chǎn)品質(zhì)量仍得不到有效控制[13]。指紋圖譜具有專屬性強、穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，可以從整體較全面地表征被測樣品主要化學成分的特征，經(jīng)過多年的發(fā)展和應(yīng)用，目前是公認的最適合中藥及天然藥物物質(zhì)質(zhì)量控制的手段之一[14]。其中高效液相色譜法以選擇性高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等特點已成為中藥指紋圖譜技術(shù)的首選方法[15]。然而采用HPLC/DAD獲取的指紋圖譜，只獲取了一個波長下的色譜數(shù)據(jù)，信息資源沒有充分展現(xiàn)出來。采用主成分分析法將不同波長下檢測的數(shù)據(jù)多維融合成一張色譜圖譜，構(gòu)建的二維指紋圖譜可以保障數(shù)據(jù)損失最小，充分體現(xiàn)色譜和光譜的多維信息。

1.4多指標含量測定對清開靈質(zhì)量標準及控制要點進行研究，主要藥效成分含量的高低是反映清開靈藥效強弱的指標。明確藥效成分，完善質(zhì)量標準，對有效成分進行定性定量分析，是控制清開靈質(zhì)量安全的關(guān)鍵。傳統(tǒng)指標僅選取1～2種有效成分進行含量測定的方法控制是遠遠不夠的，考慮清開靈中主要藥效成分及藥理活性，采用中藥指紋圖譜與多指標含量測定相結(jié)合可全面控制清開靈的質(zhì)量。張倩等[16]采用“一測多評”法同時測定清開靈注射液中6種綠原酸類成分的量。

1.5重金屬及有害元素質(zhì)量控制清開靈中重金屬及有害元素的殘留可能是導致清開靈不良反應(yīng)發(fā)生的原因之一，《中國藥典》2015年版規(guī)定以Pb、Cd、As、Hg、Cu為代表的重金屬測定。Pb、Hg中毒嚴重影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)和造血系統(tǒng)；Cd可引起心血管疾病以及腎衰竭，提高癌癥發(fā)生的危險[17]。As有劇毒，嚴重可致死亡，高濃度的Cu會引起肝腎壞死[18]。劉瀟瀟[18]、胡京紅[19]、施曉光[20]等將待測樣品微波消解，采用ICP-MS法測定清開靈中重金屬及有害元素的同時測定，該方法簡單易行且靈敏度高，各元素在各自的線性濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，可同時快速測定樣品中多種元素的含量。

2 藥理作用

清開靈當前臨床多用于病毒性感冒、上呼吸道感染、急性咽炎、急性氣管炎、急性化膿性扁桃體炎、高燒等病癥[21]。現(xiàn)代藥理學研究認為，清開靈對腦、心、肝、肺等器官均有作用。主要表現(xiàn)為：通過抑制發(fā)熱介質(zhì)的生成，促進解熱物質(zhì)的釋放，緩解由于內(nèi)生熱原和中樞發(fā)熱介質(zhì)引起的產(chǎn)熱效應(yīng)[22]。通過對白細胞滲出的減少及對白細胞枯附的抑制從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[22]，可通過減少腦出血患者腦細胞的損傷，改善腦局部血流，加快修復腦血管內(nèi)皮細胞從而改善腦循環(huán)和腦細胞功能，保護腦組織[23-24]；可促進肝細胞的恢復和再生從而起到保護肝細胞作用[25]；可與大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物聯(lián)合從而提高對金黃色葡萄球菌的抗菌效果[26]；目前臨床應(yīng)用最多的主要是發(fā)熱和中風。

3 不良反應(yīng)

清開靈不良反應(yīng)通常以過敏反應(yīng)為主，還有消化系統(tǒng)和血管刺激的反應(yīng)。有文獻報道，該藥不良反應(yīng)的發(fā)生與患者年齡、原患疾病、發(fā)生時間等因素有關(guān)[27]。處方中水牛角和珍珠母水解后產(chǎn)生的氨基酸在體內(nèi)也會激發(fā)某些敏感抗體引起過敏反應(yīng)，清開靈中綠原酸與人體血清蛋白的結(jié)合產(chǎn)物具有高度的致敏活性，黃芩苷和膽酸類成分也有一定致敏作用[28]。為最大限度的避免不良反應(yīng)的發(fā)生，在用藥前應(yīng)詳細詢問病人的過敏史，同時還需進行皮試試驗；醫(yī)師應(yīng)嚴格遵守《中藥注射劑臨床使用基本原則》最好單獨使用[29-30]。

4 總結(jié)

中藥注射劑不良反應(yīng)發(fā)生率一直居高不下，從指紋圖譜的角度考察清開靈(凍干)可以較全面評價清開靈的質(zhì)量，采用多波長多維指紋圖譜進行分析可以全面表征清開靈的各個成分信息，采用“多指標含量測定”可以快速、準確的評價清開靈的質(zhì)量。