范欽磊，張衍海，劉俊輝，王 棟，劉 飛，鄭增忍，蔣正軍

（中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)是獸醫(yī)工作的重要內(nèi)容，是保障動(dòng)物疫病防控效果的重要手段，是無(wú)疫區(qū)建設(shè)、管理和維持動(dòng)物疫病無(wú)疫狀態(tài)的關(guān)鍵措施[1]?？茖W(xué)開(kāi)展監(jiān)測(cè)工作，獲取監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)和信息，可為發(fā)現(xiàn)動(dòng)物疫病，監(jiān)視疫病流行趨勢(shì)，驗(yàn)證動(dòng)物衛(wèi)生措施合理性，證明無(wú)疫病或無(wú)感染狀態(tài)，建立公共衛(wèi)生決策和評(píng)估動(dòng)物衛(wèi)生狀況等獸醫(yī)工作提供信息和決策依據(jù)。

1 監(jiān)測(cè)在無(wú)疫區(qū)建設(shè)中的作用

1.1 證明無(wú)疫

按照“防控實(shí)現(xiàn)無(wú)疫、監(jiān)測(cè)證明無(wú)疫、監(jiān)管維持無(wú)疫、應(yīng)急恢復(fù)無(wú)疫”的總體要求，2008年農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《無(wú)規(guī)定動(dòng)物疫病區(qū)現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審表》[2]共涉及區(qū)域區(qū)劃、疫病狀況、基礎(chǔ)體系、預(yù)防監(jiān)測(cè)、檢疫監(jiān)管、應(yīng)急管理等6部分內(nèi)容，包括96項(xiàng)評(píng)審要素，其中10項(xiàng)關(guān)鍵項(xiàng)中與監(jiān)測(cè)相關(guān)的占4項(xiàng)，分別是在規(guī)定時(shí)間內(nèi)沒(méi)有發(fā)生規(guī)定動(dòng)物疫??；在規(guī)定時(shí)間內(nèi)無(wú)規(guī)定動(dòng)物疫病病原感染，并有相應(yīng)的監(jiān)測(cè)記錄；規(guī)定動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)范圍、監(jiān)測(cè)頻率和樣品數(shù)量符合要求；監(jiān)測(cè)記錄及結(jié)果真實(shí)、完整，檢測(cè)結(jié)果按規(guī)定報(bào)告?？茖W(xué)開(kāi)展監(jiān)測(cè)是各無(wú)疫區(qū)建設(shè)、管理和維持的關(guān)鍵因素，其中監(jiān)測(cè)樣品數(shù)量、監(jiān)測(cè)方式、檢測(cè)技術(shù)、監(jiān)測(cè)結(jié)果分析和處理等關(guān)系到是否能夠證明區(qū)域的無(wú)疫狀態(tài)。

1.2 提供早期預(yù)警參考

1.3 提供風(fēng)險(xiǎn)分析數(shù)據(jù)和信息

無(wú)疫區(qū)建設(shè)和評(píng)估，要求獸醫(yī)機(jī)構(gòu)定期組織風(fēng)險(xiǎn)分析工作，無(wú)論是無(wú)疫區(qū)的外源風(fēng)險(xiǎn)還是內(nèi)源風(fēng)險(xiǎn)，如規(guī)定動(dòng)物疫病的流行率、流行病學(xué)調(diào)查情況、監(jiān)測(cè)情況、引入動(dòng)物是否存在病原擴(kuò)散可能、動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品加工過(guò)程是否存在病原擴(kuò)散的可能等風(fēng)險(xiǎn)因素，均需要通過(guò)開(kāi)展監(jiān)測(cè)獲取相關(guān)支持信息和數(shù)據(jù)。

1.4 探索流通監(jiān)管新模式

目前，對(duì)進(jìn)入無(wú)疫區(qū)的繼續(xù)飼養(yǎng)用易感動(dòng)物普遍采用產(chǎn)地檢疫、指定通道進(jìn)入和二次檢疫的監(jiān)管模式。積極探索建立以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和相關(guān)動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)為前提的產(chǎn)地檢疫制度，增加了產(chǎn)地檢疫的技術(shù)含量，減少了主觀因素對(duì)產(chǎn)地檢疫結(jié)果判定的不利影響，使得產(chǎn)地檢疫程序更加合理，判定更加科學(xué)，結(jié)果更加權(quán)威，能夠進(jìn)一步強(qiáng)化對(duì)輸入無(wú)疫區(qū)易感動(dòng)物的監(jiān)管[3]。

2 國(guó)際無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)要求

2.1 世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）

《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)測(cè)要求：動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)測(cè)根據(jù)監(jiān)測(cè)目的不同主要分為證明無(wú)疫或無(wú)感染的監(jiān)測(cè)，確定動(dòng)物疫病分布情況和發(fā)生狀況的監(jiān)測(cè)。證明無(wú)疫監(jiān)測(cè)的抽樣數(shù)量應(yīng)滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)的相關(guān)要求，計(jì)算抽樣數(shù)量需要考慮置信水平、預(yù)期流行率和診斷檢測(cè)方法的敏感性和特異性等因素，預(yù)期流行率的確定是基于當(dāng)前或歷史動(dòng)物疫病的流行病學(xué)狀況。

2.2 巴西、哥倫比亞等國(guó)家

一是重視被動(dòng)監(jiān)測(cè)。強(qiáng)化對(duì)水泡性疫病的監(jiān)測(cè)和確診力度，對(duì)任何疑似病例均按照口蹄疫確診患病動(dòng)物處理。二是科學(xué)開(kāi)展主動(dòng)監(jiān)測(cè)。主要是根據(jù)OIE的原則要求，開(kāi)展兩步法抽樣監(jiān)測(cè)，其中被采樣單位的牛只為6～24月齡犢牛，按月齡分為6～12、13～18、19～24月齡3組，僅對(duì)牛抽樣監(jiān)測(cè)，不監(jiān)測(cè)豬。進(jìn)行兩步法抽樣監(jiān)測(cè)時(shí)，設(shè)定的群間預(yù)期流行率為1%，群內(nèi)預(yù)期流行率為5%。三是強(qiáng)化對(duì)邊界區(qū)域和高風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)區(qū)的主動(dòng)監(jiān)測(cè)。清楚區(qū)域內(nèi)輸入車輛和易感動(dòng)物的數(shù)量，對(duì)易感動(dòng)物疑似畜群和動(dòng)物開(kāi)展檢疫檢測(cè)，對(duì)自然村的所有易感動(dòng)物都要進(jìn)行檢疫，撲殺來(lái)源不清的易感動(dòng)物[4]。

3 國(guó)內(nèi)無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)要求

農(nóng)業(yè)部自2014年以來(lái)，在《國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》[5]中逐步納入了免疫無(wú)口蹄疫區(qū)監(jiān)測(cè)計(jì)劃、免疫無(wú)高致病性禽流感區(qū)監(jiān)測(cè)計(jì)劃和廣州從化無(wú)規(guī)定馬屬動(dòng)物疫病區(qū)監(jiān)測(cè)計(jì)劃，要求已建成或申請(qǐng)?jiān)u估的無(wú)疫區(qū)參照相關(guān)計(jì)劃開(kāi)展監(jiān)測(cè)工作。

3.1 免疫無(wú)口蹄疫區(qū)和免疫無(wú)高致病性禽流感區(qū)監(jiān)測(cè)要求

每個(gè)無(wú)疫區(qū)每年至少主動(dòng)監(jiān)測(cè)兩次，其中每次抽樣數(shù)量為，海南省不少于4 500份，遼寧、吉林省和膠東半島無(wú)疫不少于9 000份（包括保護(hù)區(qū)）。每個(gè)抽樣點(diǎn)易感動(dòng)物抽樣數(shù)量不少于30頭/只，不足30頭/只的全采；對(duì)牛采樣時(shí)，采樣月齡為6～24月齡。區(qū)域內(nèi)有易感野生動(dòng)物的，應(yīng)對(duì)易感野生動(dòng)物開(kāi)展監(jiān)測(cè)。

3.2 廣州從化無(wú)規(guī)定馬屬動(dòng)物疫病區(qū)監(jiān)測(cè)要求

3.2.1 主動(dòng)監(jiān)測(cè) 每年至少開(kāi)展兩次主動(dòng)監(jiān)測(cè)，其中對(duì)馬屬動(dòng)物開(kāi)展馬流行性感冒、馬傳染性貧血、馬鼻疽、日本腦炎、伊氏錐蟲(chóng)病、馬病毒性動(dòng)脈炎、馬梨形蟲(chóng)病及馬媾疫監(jiān)測(cè)，抽樣點(diǎn)應(yīng)覆蓋無(wú)疫區(qū)和保護(hù)區(qū)。對(duì)豬、牛、羊等易感動(dòng)物開(kāi)展日本腦炎和伊氏錐蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)，抽樣點(diǎn)應(yīng)覆蓋無(wú)疫區(qū)和保護(hù)區(qū)的養(yǎng)殖場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、自然村和生物安全通道等。對(duì)蟲(chóng)媒和野生動(dòng)物開(kāi)展日本腦炎、伊氏錐蟲(chóng)病、尼帕病、亨德拉、西尼羅河熱及水泡性口炎的調(diào)查和監(jiān)測(cè)。

1) 對(duì)相鄰回波互相關(guān)函數(shù)進(jìn)行FFT變換得到式(7)，最大值譜線處對(duì)應(yīng)的速度值為vm，假設(shè)左右次譜線處對(duì)應(yīng)的速度值分別為v1，v2，則真實(shí)速度v∈(v1,v2)；

3.2.2 被動(dòng)監(jiān)測(cè) 對(duì)疑似患病、病死、病因不明的馬屬動(dòng)物以及豬、牛、羊、野鳥(niǎo)、蝙蝠等其他動(dòng)物，100%采樣送檢。

4 無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)中存在的問(wèn)題

4.1 缺乏科學(xué)有效的數(shù)據(jù)

缺乏科學(xué)有效的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)及歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，大部分動(dòng)物疫病歷史流行狀況不清楚，很難科學(xué)確定無(wú)疫區(qū)規(guī)定動(dòng)物疫病的群間或群內(nèi)預(yù)期流行率，也難以科學(xué)界定流行病學(xué)單元[6]。

4.2 缺乏特定動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)方案

沒(méi)有定期、科學(xué)、系統(tǒng)和持續(xù)的病原及抗體監(jiān)測(cè)計(jì)劃，沒(méi)有足夠證據(jù)證明動(dòng)物的無(wú)疫狀態(tài)及免疫效果。一些在建無(wú)疫區(qū)所在省份的監(jiān)測(cè)工作仍然是以完成國(guó)家監(jiān)測(cè)計(jì)劃為主，沒(méi)有針對(duì)無(wú)疫區(qū)建設(shè)制定相應(yīng)的監(jiān)測(cè)方案，也沒(méi)有相應(yīng)的無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)經(jīng)費(fèi)支持[6]。

4.3 部分監(jiān)測(cè)方法和試劑沒(méi)有經(jīng)過(guò)標(biāo)化和評(píng)估

多數(shù)診斷試劑沒(méi)有注明敏感性和特異性值，導(dǎo)致在進(jìn)行抽樣計(jì)算時(shí)樣品量計(jì)算不準(zhǔn)確。以口蹄疫檢測(cè)為例，口蹄疫3ABC非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽(yáng)性的排除方法相對(duì)單一，商品化檢測(cè)試劑與國(guó)際接軌程度有待提高[6]。

5 有關(guān)思考

5.1 提高監(jiān)測(cè)方案的科學(xué)性

制定無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)方案時(shí)應(yīng)考慮監(jiān)測(cè)范圍的覆蓋面、監(jiān)測(cè)時(shí)間框架和時(shí)效性以及監(jiān)測(cè)陽(yáng)性結(jié)果的后續(xù)處理等因素，重點(diǎn)關(guān)注外引易感動(dòng)物監(jiān)測(cè)、高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)易感動(dòng)物監(jiān)測(cè)和易感野生動(dòng)物的監(jiān)測(cè)，強(qiáng)化對(duì)被動(dòng)監(jiān)測(cè)工作的要求等，進(jìn)一步提升無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)方案的科學(xué)性。

5.2 注重監(jiān)測(cè)工作的銜接性

開(kāi)展無(wú)疫區(qū)建設(shè)的省份應(yīng)根據(jù)年度國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃的相關(guān)要求，制定本省的無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)計(jì)劃或方案，其他規(guī)定動(dòng)物疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)、常規(guī)監(jiān)測(cè)或?qū)ｍ?xiàng)流行病學(xué)調(diào)查中所涉及的抽樣檢測(cè)的樣品和結(jié)果，均可以用于證明規(guī)定動(dòng)物疫病的無(wú)疫狀態(tài)。

5.3 重視被動(dòng)監(jiān)測(cè)的重要性

我國(guó)基層獸醫(yī)機(jī)構(gòu)在監(jiān)測(cè)工作中常常忽視了被動(dòng)監(jiān)測(cè)工作的重要性，對(duì)養(yǎng)殖、屠宰、加工和流通環(huán)節(jié)的利益相關(guān)方宣傳和培訓(xùn)力度不夠，導(dǎo)致利益相關(guān)方難以有效履行發(fā)現(xiàn)臨床疑似病例或疫情的義務(wù)，獸醫(yī)機(jī)構(gòu)在證明無(wú)疫狀態(tài)時(shí)，因缺少有效的被動(dòng)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)支撐，而使監(jiān)測(cè)方案的科學(xué)性受到質(zhì)疑。無(wú)疫區(qū)建設(shè)省份應(yīng)重視被動(dòng)監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)對(duì)上報(bào)的臨床疑似病例開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查和確診等工作。

6 制定無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)方案的建議

6.1 明確監(jiān)測(cè)目標(biāo)和要求[7]

6.1.1 明確目標(biāo) 無(wú)疫區(qū)監(jiān)測(cè)方案旨證明無(wú)疫區(qū)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)沒(méi)有發(fā)生規(guī)定動(dòng)物疫病，且沒(méi)有監(jiān)測(cè)到規(guī)定動(dòng)物疫病病原。

6.1.2 明確部門職能

6.1.2.1 省級(jí)獸醫(yī)主管部門 負(fù)責(zé)組織區(qū)域內(nèi)的規(guī)定動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和監(jiān)測(cè)方案的制定工作，監(jiān)測(cè)方案應(yīng)明確監(jiān)測(cè)范圍、監(jiān)測(cè)方式、抽樣方法以及對(duì)無(wú)疫狀態(tài)的監(jiān)測(cè)要求等；掌握區(qū)域內(nèi)易感動(dòng)物（包括易感野生動(dòng)物）的分布情況及易感動(dòng)物的養(yǎng)殖方式、種類和數(shù)量等。

6.1.2.2 省級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu) 具體實(shí)施監(jiān)測(cè)工作，從事動(dòng)物飼養(yǎng)、屠宰、經(jīng)營(yíng)、隔離、運(yùn)輸以及動(dòng)物產(chǎn)品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、加工及貯藏等活動(dòng)的單位和個(gè)人應(yīng)予以配合。

6.1.2.3 監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室 建立保證檢測(cè)工作規(guī)范、準(zhǔn)確、公正運(yùn)行的質(zhì)量保證體系。實(shí)驗(yàn)室必須擁有為保證其質(zhì)量管理體系的運(yùn)行、檢測(cè)所需的專業(yè)技術(shù)人員和管理人員，并應(yīng)定期對(duì)抽樣人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行培訓(xùn)。

6.1.3 明確監(jiān)測(cè)范圍與標(biāo)準(zhǔn)

6.1.3.1 監(jiān)測(cè)范圍 包括無(wú)疫區(qū)和保護(hù)區(qū)內(nèi)的種畜禽場(chǎng)、商品畜禽場(chǎng)、活畜禽交易市場(chǎng)、野生易感動(dòng)物密集活動(dòng)區(qū)和隔離、屠宰加工、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)的易感動(dòng)物（包括野生動(dòng)物）及其相關(guān)傳播媒介。

6.1.3.2 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢測(cè)方法、農(nóng)業(yè)部指定的檢測(cè)方法或OIE《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》和《陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)和疫苗手冊(cè)》的相關(guān)檢測(cè)方法；沒(méi)有檢測(cè)方法時(shí)，可采用其他國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或診斷試劑提供的方法進(jìn)行檢測(cè)，但需對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

6.2 確定監(jiān)測(cè)方式

6.2.1 開(kāi)展被動(dòng)監(jiān)測(cè) 從事動(dòng)物飼養(yǎng)、隔離、屠宰加工、運(yùn)輸及經(jīng)營(yíng)等活動(dòng)的有關(guān)單位和個(gè)人，發(fā)現(xiàn)臨床疑似病例或懷疑發(fā)生疫情時(shí)應(yīng)立即報(bào)告當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)。從事動(dòng)物疫病科研、診療、檢驗(yàn)檢疫以及檢測(cè)的相關(guān)機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性或可疑結(jié)果時(shí)應(yīng)報(bào)當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)，并定期向其報(bào)告日常診療和檢測(cè)匯總信息。動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)在接到疑似疫情報(bào)告、可疑或陽(yáng)性病料（樣品）和疫情舉報(bào)后，應(yīng)立即開(kāi)展現(xiàn)場(chǎng)核查、流行病學(xué)調(diào)查、抽樣和實(shí)驗(yàn)室確診等工作。

6.2.2 開(kāi)展主動(dòng)監(jiān)測(cè) 無(wú)疫區(qū)主動(dòng)監(jiān)測(cè)可通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、疫情監(jiān)視和實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)獲取數(shù)據(jù)和信息。

6.2.2.1 流行病學(xué)調(diào)查 省級(jí)獸醫(yī)主管部門可通過(guò)開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查，系統(tǒng)獲取流行病學(xué)信息和監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，分析動(dòng)物疫病狀況。

6.2.2.2 疫情監(jiān)視 動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)可對(duì)動(dòng)物飼養(yǎng)、屠宰加工、運(yùn)輸、經(jīng)營(yíng)和隔離檢疫等環(huán)節(jié)進(jìn)行定期或不定期巡查或開(kāi)展疫情普查，獲取相關(guān)信息。

6.2.2.3 實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè) （1）監(jiān)測(cè)頻率和監(jiān)測(cè)時(shí)間。綜合考慮動(dòng)物疫病流行病學(xué)特點(diǎn)、易感動(dòng)物生產(chǎn)周期和國(guó)家對(duì)監(jiān)測(cè)頻率的相關(guān)規(guī)定，確定監(jiān)測(cè)頻率和監(jiān)測(cè)時(shí)間。蟲(chóng)媒性動(dòng)物疫病的監(jiān)測(cè)時(shí)間應(yīng)主要集中在蟲(chóng)媒活動(dòng)高峰期和繁殖高峰期。（2）抽樣。通過(guò)調(diào)查動(dòng)物疫病流行病學(xué)特點(diǎn)、歷史狀況和日常監(jiān)測(cè)情況等信息，確定流行病學(xué)單元和預(yù)期流行率，計(jì)算抽樣數(shù)量。群間預(yù)期流行率的確定應(yīng)考慮動(dòng)物疫病的流行病學(xué)特征、區(qū)域內(nèi)每個(gè)流行病學(xué)單元之間的距離、歷史狀況和日常監(jiān)測(cè)情況等因素；群內(nèi)預(yù)期流行率的確定應(yīng)重點(diǎn)考慮動(dòng)物疫病流行病學(xué)特征等因素。對(duì)區(qū)域養(yǎng)殖數(shù)量少，且易感動(dòng)物養(yǎng)殖數(shù)量和分布清楚，證明無(wú)疫時(shí)可采取簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣計(jì)算抽樣數(shù)量。對(duì)區(qū)域面積大，且易感動(dòng)物養(yǎng)殖數(shù)量大，難以準(zhǔn)確掌握養(yǎng)殖數(shù)量和分布，證明無(wú)疫時(shí)可按照兩步法抽樣技術(shù)進(jìn)行樣品采集。第一步抽取流行病學(xué)單元，第二步從流行病學(xué)單元內(nèi)抽取易感動(dòng)物。樣品總量等于抽取的流行病學(xué)單元數(shù)量乘以抽取的易感動(dòng)物數(shù)量。（3）抽樣原則。抽樣點(diǎn)包括區(qū)域內(nèi)的全部縣（市區(qū)），抽樣時(shí)應(yīng)覆蓋到每個(gè)縣（市區(qū)）中飼養(yǎng)、屠宰加工、運(yùn)輸、經(jīng)營(yíng)及隔離檢疫等所有環(huán)節(jié)，根據(jù)各環(huán)節(jié)的風(fēng)險(xiǎn)權(quán)重大小確定抽樣比例和抽樣數(shù)量，每個(gè)環(huán)節(jié)不能重復(fù)抽樣。抽取的樣品應(yīng)涵蓋區(qū)域內(nèi)的所有易感動(dòng)物，根據(jù)不同易感動(dòng)物的數(shù)量確定抽樣比例和抽樣數(shù)量。對(duì)于蟲(chóng)媒性動(dòng)物疫病的監(jiān)測(cè)，應(yīng)根據(jù)傳播媒介生活和繁殖特性設(shè)置監(jiān)測(cè)點(diǎn)，在蟲(chóng)媒活動(dòng)高峰期和繁殖高峰期采集蟲(chóng)媒進(jìn)行監(jiān)測(cè)。抽樣工作必須在監(jiān)測(cè)方案下達(dá)后的規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成。（4）采用血清學(xué)、病原學(xué)和分子生物學(xué)等檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)抗體、病原或核酸。