姜彥彪，陳靜紅，曾憲濤，鄺心穎，陳昊，耿勁松，李博，劉雅莉，馬彬,8

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在基礎(chǔ)研究中扮演重要的角色，其結(jié)果對下一步設(shè)計(jì)和實(shí)施臨床研究具有重要參考價(jià)值，但由于部分臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所獲的結(jié)論常未經(jīng)嚴(yán)格評估就作為開展臨床研究的支持證據(jù)，其遠(yuǎn)期效果不佳，導(dǎo)致臨床研究和藥品上市后撤出的代價(jià)極大[1,2]。因此，有必要對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)（Systematic Review），為后續(xù)臨床研究的開展提供可靠證據(jù)。因?yàn)橥ㄟ^對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)，一方面可后效評估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，回顧性比較動(dòng)物模型是否使用得當(dāng)；另一方面可降低動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果引入臨床的風(fēng)險(xiǎn)，增加估計(jì)療效的精度，降低假陰性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)，決定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果何時(shí)可被臨床接受，以終止不必要的臨床試驗(yàn)，更好地促進(jìn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)向臨床研究轉(zhuǎn)化[3]。

與基于臨床研究的系統(tǒng)評價(jià)相似，高質(zhì)量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)依賴于方法學(xué)方面的科學(xué)性和嚴(yán)謹(jǐn)性，例如納入/排除標(biāo)準(zhǔn)的確定、亞組的設(shè)置等。而且為減少實(shí)施過程中可能產(chǎn)生的偏倚，這些方法學(xué)方面的設(shè)立不應(yīng)該受到納入研究結(jié)果的影響，應(yīng)預(yù)先設(shè)定。因此，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)開展之前，預(yù)先制定好研究計(jì)劃書可有效幫助構(gòu)建和實(shí)施系統(tǒng)評價(jià)。此外，計(jì)劃書的注冊/發(fā)表還可減少對同一選題重復(fù)的風(fēng)險(xiǎn)，避免選擇性報(bào)告，并為同領(lǐng)域研究人員科學(xué)學(xué)習(xí)和評估其系統(tǒng)評價(jià)結(jié)果提供依據(jù)[4]。在臨床研究領(lǐng)域，Cochrane協(xié)作網(wǎng)提供了臨床干預(yù)/診斷類系統(tǒng)評價(jià)計(jì)劃書的標(biāo)準(zhǔn)格式，并在Cochrane數(shù)據(jù)庫中預(yù)先發(fā)布這些計(jì)劃書[5]，極大的促進(jìn)了Cochrane系統(tǒng)評價(jià)的質(zhì)量提升。然而，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，雖然CAMARADES（Collaborative Approach to Meta-Analysis and Review of Animal Data from Experimental Studies）已經(jīng)發(fā)布了部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)計(jì)劃書，但這些計(jì)劃書在類型和信息的數(shù)量方面尚存在一些差異[6]。因此，荷蘭Radboud大學(xué)醫(yī)學(xué)院SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心（SYstematic Review Center for Laboratory animal Experimentation）研發(fā)、制定和發(fā)布了SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案（Systematic Review Protocol for Animal Intervention Studies），即標(biāo)準(zhǔn)化的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)計(jì)劃書，以促進(jìn)完整和高質(zhì)量的計(jì)劃書的形成[7]。

本文將對SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案進(jìn)行詳細(xì)解讀，以便為國內(nèi)學(xué)者在制作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)之前制定一個(gè)完善和科學(xué)的研究方案/計(jì)劃書提供參考，并為其后續(xù)系統(tǒng)評價(jià)研究的正式開展和實(shí)施提供方法支撐。

1 SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案

1.1 適用范圍該研究方案主要針對動(dòng)物干預(yù)性研究，即適用于探討某種或某些干預(yù)手段的有效性和安全性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)。當(dāng)然，也可以作為其他類型的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)的參考（例如，二次研究或綜述，提供關(guān)于疾病模型的使用或機(jī)制研究的描述性概述），但有些方面可能不適用或需要修改。

1.2 內(nèi)容構(gòu)成研究方案由“一般信息、目的和方法”3個(gè)方面的主體內(nèi)容， 8個(gè)方面的子內(nèi)容（背景、研究問題、檢索和納入研究的確定、文獻(xiàn)選擇、研究特征信息提取、偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估、結(jié)果數(shù)據(jù)收集、數(shù)據(jù)分析/合成），50個(gè)條目共同組成。第一部分（一般信息）：涉及該系統(tǒng)評價(jià)的一般信息，包括題目、作者、資金來源/資助方、注冊時(shí)間和地點(diǎn)等；第二部分(目的)：涉及系統(tǒng)評價(jià)的主要和次要目的；第三部分(方法)：涉及到實(shí)現(xiàn)這些目的的方法。此外，8個(gè)方面的子內(nèi)容對應(yīng)于系統(tǒng)評價(jià)的不同步驟，分別為：①研究問題（包括背景部分）：涉及條目10-16；②檢索和納入研究的確定：涉及條目17-20；③文獻(xiàn)選擇：條目21-30；④研究特征信息提?。荷婕皸l目31-36；⑤偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估：涉及條目37-38；⑥結(jié)果數(shù)據(jù)收集：涉及條目39-41；⑦數(shù)據(jù)分析/合成：涉及條目42-50。該計(jì)劃方案可以從荷蘭Radboud大學(xué)醫(yī)學(xué)院SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的網(wǎng)站免費(fèi)下載（https://www.radboudumc.nl/en/research/radboud-technology-centers/animalresearch-facility），其中文翻譯版本亦可參考我們之前發(fā)表的研究[8]。

1.3 制定方法該研究方案的制定過程共經(jīng)歷了4個(gè)階段。首先，SYRCLE小組基于Cochrane系統(tǒng)評價(jià)計(jì)劃書的內(nèi)容、PRISMA清單條目及其自身在制作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)過程中的經(jīng)驗(yàn)，設(shè)計(jì)了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案的初稿。然后，挑選3名動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)科研人員、2名方法學(xué)專家、1名獸醫(yī)和2名臨床醫(yī)生，對其指定的初稿進(jìn)行全面討論，以補(bǔ)充和完善所提出的方案初稿。其次，挑選7名已經(jīng)開展和發(fā)表過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)的科研人員，包括2名臨床醫(yī)生、2名博士生、2名相關(guān)研究人員和1名學(xué)生，對初稿方案進(jìn)行測試。在具體測試和使用過程中，主要對該方案的實(shí)用性、缺失條目、改進(jìn)可能性和系統(tǒng)評價(jià)研究者是否理解各條目內(nèi)涵4個(gè)方面進(jìn)行意見反饋和修繕。最后，SYRCLE小組與CAMARADES的成員討論，并與CAMARADES網(wǎng)站上發(fā)布的5種計(jì)劃書格式進(jìn)行比較，最終完善和確定了SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究計(jì)劃書的所有條目和最終格式。

2 SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案內(nèi)容解讀

2.1 一般信息（A部分，條目1-9）這部分主要是關(guān)于系統(tǒng)評價(jià)管理性相關(guān)信息，例如標(biāo)題、作者和注冊信息等。需要指出的是所有的作者和參與者以及其做出的貢獻(xiàn)都需要注明，其目的主要是鼓勵(lì)在系統(tǒng)評價(jià)開始實(shí)施之前，對其研究團(tuán)隊(duì)成員及其專業(yè)構(gòu)成進(jìn)行全面考慮，以確保后續(xù)研究開展的需要。此外，應(yīng)該在計(jì)劃書中提到研究的資助來源/贊助者以及潛在的利益沖突，因?yàn)檫@可能會(huì)影響系統(tǒng)評價(jià)的結(jié)論。另外，計(jì)劃書中還要注明其注冊信息，特別是系統(tǒng)評價(jià)的注冊階段，以確定在系統(tǒng)評價(jià)開始實(shí)施之前，其計(jì)劃書是否（或在多大程度上）已經(jīng)完成。

2.2 研究目的（B部分，條目10-16）該部分主要包括背景和研究問題兩個(gè)部分，其中目的主要指該系統(tǒng)評價(jià)要回答和驗(yàn)證的問題。明確的研究問題主要包括PICO（Population、Intervention、Comparison、Outcome）4個(gè)方面，這與基于臨床研究的系統(tǒng)評價(jià)一樣。但不同的是，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)中的“P”不僅指所使用的動(dòng)物物種或菌株，同時(shí)也指疾病模型。

2.3 方法部分（C部分，條目17-50）

2.3.1 檢索和納入研究的確定（條目17-20）為獲得盡可能多的動(dòng)物原始研究，建議至少檢索兩個(gè)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫，同時(shí)使用全面的搜索策略，包括使用主題詞檢索（如MeSH），以提高檢索結(jié)果的準(zhǔn)確性和完整性。這部分的4個(gè)條目將有助于設(shè)計(jì)完善而全面的檢索策略，包括主要數(shù)據(jù)庫檢索和補(bǔ)充檢索來源等。目前，SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)小組已經(jīng)發(fā)布了PubMed[9]和Embase[10]數(shù)據(jù)庫中“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)”檢索策略的過濾器，可供今后動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究人員參考。

2.3.2 文獻(xiàn)選擇過程（條目21-30）條目21要求定義文獻(xiàn)選擇和篩選階段，并且要求顯示每項(xiàng)研究在各篩選階段的評審人員數(shù)量以及分歧解決的方法（條目22）。此外，預(yù)先確定納入/排除標(biāo)準(zhǔn)是減少系統(tǒng)評價(jià)偏倚非常重要的措施之一，同時(shí)也是評估該系統(tǒng)評價(jià)研究問題是否充分明確，以及檢索策略是否完整的重要手段。因此，為有效指導(dǎo)如何制定納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，條目23-29強(qiáng)調(diào)幾個(gè)重要的研究方面，包括研究設(shè)計(jì)類型、疾病模型、干預(yù)措施和結(jié)局指標(biāo)的測量等。此外，計(jì)劃書中還特意要求系統(tǒng)評價(jià)實(shí)施人員記錄排除標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)的納入標(biāo)準(zhǔn)，以防止兩者之間有可能遺漏的部分。

2.2.3 研究特征信息提取、偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估和結(jié)果數(shù)據(jù)的收集（條目31-41）為了防止在系統(tǒng)評價(jià)研究中，選擇性使用或報(bào)告納入研究中的信息，SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案要求在其計(jì)劃書中詳細(xì)描述信息提取各階段的細(xì)節(jié)，這不僅包括與研究特征有關(guān)的信息（條目31-36），還涉及到偏倚風(fēng)險(xiǎn)的評估的信息（條目37-38）和結(jié)局?jǐn)?shù)據(jù)（條目39-41）。

其中，納入原始研究的特征通常用以評估其外部真實(shí)性，而且也是解釋Meta分析潛在異質(zhì)性來源的基礎(chǔ)，條目31-36列出需要提取的內(nèi)容；對納入研究偏倚風(fēng)險(xiǎn)的評估也是系統(tǒng)評價(jià)研究中非常重要的環(huán)節(jié)，條目37-38進(jìn)行明確規(guī)定，需要詳細(xì)說明其適用的評估工具，其中SYRCLE偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估工具由SYRCLE中心2014年發(fā)布[11]，是目前唯一一個(gè)專門針對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)內(nèi)在真實(shí)性評估的工具[12]，筆者團(tuán)隊(duì)也在2014年詳細(xì)介紹過該評估工具的詳細(xì)內(nèi)容[13]。需要注意的是，其他與偏倚有關(guān)的特征或研究細(xì)節(jié)有可能不被包含，需要專門添加或省略（如對體溫的適當(dāng)控制，利益沖突等）。對于結(jié)果數(shù)據(jù)的收集而言，條目39要求定義需要收集的數(shù)據(jù)類型，而且條目40-41還要求系統(tǒng)評價(jià)作者描述其獲得相關(guān)數(shù)據(jù)的方法及其過程。

2.2.4 數(shù)據(jù)分析/合成（條目42-50）與敘述性的綜述相比，系統(tǒng)評價(jià)的一個(gè)重要特點(diǎn)體現(xiàn)在對個(gè)體研究數(shù)據(jù)的整合，而且最好是以Meta分析的方式進(jìn)行，但這并非總是可行或合理。因此，條目42-43要求系統(tǒng)評價(jià)作者闡述其數(shù)據(jù)呈現(xiàn)形式，以及實(shí)施Meta分析的合理性。如果可行，條目44-45還要求系統(tǒng)評價(jià)作者預(yù)先設(shè)定Meta分析的重要細(xì)節(jié)，包括統(tǒng)計(jì)分析模型，評估異質(zhì)性的方法等。預(yù)先確定Meta分析的方法細(xì)節(jié)可以減少不適當(dāng)?shù)氖潞蠓治龊瓦x擇性報(bào)告偏倚(例如，只報(bào)告顯示陽性結(jié)果)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)Meta分析中，這種風(fēng)險(xiǎn)比臨床Meta分析要高，因?yàn)榍罢叩闹饕康氖翘骄磕男┮蛩赜绊懻w治療效果，而不是確定精確的點(diǎn)估計(jì)值。

3 SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究方案的注冊與發(fā)布

該研究方案適用于動(dòng)物干預(yù)性研究的系統(tǒng)評價(jià)，而且，已經(jīng)得到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)研究領(lǐng)域下最主要的兩個(gè)網(wǎng)絡(luò)/中心，即CAMARADES和SYRCLE的支持。注冊和發(fā)布已完成的計(jì)劃書，是保證系統(tǒng)評價(jià)研究方法透明以及判斷是否在實(shí)施過程中添加或修改部分內(nèi)容，以及添加和修改的部分是否會(huì)導(dǎo)致其結(jié)果偏倚的重要文本依據(jù)。因?yàn)榫W(wǎng)站注冊（或出版）計(jì)劃書將提供一個(gè)永久的、獨(dú)立的和有日期的公共記錄，可以與最終的系統(tǒng)評價(jià)結(jié)果進(jìn)行比較。此外，還有助于減少系統(tǒng)評價(jià)中選擇偏倚（例如對納入標(biāo)準(zhǔn)的回顧性調(diào)整）和選擇性報(bào)告偏倚（例如僅報(bào)告在統(tǒng)計(jì)上有差異的亞組），有助于避免發(fā)表偏倚（例如僅納入陽性結(jié)果研究）。目前SYRCLE中心也已經(jīng)與PROSPERO（The International Prospective Register of Systematic Review Protocols for Clinical Studies）咨詢小組達(dá)成協(xié)議，進(jìn)一步擴(kuò)展PROSPERO的注冊范圍，將臨床前系統(tǒng)評價(jià)的計(jì)劃書的注冊也納入到其范圍。也可通過CAMARADES網(wǎng)站或SYRCLE網(wǎng)站發(fā)表其計(jì)劃方案。

4 總結(jié)

干預(yù)性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)計(jì)劃書的制定、預(yù)先注冊和發(fā)布，可促進(jìn)相關(guān)研究人員及時(shí)、有效反思該研究方法的科學(xué)性，有助于防止其方法學(xué)上的局限/缺陷，最小化其可能產(chǎn)生的偏倚風(fēng)險(xiǎn)，有助于提高/促進(jìn)高質(zhì)量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評價(jià)的開展和實(shí)施。同時(shí)，也可避免不必要?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)的開展和對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的“浪費(fèi)”，以及避免對后續(xù)臨床試驗(yàn)參與者進(jìn)行不必要的、無效的、甚至有害的研究。