葉渟渟 王雯 張曉蘭

1福建醫(yī)科大學(xué)?？偱R床醫(yī)學(xué)院，福州 350025，2中國(guó)人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九〇〇醫(yī)院消化內(nèi)科，福州 350025

【提要】 胰腺癌起病隱匿，早期診斷率低，進(jìn)展迅速，治療效果差，病死率高，因此迫切需要尋找針對(duì)胰腺癌有效且新型的診斷、治療和判斷預(yù)后的手段。甲狀腺激素受體相互作用蛋白6(TRIP6)是一種調(diào)節(jié)蛋白和局部黏附分子，參與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重組，細(xì)胞黏附、遷移和侵襲，抗細(xì)胞凋亡和轉(zhuǎn)錄調(diào)控等。相關(guān)研究顯示TRIP6表達(dá)異?？赡茉谝认侔┑陌l(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮作用。

甲狀腺激素受體相互作用蛋白6(thyroid hormone receptor interactor 6，TRIP6) 也稱為zyxin相關(guān)蛋白-1，屬于LIM蛋白中zyxin家族的銜接蛋白。TRIP6包含3個(gè)LIM結(jié)構(gòu)域，每個(gè)結(jié)構(gòu)域含有兩個(gè)富含半胱氨酸的鋅指結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)在介導(dǎo)各種蛋白質(zhì)之間相互作用中至關(guān)重要。TRIP6主要定位于細(xì)胞質(zhì)或黏著斑中，并可穿梭至細(xì)胞核，充當(dāng)轉(zhuǎn)錄輔助因子。TRIP6作為一個(gè)平臺(tái)，通過LIM和TDC結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用，參與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重組，細(xì)胞黏附、遷移和侵襲，抗細(xì)胞凋亡和轉(zhuǎn)錄調(diào)控等[1]?，F(xiàn)就TRIP6在胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制中的研究進(jìn)展作一綜述。

一、TRIP6在胰腺癌中的表達(dá)

TRIP6作為一種調(diào)節(jié)蛋白和局部黏附分子，在不同生物學(xué)特性的人胰腺癌細(xì)胞株中表達(dá)具有差異性。本課題組既往研究顯示，胰腺癌組織TRIP6蛋白表達(dá)明顯高于正常胰腺組織，在高神經(jīng)浸潤(rùn)能力的人胰腺癌Capan-2細(xì)胞株的表達(dá)強(qiáng)于低神經(jīng)浸潤(rùn)能力的PANC1細(xì)胞株；動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)TRIP6在胰腺癌細(xì)胞浸潤(rùn)的神經(jīng)周圍呈強(qiáng)表達(dá)；通過siRNA抑制體外胰腺癌細(xì)胞株TRIP6的表達(dá)可顯著降低癌細(xì)胞的遷移及侵襲能力[2]。此外，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，TRIP6在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、卵巢腫瘤、鼻咽癌、尤因肉瘤中均有表達(dá)[3-5]。表明TRIP6在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。

二、TRIP6在胰腺癌侵襲和遷移中的作用

大部分惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征是侵襲和遷移，其過程復(fù)雜，胰腺癌細(xì)胞侵襲和遷移主要受腫瘤血管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移基因與腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因、細(xì)胞外基質(zhì)降解、細(xì)胞黏附、腫瘤微環(huán)境等因素影響[6]。

1．TRIP6與p27kip1：p27為抑癌基因，該基因轉(zhuǎn)錄、翻譯后的產(chǎn)物為p27kip1，是一種廣譜的細(xì)胞周期蛋白依賴激酶(CDKs)抑制因子，主要通過抑制CDK的活性阻斷細(xì)胞周期中G1/S期的轉(zhuǎn)換，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞周期的負(fù)調(diào)控。p27kip1表達(dá)水平下調(diào)與多種常見惡性腫瘤的侵襲及遷移相關(guān)，包括胰腺、胃和結(jié)腸等[7]。p27kip1在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)可以增強(qiáng)其發(fā)揮CDK抑制劑的作用，而p27kip1在細(xì)胞質(zhì)的過表達(dá)則與惡性腫瘤的侵襲性以及預(yù)后差相關(guān)?，F(xiàn)有研究顯示，磷酸化為p27kip1表達(dá)水平下調(diào)和移位的重要分子學(xué)機(jī)制。Tazat等[8]研究表明，激活的RalA結(jié)合蛋白1(RalBP1)通過Ras信號(hào)通路誘導(dǎo)p27kip1在細(xì)胞質(zhì)過表達(dá)，其主要通過PKB/Akt介導(dǎo)的S10位點(diǎn)磷酸化為基礎(chǔ)進(jìn)行誘導(dǎo)。Lin等[9]研究則證實(shí)，TRIP6可活化Akt從而促進(jìn)其誘導(dǎo)的p27kip1磷酸化與識(shí)別，尤其是能增加p27kip1在細(xì)胞質(zhì)的定位。在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞中，TRIP6可直接與p27kip1、Akt結(jié)合，促進(jìn)Akt介導(dǎo)的p27kip1 T157磷酸化，從而提高p27kip1在胞質(zhì)的移位分布。該研究推斷，TRIP6可能與p27kip1結(jié)合，改變其構(gòu)像，通過Akt促進(jìn)T157重組及磷酸化。p27kip1與TRIP6、Akt在胞質(zhì)中形成復(fù)合物，調(diào)控其T157磷酸化，促進(jìn)LPA引起的細(xì)胞遷移。 EI-Khoueiry等[10]研究表明，抑制TRIP6表達(dá)可上調(diào)胞核p27kip1表達(dá)水平，減少p27kip1T157磷酸化。Shi等[11]證明Cyr61通過降低p27kip1胞核水平，促進(jìn)胰腺癌進(jìn)展。Hodul等[12]已證實(shí)維生素E生育酚通過抑制細(xì)胞周期、提高胞核p27kip1水平，抑制胰腺導(dǎo)管腺癌進(jìn)展。Jeannot等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在K-ras導(dǎo)致的小鼠胰腺癌模型中，p27kip1缺失加速腫瘤進(jìn)展、縮短生存期，其機(jī)制為K-ras在瘤變前期引起p27kip1缺失，從而使與分化有關(guān)的腺泡極性標(biāo)志物錯(cuò)位分布。p27kip1失活可能促進(jìn)胰腺導(dǎo)管腺癌進(jìn)展。由此可見，p27kip1在大部分腫瘤及胰腺癌的發(fā)生發(fā)展中占有重要地位，而TRIP6則通過調(diào)控p27kip1的胞質(zhì)移位及表達(dá)水平而發(fā)揮其作用。

2．TRIP6與Notch信號(hào)通路： Notch信號(hào)通路在細(xì)胞與細(xì)胞間的信息交流中扮演著重要的角色，能夠調(diào)節(jié)包括細(xì)胞增殖、分化、凋亡等多個(gè)關(guān)鍵過程以及機(jī)體許多重要的病理和生理改變，在胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。哺乳動(dòng)物中Notch信號(hào)通路存在4個(gè)受體(Notch l～4)。 Ovenzano等[14]研究發(fā)現(xiàn)Notch2陽性的胰腺祖細(xì)胞具有分化為胰腺導(dǎo)管的潛能，同時(shí)Notch2在胰腺癌細(xì)胞和腫瘤血管平滑肌細(xì)胞中高表達(dá)。史微等[15]通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，敲除Notch1表達(dá)可抑制胰腺癌BxPC3細(xì)胞的生長(zhǎng)，增加細(xì)胞凋亡。有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用γ泌酶抑制劑阻斷Notch信號(hào)通路可明顯延緩小鼠從胰腺上皮內(nèi)瘤變(PanIN)發(fā)展至胰腺癌的過程[16]。Notch信號(hào)通路激活后，Notch受體的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(NICD)從細(xì)胞膜上脫離并易位到細(xì)胞核內(nèi)，以增強(qiáng)含有CBF結(jié)合位點(diǎn)的基因轉(zhuǎn)錄，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖及抗細(xì)胞凋亡。Lai等[17]用含有野生型(WT)CBF結(jié)合位點(diǎn)的熒光素酶報(bào)告基因構(gòu)建體轉(zhuǎn)染p19細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TRIP6顯著促進(jìn)WT CBF結(jié)合位點(diǎn)的熒光素酶活性。該研究還用SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系重復(fù)了相同的實(shí)驗(yàn)，與p19細(xì)胞的結(jié)果一致，TRIP6也顯著增加SH-SY5Y細(xì)胞中的Notch活性。上述結(jié)果表明TRIP6可通過激活Notch信號(hào)通路促進(jìn)胰腺癌的發(fā)生和發(fā)展。

3．TRIP6與Ras/ERK信號(hào)通路：Ras是一種含有GTP酶的鳥核苷酸結(jié)合蛋白，與GTP結(jié)合后可激活下游的Raf蛋白，Raf蛋白激活MEK(MAPK/ERK激酶)，進(jìn)而激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶ERK，構(gòu)成MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)。MAPK激活后可進(jìn)入細(xì)胞核，通過細(xì)胞核內(nèi)的磷酸化轉(zhuǎn)錄因子影響基因表達(dá)，從而調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。當(dāng)K-ras基因突變時(shí)，編碼GTP酶活性下降，Ras蛋白始終處于活化狀態(tài)，持續(xù)激活下游信號(hào)通路，導(dǎo)致細(xì)胞無節(jié)制異常增殖，最終引起腫瘤發(fā)生。研究報(bào)道，TRIP6通過與LPA2受體結(jié)合，可激活Ras/ERK信號(hào)通路，從而引起腫瘤細(xì)胞的抗凋亡效應(yīng)[1]。Bay43-9006(索拉菲尼)為Raf激酶抑制劑，在體內(nèi)、外都具有強(qiáng)大的抑制Raf激酶的作用，并可使胰腺癌細(xì)胞株增殖下降、細(xì)胞周期停滯[10]。TRIP6可激活Ras/ERK信號(hào)通路，而此信號(hào)通路的抑制劑可使胰腺癌細(xì)胞株增殖下降，說明TRIP6可能通過調(diào)控Ras/ERK信號(hào)通路，參與胰腺癌發(fā)生及進(jìn)展。

4．TRIP6與MMPs：基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)屬于鋅內(nèi)肽酶，它與其抑制劑是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分的重要調(diào)節(jié)物，在ECM的降解過程以及腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。Ellenrieder等[18]研究表明，胰腺癌有MMP-2和MMP-9的mRNA 和蛋白表達(dá)。另一研究顯示，MMPs可降解Ⅳ型膠原酶，其表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞浸潤(rùn)。Yin等[19]研究證明，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)可上調(diào)MMP-2和uPA系統(tǒng)，以此介導(dǎo)癌細(xì)胞的侵襲。Barbara等[20]研究表明，TRIP6可與TGF-β受體復(fù)合物相結(jié)合，增強(qiáng)TGF-β的介導(dǎo)作用。Sanz-Rodriguez等[21]研究發(fā)現(xiàn)，TRIP6參與TGF-β介導(dǎo)的肌動(dòng)蛋白應(yīng)激纖維的形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和遷移。由此可見，TPIP6可能通過與TGF-β的相互作用，間接促進(jìn)了MMPs引起的胰腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移過程。

5．TRIP6與NF-κB：NF-κB是一種廣泛存在于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子。近年來研究表明NF-κB亦參與包括胰腺癌在內(nèi)的腫瘤演進(jìn)。受體相互作用蛋白2(RIP2)是RIP激酶家族成員之一，已經(jīng)被證明是參與激發(fā)先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的重要成分。Kobayashi等[22]研究表明，RIP2生理病理作用是通過參與多種NF-κB活化途徑介導(dǎo)的。McCarthy等[23]研究表明，RIP2過表達(dá)導(dǎo)致NF-κB、JNK和ERK的激活。Melisi等[24]研究表明，TRIP6作為RIP2的相關(guān)共同信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)組件，參與多種NF-κB的活化途徑。TRIP6的LIM結(jié)構(gòu)域可與RIP2相結(jié)合，增強(qiáng)TNF-α、Nod1、TLR、IL-1的NF-κB活化。IL-1α可促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞株的增殖、黏附和遷移，其與Ras基因的活化和下游ERK信號(hào)通路相關(guān)[25]；IL-1α也可激活NF-κB信號(hào)通路，進(jìn)而上調(diào)抗凋亡基因如BcL-XL、BfL-1的表達(dá)。

6．TRIP6與其他：由于TRIP6結(jié)構(gòu)及其功能的多樣化，故其作用的發(fā)揮需要多種信號(hào)通路、因子、蛋白和基因參與。 除上述的相關(guān)因素外，TRIP6亦可與LPA2受體和Fas/CD95受體結(jié)合，通過c-Src依賴的途徑，促進(jìn)LPA和Fas配體誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移。PI3K/AKT信號(hào)通路也可能是TRIP6參與胰腺癌發(fā)生及進(jìn)展的一種發(fā)病機(jī)制。TRIP6可通過其LIM3區(qū)域與Fas/CD95反應(yīng)，從而促進(jìn)FasL引發(fā)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移。Fas/CD95通過激活PI3K/AKT信號(hào)通路引起腫瘤細(xì)胞侵襲。

三、總結(jié)與展望

胰腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程是復(fù)雜的，JAK-STAT、MAPK、Wnt、Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路均可能起到作用，同細(xì)胞黏附相關(guān)的眾多細(xì)胞通路如Integrin、ILK、FAK、PI3K/Akt等也可能參與，但哪條通路才是TRIP6影響細(xì)胞侵襲、遷移能力的主要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路還需更多的基礎(chǔ)研究予以證實(shí)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突