■周建軍 胡先勤* 王學(xué)東 李 彪 王 磊

（1.武漢輕工大學(xué)，湖北武漢430023；2.宜昌安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌443003；3.湖北省俊宏生態(tài)牧業(yè)有限責(zé)任公司，湖北十堰442000）

硒是人體必需的微量元素，它與谷胱甘肽過氧化物酶的形成相關(guān)，能夠提高動物機(jī)體抗氧化能力[1]。人體缺硒會導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，硒在預(yù)防心血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗病毒、防癌、保護(hù)視力、免疫調(diào)節(jié)等方面有著重要作用[2-3]。硒在自然界中存在形式較多，可以以Se2+的硒化物形式存在，也可以以Se4+（亞硒酸鹽）或Se6+（硒酸鹽）的形式存在[4]。成年人每日硒攝入量應(yīng)該為55 μg/d，我國有近2/3地區(qū)缺硒，如何健康補(bǔ)硒成為一大現(xiàn)實(shí)問題[5]。無機(jī)硒的攝入不僅會對機(jī)體造成氧化損傷，嚴(yán)重情況甚至致毒，而且對環(huán)境也是一種污染。因此為了提高食品中硒的含量，在動物日糧中添加具有較高利用率的有機(jī)硒來提高產(chǎn)品的含硒量，對人類可能是一種比較安全的方法[6]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，通過微生物發(fā)酵技術(shù)可以將無機(jī)硒源轉(zhuǎn)化為生物利用率更高、安全性更可靠的有機(jī)硒源，如酵母硒，其為酵母在培養(yǎng)過程中同化培養(yǎng)基中的無機(jī)硒，得到有機(jī)硒富集在酵母細(xì)胞中的一種微生物發(fā)酵產(chǎn)物[7]。雞蛋作為人們?nèi)粘Ｉ钪幸淮箫嬍硜碓矗梢宰鳛橛袡C(jī)硒營養(yǎng)補(bǔ)充劑的載體。因此可以考慮通過食用富硒雞蛋來補(bǔ)充硒[8]。近年來有關(guān)無機(jī)硒（亞硒酸鈉）、有機(jī)硒（胱氨酸類硒）在蛋雞養(yǎng)殖試驗(yàn)中的相關(guān)報道，但是關(guān)于不同形式的酵母硒在蛋雞養(yǎng)殖試驗(yàn)中的應(yīng)用效果鮮有報道。鑒此，本試驗(yàn)旨在比較蛋雞飼糧中添加相同劑量的亞硒酸鈉、硒化卡拉膠、活性富硒酵母、機(jī)械破壁富硒酵母、酶解富硒酵母（以硒元素0.3 mg/kg計）對蛋雞生產(chǎn)性能、產(chǎn)蛋品質(zhì)以及蛋硒含量的影響，目的在于開發(fā)更加優(yōu)質(zhì)、高效的富硒產(chǎn)品并為富硒雞蛋的研制提供相關(guān)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)飼喂基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)用硒源相關(guān)說明見表2。

表1 試驗(yàn)飼喂基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平

表2 試驗(yàn)用硒源（風(fēng)干物質(zhì)）

1.2 試驗(yàn)動物與處理

試驗(yàn)選用湖北省十堰市鄖陽縣俊宏生態(tài)牧業(yè)養(yǎng)殖基地480只16周齡健康狀況良好、產(chǎn)蛋率接近的蛋雞，隨機(jī)分為6組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)20只雞，隨機(jī)安排每個重復(fù)的組位。試驗(yàn)空白組飼喂基礎(chǔ)蛋雞飼糧，試驗(yàn)組分別投喂添加亞硒酸鈉、硒化卡拉膠、活性富硒酵母、機(jī)械破壁富硒酵母、酶解富硒酵母的蛋雞飼糧，硒源添加水平以硒元素含量0.3 mg/kg計算，每日每只雞飼喂量按110 g為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)期相對濕度保持在56%～64%，光照采取連續(xù)光照制度，23 h照明，1 h黑暗，自然通風(fēng)，自由飲水和采食，定期打掃雞舍，保持清潔衛(wèi)生。采用乳頭式飲水。

1.3 測定的指標(biāo)與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能的測定

試驗(yàn)期間每日以重復(fù)為單位收集產(chǎn)蛋，計算出平均蛋重以及產(chǎn)蛋率。飼喂期間每周1次結(jié)料、稱重，以重復(fù)為單位計算料蛋比、平均日采食量。

1.3.2 產(chǎn)蛋品質(zhì)的測定

預(yù)飼期1周結(jié)束后分別在正飼期7、14 d和21 d以重復(fù)為單位每個重復(fù)采集5枚蛋，測定蛋殼厚度、蛋殼比例、蛋白高度、蛋黃比例、蛋白比例。根據(jù)蛋重和蛋白高度計算出哈夫單位：Ha=100×lg[h+7.57-1.7×(w0.37)]，其中：h為測量蛋品的高度(mm)；w為測量蛋品的質(zhì)量(g)。

1.3.3 蛋硒含量的測定

參照GB5009.93—2017利用氫化物-原子熒光光譜法進(jìn)行蛋硒含量測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件中ANOVE進(jìn)行顯著性分析，采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 不同硒源對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表3 不同硒源對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，與飼喂基礎(chǔ)飼料組相比，外加硒源組的蛋雞產(chǎn)蛋率、平均蛋質(zhì)重均略有提高，但無顯著影響（P＞0.05），料蛋比有所降低，無顯著影響（P＞0.05），所有組別平均日采食量均不受外源硒添加的影響。該結(jié)果表明，飼糧中添加相同水平的不同硒源對蛋雞的生產(chǎn)性能無顯著影響。

2.2 不同硒源對蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)的影響

由表4可知，與基礎(chǔ)投料組Ⅰ相比，所有外加硒源組別的蛋白高度、哈夫單位、蛋黃比例、蛋白比例均無顯著差異（P＞0.05）。飼喂1周酵母硒組的蛋殼比例以及蛋殼厚度較亞硒酸鈉組無顯著差異，飼喂第2周、第3周酵母硒組的蛋殼比例以及蛋殼厚度較亞硒酸鈉組顯著增加（P＜0.05），且同種有機(jī)硒源第2周、第3周的蛋殼比例以及蛋殼厚度較第1周顯著增加。結(jié)果表明，隨著飼喂周期的延長，蛋雞飼糧中添加一定量的有機(jī)硒源可以增加蛋雞產(chǎn)蛋的蛋殼厚度及蛋殼比例，有利于改善蛋殼品質(zhì)。

2.3 不同硒源對蛋硒含量的影響

由表5可知，與基礎(chǔ)飼料飼喂蛋雞組相比，蛋雞飼料中添加一定水平外源硒可顯著提高蛋中硒的含量（P＜0.05)。飼喂第1周，試驗(yàn)組蛋硒含量較空白組分別提高27%、72%、100%、117%、125%。飼喂第2周，試驗(yàn)組蛋硒含量較空白組分別提高65%、78%、90%、110%、125%。飼喂第3周，試驗(yàn)組蛋硒含量較空白組分別提高71%、86%、90%、119%、132%。該結(jié)果同時顯示，隨著飼喂周期的增加，蛋中硒含量顯著增加（P＜0.05），并在第3周飼糧中添加酶解富硒酵母組達(dá)到最大值。與飼糧中添加無機(jī)硒組相比，飼糧中添加有機(jī)硒組蛋硒含量顯著增加（P＜0.05），這表明飼糧中添加有機(jī)硒源較無機(jī)硒源更能促進(jìn)蛋中硒的沉積。飼糧中添加富硒酵母組較硒化卡拉膠組蛋硒含量亦有顯著增加（P＜0.05），該結(jié)果表明，在蛋硒富集過程中酵母硒組轉(zhuǎn)化效率更高。

比較不同方式處理過的酵母硒組可以發(fā)現(xiàn)，機(jī)械破壁富硒酵母組與酶解富硒酵母組較活性富硒酵母組蛋硒含量顯著增加（P＜0.05），該結(jié)果表明不同處理方式可以影響酵母硒在蛋硒沉積過程中的轉(zhuǎn)化效率，其中自溶性富硒酵母組蛋硒含量最高。

3 討論

3.1 飼糧中添加有機(jī)硒、無機(jī)硒對蛋雞生產(chǎn)性能的影響比較

本研究結(jié)果表明，與基礎(chǔ)飼糧組相比，蛋雞飼料中添加0.3 mg/kg的硒對蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響（P＞0.05）。徐歡根等[9]和王宏祥等[10]研究發(fā)現(xiàn)，蛋雞飼糧中添加有機(jī)硒與無機(jī)硒對蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響，該結(jié)論與本試驗(yàn)一致。王興華等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加不同濃度的亞硒酸鈉和硒代氨酸對蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋重?zé)o顯著影響，但對平均日采食量有顯著影響。胡華鋒等[12]在蛋雞基礎(chǔ)飼糧中添加酵母硒、富硒苜蓿粉，飼喂38 d后發(fā)現(xiàn)富硒苜蓿顯著提高產(chǎn)蛋率，降低料蛋比，酵母硒組顯著提高產(chǎn)蛋率，該試驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)可能與高劑量酵母硒和富硒苜蓿的使用有關(guān)。崔國強(qiáng)等[13]在蛋雞飼糧中添加5.0 mg/kg的亞硒酸鈉與酵母硒發(fā)現(xiàn)酵母硒組較亞硒酸鈉組顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率，這很可能是由于較高水平亞硒酸鈉的添加對蛋雞機(jī)體產(chǎn)生氧化損傷，導(dǎo)致其生產(chǎn)性能受到影響。蔡娟等[14]認(rèn)為，蛋雞生產(chǎn)性能主要受蛋雞品種、日齡、飼料中硒含量以及硒源的影響。筆者認(rèn)為飼糧中添加硒可以提高蛋雞抗氧化能力，增強(qiáng)蛋雞免疫力，在一定程度上可以增強(qiáng)蛋雞生產(chǎn)性能，但由于本試驗(yàn)選用的蛋雞生產(chǎn)性能已經(jīng)達(dá)到較好水平，故對其生產(chǎn)性能的改善并不顯著。

表4 飼糧中添加不同硒源對蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)的影響

表5 飼料中添加不同硒源對產(chǎn)蛋硒含量的影響

3.2 飼糧中添加有機(jī)硒、無機(jī)硒對蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)的影響比較

本研究結(jié)果表明，與基礎(chǔ)飼糧組相比，蛋雞飼料中添加0.3 mg/kg硒對產(chǎn)蛋的蛋白高度、哈夫單位、蛋黃比例、蛋白比例均無顯著影響（P＞0.05）。在飼喂2周之后，與基礎(chǔ)飼糧組、亞硒酸鈉組相比，飼料中添加0.3 mg/kg有機(jī)硒源組的蛋殼厚度以及蛋殼比例顯著增加（P＜0.05）。盧建等[15]在蛋雞飼糧中添加0.3 mg/kg的酵母硒與亞硒酸鈉，經(jīng)過56 d的飼喂后發(fā)現(xiàn)與對照組相比，蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)無顯著差異（P＞0.05）。D.C.Bennett等[7]發(fā)現(xiàn)，在蛋雞飼糧中添加5.1 mg/kg的硒對蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)無顯著影響。徐歡根等[9]發(fā)現(xiàn)，無機(jī)硒與有機(jī)硒的添加對哈夫單位有一定程度的提高，尤其是有機(jī)硒組哈夫單位顯著提高。崔國強(qiáng)等[13]研究發(fā)現(xiàn)，酵母硒組蛋殼強(qiáng)度顯著高于亞硒酸鈉組，但亞硒酸鈉組的蛋白高度以及哈夫單位卻顯著高于酵母硒組。上述研究結(jié)論不盡一致，分析原因如下：無機(jī)硒在動物腸道是被動吸收，有機(jī)硒則主要是以硒代氨基酸的形式存在，其吸收方式為主動吸收[16-17]。無機(jī)硒要用于蛋白質(zhì)的合成必須從氧化態(tài)的硒還原成還原態(tài)硒化物的形式，而有機(jī)硒則可以直接用于蛋白質(zhì)的合成。在硒添加水平較低或飼喂周期較短的情況下，無機(jī)硒與有機(jī)硒的使用對產(chǎn)蛋品質(zhì)影響不顯著。但隨著硒添加水平的增加或飼喂周期的延長，由于有機(jī)硒更容易被動物腸道吸收，可以更好地在蛋殼或蛋內(nèi)沉積，故蛋殼厚度、蛋白高度與哈夫單位值會顯著增加。但當(dāng)有機(jī)硒的添加量過高時，蛋清硒沉積量過多致使硒出現(xiàn)過氧化作用，對蛋白產(chǎn)生一定的破壞，造成其蛋白高度、哈夫單位值的減小。因此在飼喂蛋雞過程中，正確控制硒源的添加方式才可以有效改善蛋雞產(chǎn)蛋品質(zhì)。

3.3 飼糧中添加有機(jī)硒、無機(jī)硒對蛋硒含量的影響比較

本研究結(jié)果表明，與基礎(chǔ)飼糧組相比，飼料中添加硒源可以使蛋硒含量顯著增加（P＜0.05）。與亞硒酸鈉組相比，飼糧中添加硒化卡拉膠或不同形式酵母硒組蛋硒含量顯著增加（P＜0.05）。孫慶艷等[18]研究了飼糧中添加亞硒酸鈉、酵母硒、蛋氨酸硒和納米硒對蛋硒含量的影響，結(jié)果顯示4種硒源均可顯著提高蛋硒含量，其中酵母硒組蛋硒富集效果最佳。

何柳青等[19]發(fā)現(xiàn)，在綠殼蛋雞飼料中添加酵母硒可使蛋黃硒含量極顯著增加。陳忠法等[20]在飼料中添加酵母硒進(jìn)行短期飼喂試驗(yàn)得到硒含量顯著增加的產(chǎn)蛋。虞澤鵬等[21]在蛋雞飼糧中添加10 mg/kg的硒酵母可使蛋硒含量極顯著提高，該硒添加水平已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出家禽飼料中硒添加量0.5 mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)，但因其飼養(yǎng)周期較短，蛋雞未出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。魏濤等[22]對比蛋雞飼糧中添加120 g/t酵母硒（酵母硒中硒含量2 000 mg/kg）與0.089 g亞硒酸鈉發(fā)現(xiàn)酵母硒組蛋硒含量顯著增加。近年來有大量關(guān)于無機(jī)硒與有機(jī)硒對蛋硒含量影響的報道，結(jié)果均表明飼喂蛋雞富硒飼糧可以顯著提高蛋硒含量，而且有機(jī)硒組較無機(jī)硒組蛋硒含量顯著增加，出現(xiàn)該一致結(jié)果的原因與有機(jī)硒和無機(jī)硒在動物體內(nèi)的吸收方式有關(guān)。無機(jī)硒是被動地擴(kuò)散通過腸壁，進(jìn)入小腸前會有部分被還原成為不溶性或不易被吸收硒化物，這種形式的硒并不被小腸吸收，而是直接從糞便排出；而有機(jī)硒中的硒代蛋氨酸會被主動輸送穿過腸壁，通過血液運(yùn)輸?shù)礁闻K與硒蛋白結(jié)合，或直接運(yùn)輸至機(jī)體組織與組織中的蛋白質(zhì)結(jié)合，其生物利用率高[23]。亦有研究者通過在蛋雞飼糧中添加高水平的無機(jī)硒來生產(chǎn)富硒雞蛋，但過量無機(jī)硒的添加不僅會導(dǎo)致蛋雞機(jī)體的氧化損傷，而且往往對蛋雞的生產(chǎn)性能和產(chǎn)蛋品質(zhì)不利，其效果遠(yuǎn)不如有機(jī)硒在蛋雞飼糧中的利用。

3.4 不同形式的酵母硒對蛋雞蛋硒含量的影響比較

與活性富硒酵母組相比，機(jī)械破壁富硒酵母、酶解富硒酵母組蛋硒含量顯著增加（P＜0.05），酶解富硒酵母組蛋硒含量最高。對于健康狀況相同、生長環(huán)境一致的蛋雞而言，酵母硒的吸收主要與硒在腸道轉(zhuǎn)運(yùn)時間和硒蛋白分子量的大小有關(guān)[24]。在蛋雞腸道中活性富硒酵母的細(xì)胞壁需要被水解才能釋放出細(xì)胞內(nèi)蛋白硒，蛋白硒在腸道中進(jìn)一步被分解為小肽或硒代氨基酸，最終被腸道主動吸收。相比之下，經(jīng)機(jī)械破壁技術(shù)處理過的富硒酵母，其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)被破壞，在蛋雞腸道中釋放出更多的硒蛋白或硒代蛋氨酸等有機(jī)硒，使硒的吸收利用率更高。Gordana Kralik等[25]通過在蛋雞飼料中添加0.4 mg/kg硒代蛋氨酸飼喂蛋雞得到了蛋白硒含量0.345 mg/kg、蛋黃硒含量0.783 mg/kg的產(chǎn)蛋。有報道稱酵母硒主要形式為硒半胱氨酸，這可能與培養(yǎng)基成分有關(guān)[26]。本試驗(yàn)選用的酵母硒主要以硒代蛋氨酸形式存在，除此之外還含有一定量的大分子硒蛋白。經(jīng)酶處理過的富硒酵母一方面細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)被破壞，另一方面由于該過程有蛋白酶的參與，較大分子量的硒蛋白可被水解為小肽或硒氨基酸，使得硒在蛋雞腸道中吸收效率進(jìn)一步提高。相關(guān)資料顯示，一般雞蛋中硒達(dá)到0.7～0.8 mg/kg水平時，飼料中硒的濃度在1～3 mg/kg之間，本試驗(yàn)在日糧中添加0.3 mg/kg的酶解富硒酵母，可以使蛋中的硒沉積達(dá)到0.47 mg/kg，已經(jīng)符合富硒蛋的標(biāo)準(zhǔn)且未超過GB 2762—2005中對蛋中硒含量的限定。杜立武等[27]在酵母硒對蛋硒含量影響試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在蛋雞飼料中添加0.3～0.4 mg/kg酵母硒，飼喂1周后即可達(dá)到富硒雞蛋的要求。綜合酵母硒添加量與蛋硒水平的關(guān)系，本研究認(rèn)為，在蛋雞飼糧中添加0.3 mg/kg的酶解富硒酵母適宜。

4 結(jié)論

①蛋雞飼糧中添加無機(jī)硒、有機(jī)硒均對蛋雞生產(chǎn)性能有一定改善，但無顯著影響。

②蛋雞飼糧中添加0.3 mg/kg的硒對產(chǎn)蛋的蛋白高度、蛋黃比例和哈夫單位均無顯著影響。隨著飼喂周期的延長，飼糧中添加有機(jī)硒對蛋殼品質(zhì)顯著改善。

③蛋雞飼糧中添加0.3 mg/kg硒可顯著提高蛋硒含量，其中酵母硒較無機(jī)硒更有利于蛋中硒的沉積。經(jīng)機(jī)械破壁富硒酵母和酶解富硒酵母比活性富硒酵母更能促進(jìn)硒在蛋中的沉積，酶解富硒酵母效果最佳。