苗雅昕 綜述，陳萬志 審校

330031 南昌，南昌大學(xué) 江西醫(yī)學(xué)院(苗雅昕)；330006 南昌，南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院 甲狀腺外科(陳萬志)

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，2015年全球發(fā)現(xiàn)甲狀腺癌567 000例，占各部位惡性腫瘤總數(shù)的3.1%，發(fā)病率居第九位，其中女性患病率比男性高3倍，約占女性各部位惡性腫瘤總數(shù)的5.1%，發(fā)病率居第五位[1]。中國國家癌癥中心2019年發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，2015年我國甲狀腺癌女性發(fā)病率達8.49%，居女性惡性腫瘤發(fā)病率第四位[2]。另據(jù)該機構(gòu)2015年發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，甲狀腺癌為30歲以下女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤[3]。90%以上的甲狀腺癌為分化型甲狀腺癌，且以甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)為主，另外還有分化型甲狀腺癌中的濾泡樣癌，以及未分化型甲狀腺癌(anaplastic thyroid carcinoma，ATC)以及甲狀腺髓樣癌(medullary thyroid carcinoma，MTC)等類型。盡管流行病學(xué)統(tǒng)計顯示，與較高的發(fā)病率相比其死亡率相對較低，但延遲確診、治療不規(guī)范等因素也會導(dǎo)致病情的加重、反復(fù)或轉(zhuǎn)移，嚴重影響患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。因此，如何合理規(guī)范地改進診療及建立個性化治療過程中的手段及方案就顯得尤為重要。近年來，針對分子標記物制作個性化診療方案日益成為研究熱點，而其中以針對miRNA的研究較為集中。越來越多的研究證實miRNA在各類甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展、輔助診斷、治療以及預(yù)后等各方面都可作為重要的分子標記物發(fā)揮作用。

miRNA是一種高度保守的單鏈小分子非編碼RNA，約21～23bp，具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)控基因表達的功能。人類miRNAs雖僅占全基因組的1%，但卻調(diào)控著約30%的人類基因。miRNA通過與信使RNA(mRNA)的3’非編碼區(qū)(3’-UTR)結(jié)合，致使其降解或翻譯受阻，進而對基因表達進行負性調(diào)控。正是miRNA對靶基因的調(diào)控作用，使之在惡性腫瘤的發(fā)展各階段及診治各步驟發(fā)揮作用。此外，競爭性內(nèi)源RNA假說(ceRNA假說)的提出將miRNA與具有廣泛的生物學(xué)活性，尤其在細胞生長、分化和致瘤性等方面都發(fā)揮著重要作用的長鏈非編碼RNA(LncRNA)聯(lián)系在了一起[4]。近年來許多研究表明LncRNA在調(diào)節(jié)甲狀腺癌細胞的各種生化活性，在腫瘤發(fā)生、血管生成、增殖、遷移、凋亡和分化等方面發(fā)揮重要作用[5]。本文將對miRNA與甲狀腺癌的相關(guān)進展進行綜述，以期為進一步的研究提供理論指導(dǎo)。

1 miRNA與分化型甲狀腺癌

1.1 miRNA與PTC

1.1.1 miRNA與PTC的發(fā)生發(fā)展 MAPK通路改變是甲狀腺癌中最常見的分子生物學(xué)改變，約70%的甲狀腺癌是由激活該通路的突變引起的[6]。在甲狀腺癌中處于激活狀態(tài)的BRAF、RAS和RET-PTC等融合基因的突變可引起MAPK信號通路激活。因該通路控制著多種重要的細胞過程，包括細胞的增殖、分化、運動以及凋亡等，故融合基因突變導(dǎo)致的過度激活可造成細胞異常分裂、增殖，促進腫瘤的形成。現(xiàn)有研究表明miRNA與激活該通路相關(guān)基因的突變具很強的相關(guān)性。Zarkesh等[7]發(fā)現(xiàn)在PTC組織和通過細針穿刺活檢(fine needle aspiration,FNA)檢查懷疑的PTC組織中，BRAF表達產(chǎn)物BRAFV600E的表達頻率分別為41.1%和36.8%，并檢測出miR-222、miR-181b、miR-214在PTC組織、B-CAPA細胞系及FNA活檢組織中均表現(xiàn)為明顯表達上調(diào)。Titov等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，miR-146b、miR-21、miR-221、miR-222、miR-375、miR-199b這6種miRNA的表達在BRAFV600E表達陽性的PTC組織中與BRAFV600E表達陰性的組織中明顯不同，且miR-146b、miR-21、miR-221、miR-222在所有實驗PTC樣本中均表現(xiàn)為表達上調(diào)。還有研究結(jié)果證實，miR-9[9]、miR-9-5p[10]、miR-150-5p[11]都可通過調(diào)節(jié)BRAF的表達來影響甲狀腺細胞的增殖和凋亡，從而參與PTC的形成過程。另外，Liu等[12]發(fā)現(xiàn)miR-4728過表達可抑制RAS的正向調(diào)節(jié)因子SOS1的mRNA水平，從而降低MAPK信號通路活性。Hong等[13]發(fā)現(xiàn)miR-20b可通過靶向作用于SOS1和ERK2來抑制MAPK信號通路活性。Shen等[14]還發(fā)現(xiàn)miR-106a可直接靶向控制RARB而調(diào)控MAPK，進一步作用于PTC發(fā)生發(fā)展過程。

PI3K-AKT信號通路是生物體內(nèi)重要的細胞信號通路，其在細胞的生長、發(fā)育和凋亡都充當著重要的角色，同樣也在甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。該通路關(guān)鍵成分有AKT、PI3K、PI3KCA、PTEN及mTOR等，其中PTEN是負向調(diào)節(jié)AKT基因活性的蛋白激酶，在PI3K-AKT通路中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用，而激活mTOR又可導(dǎo)致PTEN的失活，進而激活整個PI3K-AKT通路。PI3KCA可導(dǎo)致基因突變，但PI3KCA突變作用和PTEN失活狀態(tài)幾乎不存在于PTC中，而在甲狀腺濾泡狀癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)和ATC中較為常見。已有研究表明miR-497可通過調(diào)控AKT3抑制PTC細胞增殖[15]，miR-21可介導(dǎo)抑制PTEN表達的AP-1進而促進PTEN的表達[16-17]，miR-486也可通過抑制PTEN的表達參與增強PI3K-AKT通路的信號傳導(dǎo)[17-18]。Mardente等[19]發(fā)現(xiàn)miR-221/222可通過調(diào)節(jié)受AKT途徑調(diào)節(jié)抑制的P27Kip1來控制PI3K-AKT途徑，從而對B-CPAP細胞系的增殖起促進作用。此外，Liu等[20]發(fā)現(xiàn)miR-363-3p可直接與編碼PI3KCA的mRNA結(jié)合，降低其mRNA和蛋白產(chǎn)物的表達，進一步抑制了PI3K-AKT信號通路。Minna等[21]則發(fā)現(xiàn)在PTC中miR-451a可通過靶向控制AKT/mTOR通路起到對腫瘤組織的抑制作用。另外，碘和促甲狀腺激素也是甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的重要因素，二者也通過PI3K-AKT通路對PTC發(fā)揮作用。

NF-kB信號通路在生物體內(nèi)作用廣泛，也在腫瘤形成過程中起重要且復(fù)雜的作用。其可促進細胞因子、趨化因子、生長因子等產(chǎn)生共同構(gòu)造腫瘤微環(huán)境，還可增加抗凋亡基因的表達[22]。它與許多參與MAPK信號通路的蛋白表達水平的上調(diào)相關(guān)，如MAPK、BRAFV600E、RAS、RET-PTC等，這些蛋白的異常表達同樣會異常激活NF-kB信號通路，從而促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展[23]，故上文中提到的可調(diào)控MAPK信號通路中相關(guān)蛋白的miRNA也同樣會對NF-kB通路產(chǎn)生作用，如miR-146、miR-221、miR-222等。此外，PTEN可抑制NF-kB通路的異常激活，因此PI3K-AKT信號通路的相關(guān)改變可抑制PTEN表達的miRNA異常表達，也可激活NF-kB信號通路，為甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展提供有利環(huán)境[24]。與NF-kB通路調(diào)節(jié)情況相似的還有RASSF1-MST1-FOXO3信號通路，它既受到BRAFV600E的直接調(diào)節(jié)[24]，其中的FOXO3又可受PI3K突變介導(dǎo)，此通路已被證實是介導(dǎo)甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展的重要通路之一[25-26]。

miRNA除通過上述常見相關(guān)信號通路參與調(diào)控PTC的發(fā)生發(fā)展外，還可通過調(diào)控其他信號通路或直接調(diào)控相關(guān)基因的表達對PTC的發(fā)生發(fā)展起調(diào)控作用。Song等[27]發(fā)現(xiàn)miR-96可能在PTC中通過抑制FOXO1和調(diào)節(jié)AKT/FOXO1/Bim通路發(fā)揮致癌作用；另有研究結(jié)果顯示miR-23b和miR-29b通過調(diào)控SMAD3[28]、miR-146b通過調(diào)控SMAD4[29]及miR-663[30]通過調(diào)節(jié)TGFβ通路對PTC發(fā)生發(fā)展過程起調(diào)節(jié)作用。Xue等[31]和Qiu等[32]分別發(fā)現(xiàn)miR-557和miR-613可通過靶向作用于SphK2抑制PTC的增殖過程，Wen等[33]發(fā)現(xiàn)PTC細胞中的miR-126的上調(diào)可通過靶向LRP6抑制細胞增殖，Yi等[34]發(fā)現(xiàn)miR-1270可能通過自身表達的下調(diào)調(diào)控SCAI抑制PTC細胞的體內(nèi)和體外發(fā)育，Sun等[35]發(fā)現(xiàn)miR-144可通過調(diào)控E2F8在體內(nèi)外調(diào)節(jié)PTC細胞的增殖。Wang等[36]發(fā)現(xiàn)LncRNA PTCSC3可吸收miR-574-5p，與之控制的靶基因形成PTCSC3-miR-574-5p-Wnt/β-catenin信號調(diào)節(jié)通路介導(dǎo)PTC-1細胞的增殖和遷移，表明Lnc RNA也會通過調(diào)節(jié)miRNA表達對PTC的發(fā)生發(fā)展起到作用。

1.1.2 miRNA與PTC的臨床病理特點 許多學(xué)者通過微序列分析和熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈鎖反應(yīng)(quantitative reverse transcription polymerasc chain reaction,RT-qPCR)等方法對不同PTC患者血清中的miRNA水平進行分析后，發(fā)現(xiàn)血清內(nèi)不同miRNA的表達量可導(dǎo)致患者的臨床病理表型出現(xiàn)差異，如淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤直徑及有無局部侵犯等。雖然PTC分化程度較好，10年生存率可達90%以上，但早期侵襲性臨床病理特征仍可對患者的生活質(zhì)量造成一定影響。2015年，Lee等[37]研究了良性甲狀腺病變(n=19)，乳頭狀甲狀腺患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(n=45)和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(n=25)的韓國人血漿樣本中的miRNA譜，發(fā)現(xiàn)與良性組相比，PTC患者miR-146b和miR-155的表達顯著增加，miR-221/222表達也較高但差異并不顯著，并且其還發(fā)現(xiàn)miR-146b、miR-155和miR-222的過度表達與腫瘤的大小相關(guān)。Sun等[38]發(fā)現(xiàn)，miR-146a也與PTC的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、局部侵犯和多灶性密切相關(guān)。Liu等[39]發(fā)現(xiàn)miR-214在PTC組織中表達下調(diào)，而與對照組相比，模擬miR-214高表達的組織遷移能力下降，而敲低組則顯著增加，表明miR-124可降低PTC細胞遷移和侵襲，抑制上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。Todorovic等[40]對比PTC與非腫瘤組織，發(fā)現(xiàn)25%的miR-92a過表達，75%表達降低，且其表達水平下降具統(tǒng)計學(xué)意義，miR-92a表達與VHL的表達水平相關(guān)，可能與PTC的侵襲性相關(guān)。Peng等[41]對比了PTC與甲狀腺良性結(jié)節(jié)的miRNA表達，發(fā)現(xiàn)與惡性樣本相比，miR-30a-3p在良性樣本中表達下降，而miR-146b-5P和miR-199b-5p過表達；在腫瘤直徑小于1cm的樣品中miR-30a-3p、miR-199b-5p下調(diào)，miR-146b-5P上調(diào)，在大于1cm的樣品中也表現(xiàn)出相同的趨勢；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者miR-199b-5P表達上調(diào)，故miR-199b-5p或可用于預(yù)測PTC的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

Hu等[42]對比了266例PTC患者、280例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和300例健康組織的miRNA表達水平發(fā)現(xiàn)，PTC組織中miR-940、miR-15a和miR-16的表達量明顯低于另兩組納入統(tǒng)計的組織，且雙側(cè)腫瘤PTC組織中miR-940、miR-15a表達水平低于單側(cè)腫瘤，多中心PTC組織中miR-15a、miR-16表達水平低于單中心腫瘤，錐體外侵襲、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠端轉(zhuǎn)移陽性的PTC組織中三者表達水平與陰性組相比均降低；IL-23表達水平上升，且在雙側(cè)腫瘤組織、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠端轉(zhuǎn)移的組織中表達量更高，揭示了這三種miRNA與PTC臨床病理特點之間的關(guān)系。

已有大量研究結(jié)果表明miRNA與PTC的各種臨床病理特點有關(guān)，但僅有部分miRNA已被證實直接參與一些病理特點的形成且已有研究較為詳細的機制及相關(guān)通路關(guān)系，目前臨床上還需miRNA檢查與其他檢查方式配合才能確切的檢測其臨床病理情況，并針對其情況給出合適的治療方案及預(yù)后監(jiān)測方案。

1.1.3 miRNA與PTC的診斷和預(yù)后 流行病學(xué)研究表明，居住在碘充足地區(qū)約5%的女性和1%的男性有可觸及甲狀腺結(jié)節(jié)，然而到60歲時，一般人群中估計約50%至少有1個甲狀腺結(jié)節(jié)[43]，而其中僅有5%～15%的結(jié)節(jié)為惡性[44]。在診斷工作中，首先要進行的是測量血清中的促甲狀腺激素濃度，以區(qū)分出很少為惡性的功能性甲狀腺結(jié)節(jié)。當懷疑為非功能性結(jié)節(jié)時，一般會行超聲引導(dǎo)下的FNA。然而FNA檢查的準確性及應(yīng)用范圍有限，且易造成過度醫(yī)療。PTC患者50%以上均有淋巴結(jié)受累情況，而術(shù)前頸部超聲一般僅能檢查出手術(shù)中發(fā)現(xiàn)的受累淋巴結(jié)的一般數(shù)量。雖然目前FNA仍為臨床上確診甲狀腺癌的金標準，但在精準醫(yī)療發(fā)展速度日益加快的今天，尋找更加有效的PTC診斷及術(shù)前檢查的方法顯得尤為重要。有研究發(fā)現(xiàn)，miRNA可作為分子標志物參與以胞外囊泡為檢查對象的液體活檢等新興的臨床診斷方法[45]。

早在2008年，Nikiforova等[46]就對多種甲狀腺癌進行了miRNA分析，提出miR-146b、miR-155、miR-187、miR-197、miR-221、miR-222及miR-224可作為分析癌組織樣本類型的潛在區(qū)別的標志物，并對其研究的62例FNA標本進行量化分析后得出結(jié)論：當至少1種miRNA過表達超過2倍時，癌癥檢測的敏感性為100%，特異性為94%，準確性為95%。Agretti等[47]在141份FNA標本中評價同一種miRNA的臨床效應(yīng)時發(fā)現(xiàn)，基于miR-146b、miR-155和miR-221表達的決策模型檢測正確性為97.7%(在未確定細胞學(xué)特征的結(jié)節(jié)中為59%)，可靠性為78.4%。還有研究發(fā)現(xiàn)miR-146b-5p在89%的PTC中高表達，與之對照的是其在大多數(shù)FTC、ATC及低分化型甲狀腺癌癥中均未檢測到這一現(xiàn)象[48]。Qiu等[49]對比了73例PTC患者的癌組織標本與癌旁組織，運用半定量RT-PCR檢測了miR-146a和miR-146b的表達水平,發(fā)現(xiàn)兩者在癌組織中有明顯高表達，且其表達水平可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示其可能運用于PTC的診斷及術(shù)前檢查。

miRNA對預(yù)后的影響已在多種不同的甲狀腺癌如PTC、甲狀腺低分化癌(poorly differentiated thyroid cancer,PDTC)等中得到研究。如在PDTC中，miR-23b的表達降低可反映無復(fù)發(fā)生存率降低，miR-181轉(zhuǎn)錄水平的升高可使濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的10年無復(fù)發(fā)生存率由75%降低至18%。盡管相關(guān)研究都強調(diào)miRNA表達譜所提示的預(yù)后情況可能比相關(guān)臨床病理特征更加準確，特別是在不良預(yù)后方面，但相關(guān)研究數(shù)量較少，還需進一步研究來證明其潛在臨床預(yù)后價值。

1.2 miRNA與甲狀腺濾泡狀癌

FTC發(fā)病率約占分化型甲狀腺癌的12%[44]，但專門研究miRNA與FTC相關(guān)發(fā)生發(fā)展過程及病理診斷等各方面的研究仍較少且并未研究足夠深入。2014年，Wojtas等[50]就通過運用芯片對比了11例FTC及其對應(yīng)的正常組織中的miR-146b、miR-183、miR-199b的表達水平并運用RT-qPCR進行了驗證，同時還運用RT-qPCR對比了miR-221的表達水平，發(fā)現(xiàn)miR-146b、miR-183和miR-221的表達水平上調(diào)，miR-199b則下調(diào)且均具顯著差異。他們還發(fā)現(xiàn)miR-146b和miR-183是通過誘導(dǎo)細胞遷徙和抑制細胞凋亡參與FTC的發(fā)生發(fā)展過程。Hu等[51]則通過基因芯片技術(shù)廣泛識別了FTC相關(guān)的miRNA，發(fā)現(xiàn)miR-7-2-3p、miR-7-5p、miR-130b-5p，miR-144-5p、miR-1179和miR-328-3p這6種miRNA表達上調(diào)，miR-767-5p、miR-663b和miR-137則下調(diào)，并預(yù)測了這些miRNA的相關(guān)靶基因。Chi等[52]通過miRNA-mRNA網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)，miR-296-5p、miR-10a、miR-139-5p、miR-452、miR-493、miR-7、miR-137、miR-144和miR-145與相應(yīng)的靶向mRNA之間存在共調(diào)節(jié)關(guān)系，包括TNF受體超家族11b、苯并二氮雜卓受體外周相關(guān)蛋白1、TGF-β受體等，表明miRNA在FTC的發(fā)病機制、診斷和治療中能發(fā)揮重要作用。Sun等[53]通過采用RT-qPCR檢測了42例FTC患者組織，并在轉(zhuǎn)染結(jié)締組織生長因子(connective tissue grouth factor,CTGF)siRNA和miR-199a模擬物或抑制劑的FTC-133細胞中檢測其活力及細胞周期狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)miR-199a-5p在FTC組織中低表達，且CTGF的mRNA及蛋白表達量明顯高于正常組織，miR-199a-5p模擬物及CTGFsiRNA也下調(diào)了CTGF在FTC-133細胞中的表達，通過在G0期阻斷細胞周期降低了其生存水平。而轉(zhuǎn)染miR-199a-5p抑制劑后，G2/M期和S期細胞比例增加，CTGF的表達水平增加，細胞活力增強，表明CTGF是miR-199a-5p的靶基因且與FTC的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。Calabrese等[54]在基礎(chǔ)和過表達的條件下對FTC-133細胞中的RNA進行了RT-PCR分析，發(fā)現(xiàn)miR-19a的表達顯著降低，且其在過表達條件下可誘導(dǎo)細胞形態(tài)學(xué)表型改變，促進細胞增殖和存活，減少凋亡，且還改變了甲狀腺分化和預(yù)后不良的相關(guān)基因的表達，包括TSHr、Tg、TTF1和Pax8都顯著減少，其中TSHr、Tg、Pax8表現(xiàn)出了時間差異性。Miao等[55]則通過RT-PCR對比了FTC組織及FTC-133細胞系內(nèi)的miRNA及相關(guān)基因之間的關(guān)系，揭示了miR-4299通過靶向ST6GAL-NAC4調(diào)控人FTC的侵襲性，且可能還有其他影響，但其分子機制仍有待研究。Stokowy等[56]還發(fā)現(xiàn),與FNA相比，僅有miR-3529-3p、miR-7-5p在FTC中表達下調(diào)近3倍，僅有miR-3607-3p和miR-411-5p在FTC中表達上調(diào)略高于FNA，可用于FTC的鑒別診斷。

2 miRNA與MTC

MTC是一種少見的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，由甲狀腺的C細胞引起，約占甲狀腺癌的5%，其侵蝕性較強，大部分都表現(xiàn)出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。該病多發(fā)于50歲以上中老年人且女性居多，散發(fā)性與遺傳性的MTC在miRNA表達方面存在區(qū)別。雖然miRNA是甲狀腺癌預(yù)后評估的重要指標之一，且miRNA已被證實與MTC的病理過程相關(guān)，但揭示其在MTC中的作用的文獻仍較為少見。Galuppini等[57]隨訪了130例MTC患者的miR-375表達水平(104例散發(fā)性和26例家族性)，持續(xù)39個月，發(fā)現(xiàn)與正常甲狀腺組織相比，所有MTC中miR-375的水平均顯著上調(diào)，且其表達與腫瘤大小、甲狀腺囊內(nèi)浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險及腫瘤分期密切相關(guān);在隨訪結(jié)束時僅有10%(13/130)顯示出腫瘤進展相關(guān)；此外，他們還發(fā)現(xiàn)miR-375高表達與預(yù)后最差的患者的結(jié)果密切相關(guān)，表明miR-375在MTC進展中起著重要作用。Chen等[58]發(fā)現(xiàn)miR-9-3p在人MTC組織及TT細胞中表達上調(diào)且經(jīng)RT-PCR驗證，且miR-9-3p抑制劑明顯抑制了TT細胞的細胞周期進展，而其模擬物則抑制了TT細胞的凋亡，還通過生物信息學(xué)預(yù)測和熒光素酶報告分析確定膀胱癌相關(guān)蛋白(bladder cancer associated protein,BLCAP)是miR-9-3p的靶點，在TT細胞中，BLCAP的沉默顯著降低細胞凋亡水平，且不受miR-9-3p的進一步影響，揭示了上調(diào)miR-9-3p通過靶向作用于BLCAP調(diào)控癌細胞的生長和凋亡，在MTC進展中發(fā)揮積極作用。Shabani等[59]通過實時PCR技術(shù)分析了30個MTC樣品的miRNA表達，發(fā)現(xiàn)所有樣品中miR-144和miR-34a表達均上調(diào)，接受者操作特性曲線分析表明二者在患者體內(nèi)表達增加具有顯著的預(yù)測價值，揭示了miR-144和miR-34a的高表達可以被認為是MTC的生物標志物，但未發(fā)現(xiàn)二者和靶基因表達之間的關(guān)系有統(tǒng)計學(xué)意義。而后該團隊又發(fā)現(xiàn)RET陽性MTC患者的miR-144和miR-34a表達較RET陰性患者顯著增加[60]。Joo等[61]發(fā)現(xiàn)miR-153-3p可特異性調(diào)節(jié)RET表達，從而阻礙了異種移植MTC的腫瘤生長，且miR-153-3p與卡博替尼的聯(lián)合治療可引起更大的生長抑制并可能逆轉(zhuǎn)錄卡博替尼的抗性。另外，Chu等[62]通過原位雜交發(fā)現(xiàn)其研究的樣本中17個(44%)的原代MTC中miR-21表現(xiàn)出強表達，37個(95%)原代MTC中有LncRNA MALAT1表現(xiàn)為強表達。原代中miR-21和MALAT1的實時PCR表達顯著高于正常甲狀腺組織，驗證了原位雜交中的發(fā)現(xiàn)。SiRNAs實驗顯示MTC衍生細胞系中miR-21和MALAT1表達的抑制導(dǎo)致了細胞增殖和侵襲能力的顯著降低，可調(diào)節(jié)MTC進展，揭示了LncRNA參與MTC發(fā)生發(fā)展調(diào)節(jié)的方式。

Mian等[63]對34例散發(fā)性MTC、6例家族性MTC和2例C細胞增生癥患者的9種miRNA進行RT-qPCR分析和miR-21基因靶點PDCD4的免疫組化表達，發(fā)現(xiàn)miR-21、miR-127、miR-154、miR-224、miR-323、miR-370、miR-9 、miR-183和miR-375顯著過表達，且在散發(fā)性MTC和家族性MTC中，miR-224表達上調(diào)與淋巴結(jié)陰性、早期診斷等過程相關(guān)，揭示了miRNA表達失調(diào)可能是甲狀腺C細胞癌變的早期表現(xiàn)，miR-224是評估MTC預(yù)后的可靠生物標志物。

3 miRNA與ATC

ATC又稱間變性甲狀腺癌，是甲狀腺癌中惡性程度最高的一種，盡管其發(fā)病率較低，僅占所有甲狀腺癌的5%左右，但其死亡率卻占全部甲狀腺癌死亡率的14%～50%，中位生存期僅為3～5個月，其中癌癥干細胞(cancer stem cell, CSC)的存在是ATC復(fù)發(fā)率高的原因之一[64]。近年研究結(jié)果顯示，miRNA在ATC的病理過程中也起到重要作用。Hebrant等[65]分析了11例ATC患者的mRNA表達譜，并與miRNA表達譜進行整合，發(fā)現(xiàn)其中4例(36.4%)存在p53突變，2例(18%)存在BRAF突變，1例(10%)存在PIK3CA突變，其中有一個樣本同時顯示BRAF和p53突變，且發(fā)現(xiàn)ATC中表現(xiàn)出18種miRNA表達變化，其中17種下調(diào)，1種上調(diào)，除miR-144外都未在其他腫瘤組織中表現(xiàn)出下調(diào)。Sheng等[64]鑒定了原代ATC細胞與ATC-CSC之間差異表達的17種miRNA，發(fā)現(xiàn)其中miR-148a在ATC-CSC中顯著下調(diào)，其過表達可誘導(dǎo)細胞周期停滯和干細胞特性喪失，并鑒定INO80為其靶基因。Shao等[66]通過CCK-8實驗和Transwell實驗發(fā)現(xiàn)miR-4295在蛋白水平抑制CDKN1A的表達，從而促進了ATC細胞的遷移和侵襲，可作為干預(yù)ATC病理過程的潛在靶點。Aherne等[67]通過實時PCR和Western blot分析了miR-25和miR-222對甲狀腺良惡性細胞的影響，發(fā)現(xiàn)miR-25和miR-222表達分別在8505C(間變性甲狀腺細胞系)和Nthyori細胞中上調(diào)，且發(fā)現(xiàn)二者可直接或間接靶向近100個功能各異的mRNA，miR-25基因靶點對參與細胞黏附的基因有明顯的富集作用。Vosgha等[68]通過RT-qPCR檢測成功轉(zhuǎn)染miR-205載體和空載體的細胞，發(fā)現(xiàn)ATC中的miR-205均有顯著的過表達，且認為血管內(nèi)皮生長因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)和ZEB1為其靶點，表明miR-205可以作為靶向VEGF-A的抗血管生成劑，從而影響基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2和MMP9，還可嚴重抑制VEGF-A的分泌和內(nèi)皮形成能力，miR-205還可降低癌細胞遷移能力，抑制癌細胞的侵襲性。還有miR-483-3p、miR-27b-3p、miR-650等許多miRNA通過靶向相對應(yīng)的基因或其mRNA來參與ATC的發(fā)生發(fā)展、病理特征、預(yù)后和耐藥性等各類病理過程。Wang等[69]發(fā)現(xiàn)LncRNA UCA1可通過與miR-135a的靶向基因c-myc競爭miR-135a的結(jié)合，促進ATC細胞的增殖，可能作為人類ATC治療的潛在靶點。

4 總結(jié)與展望

近年來針對miRNA與各類甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展、臨床病理特征、診斷預(yù)后等各個方面的關(guān)系的研究日漸增加，且已開始通過研究其作用原理聯(lián)系臨床從而開發(fā)出miRNA在臨床上的各類應(yīng)用，包括鑒別診斷、治療及預(yù)后監(jiān)控等各個過程。但目前此類研究較多都圍繞分化型甲狀腺癌，尤其是PTC的相關(guān)研究已相當全面，其他腫瘤相對較少，希望未來可以有更多針對于甲狀腺癌更廣泛種類進行研究，以增進對甲狀腺癌的認識，及更全面地運用miRNA等生物標志物在臨床上造?；颊?，提升其生存率和生活質(zhì)量。

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