王宏宇，馬梓承，孟凡亮，劉照虎，劉思當(dāng)

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271000）

副豬嗜血桿菌病（Haemophilus parasuis，HPS）也稱豬格勒賽爾氏?。℅lasser's disease），是由副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis，Hps）引起的豬的一種傳染病。以豬全身漿液-纖維素性漿膜炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎、腦膜炎，后期伴有肺炎為主要特征。目前，該病呈世界性分布，近幾年在我國(guó)的發(fā)病率有升高的趨勢(shì)，并常伴發(fā)其他疾病，影響生豬生產(chǎn)的各個(gè)階段，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的危害。

1 病原及流行病學(xué)

HPS是革蘭氏陰性小桿菌，形態(tài)多樣，血清型至少有21個(gè)，其中70%的常見血清型為4、5、13[1]。本菌有很強(qiáng)的宿主特異性，僅感染豬，尤其是斷奶前后的仔豬。對(duì)外界環(huán)境的抵抗力弱，常見的消毒劑即可將其消滅。由于該病菌難以分離，因此給臨床診斷帶來(lái)了較大的困難。

HPS的主要傳染源是病豬、帶菌豬，尤其是帶菌豬，往往能造成較大面積的傳播。除SPF豬以為，一般的豬均帶有該菌，存在于健康豬的呼吸道內(nèi)，弱毒性。發(fā)病率的高低一般與豬的免疫狀況及個(gè)體免疫密切相關(guān)。此外，長(zhǎng)途運(yùn)輸、氣候變化等應(yīng)激因素也會(huì)導(dǎo)致該病的發(fā)生。任何年齡的豬均可感染該病，但斷奶仔豬及保育階段的豬較容易發(fā)病。該病四季均可發(fā)生，但春、秋、冬三季的發(fā)病率相比于夏季要高。在整個(gè)豬群中，HPS的致病作用主要是與其他病毒性呼吸道冠狀病毒相關(guān)，也與支原體肺炎的逐漸流行相關(guān)。

Hps是呼吸道的常在菌，一般用拭子在健康豬的鼻腔、扁桃體內(nèi)均可分離得到。但是為了能夠分離到致病性的Hps以及對(duì)分離到的Hps進(jìn)行分類定型，一般建議不使用拭子，因?yàn)檫@樣常常會(huì)分離到非致病性的Hps，通常都從病死豬尸體的心臟、肺臟和腦等組織或腹腔液、腦室液、心包液及關(guān)節(jié)液中分離致病菌[2]。

2 診斷

2.1 臨床癥狀

HPS的臨床癥狀主要取決于炎性損傷的部位。初次感染的豬群發(fā)病很快，接觸病原幾天內(nèi)就發(fā)病。主要臨床癥狀為咳嗽、呼吸困難、消瘦、跛行以及被毛粗亂。繁殖母豬一般不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀，2～8周齡的仔豬感染發(fā)病后可呈現(xiàn)出典型癥狀。該病主要有急性型和慢性型，但一般豬場(chǎng)以慢性型為主。

急性型病豬體溫高達(dá)41°C，精神沉郁，食欲減退，咳嗽，呼吸困難，關(guān)節(jié)腫脹、踱行、同時(shí)出現(xiàn)身體顫抖，共濟(jì)失調(diào)，可視黏膜發(fā)紺，3 d左右死亡[3]。急性感染后可能留下后遺癥，即母豬流產(chǎn)、公豬慢性跛行、仔豬和育肥豬有呼吸道癥狀及神經(jīng)癥狀。慢性型通常由急性型轉(zhuǎn)化而來(lái)，病豬逐漸消瘦虛弱，被毛粗亂無(wú)光澤，皮膚發(fā)白，咳嗽，呈腹式呼吸，關(guān)節(jié)腫大，嚴(yán)重時(shí)皮膚發(fā)紅，不能站立，耳朵發(fā)紺，少數(shù)病例會(huì)出現(xiàn)突然死亡。

2.2 剖檢病變

特征性病理變化表現(xiàn)為纖維素性胸膜肺炎、纖維素性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎及腦炎，胸腔內(nèi)有大量的淡紅色液體及纖維素性滲出物。心包與心外膜粘連，其腔內(nèi)有奶酪樣滲出物；肺臟表面覆有大量纖維素性滲出物，與胸壁粘連。各臟器有不同程度的出血、淤血和壞死。胸、腹腔積液增多，含有少量纖維素。病變關(guān)節(jié)周圍腫大，有波動(dòng)感，關(guān)節(jié)囊內(nèi)有膠凍狀滲出物，關(guān)節(jié)面因有纖維素和壞死物而顯得粗糙。

2.3 病原分離鑒定

由于Hps廣泛存在，可以從健康豬的鼻腔、氣管、肝臟、脾臟、關(guān)節(jié)和腦膜取病料，接種到含有NAD的TSA平板上，24～48 h后挑取灰白或透明、光滑呈露珠樣的菌落，并與含有NAD的TSA平板上單菌落劃線純化培養(yǎng)，于48 h后做細(xì)菌涂片，革蘭氏染色鏡檢。Hps的鏡檢結(jié)果為革蘭氏陰性細(xì)小桿菌，有莢膜，無(wú)芽胞，形態(tài)多樣，從短桿狀到細(xì)絲狀，以短桿狀為主。

2.3.1 血清學(xué)方法

血清學(xué)方法因其特異性、快速和靈敏得到了廣泛的應(yīng)用。國(guó)內(nèi)外已經(jīng)建立起來(lái)的血清學(xué)方法主要包括間接血凝試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)等，其中補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可以檢測(cè)Hps的抗體滴度，存在一定的交叉反應(yīng)；瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)是比較有效的方法之一，缺點(diǎn)是檢測(cè)時(shí)間偏長(zhǎng)[4]。

2.3.2 分子生物學(xué)方法

隨著生命科學(xué)的快速進(jìn)展，在科研領(lǐng)域中，鑒于血清學(xué)方法存在波動(dòng)性、不準(zhǔn)確和不一致性，病原菌的檢測(cè)中引入了新的分子生物學(xué)方法。目前，應(yīng)用于副豬嗜血桿菌檢測(cè)的分子生物學(xué)方法主要是針對(duì)DNA分子水平的檢測(cè)，包括常規(guī)PCR、原位雜交、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）等檢測(cè)方法，以及細(xì)菌基因間重復(fù)序列PCR、限制性片段多態(tài)性分析、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法等新型的分子生物學(xué)方法可以鑒定不同血清型的病原菌[5]。

3 預(yù)防與治療

3.1 預(yù)防

加強(qiáng)豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理，防止各種應(yīng)激因素的發(fā)生；改善養(yǎng)殖環(huán)境，豬舍要保持干燥清潔、空氣清潔、溫度適宜，堅(jiān)持定期消毒殺菌、驅(qū)蟲滅鼠，禁止在飼養(yǎng)區(qū)飼養(yǎng)其他動(dòng)物；保證飼料的質(zhì)量，做好藥物保健工作，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫力和抗病力；完善生物安全措施，尤其要做好其他疫病的免疫檢測(cè)工作；盡量減少仔豬的斷奶應(yīng)激、飼料應(yīng)激、環(huán)境應(yīng)激。

控制主要疾病例如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒病、豬流感等疾病的發(fā)生，預(yù)防性地注射抗生素和疫苗才可以綜合預(yù)防該病。因?yàn)镠ps的寄居與豬的早期生活有關(guān)（小于10日齡），隔離飼養(yǎng)尚未能成功防治該病，必須注重綜合防治[6]。減少應(yīng)激和接種疫苗對(duì)于種豬疾病預(yù)防來(lái)說(shuō)具有重要的意義，從斷奶到保育階段是HPS預(yù)防的重中之重，采用Hps多價(jià)滅活菌苗（含血清型 4、5、12、13）的免疫效果明顯，保護(hù)能力強(qiáng)，安全可靠。除做好常規(guī)免疫外，需經(jīng)常監(jiān)測(cè)母源抗體，分娩前需免疫1次。一旦豬場(chǎng)發(fā)病，仔豬在15～60日齡時(shí)要實(shí)施緊急接種，半個(gè)月后加強(qiáng)免疫1次；待疫情穩(wěn)定后全場(chǎng)2～3周齡的仔豬進(jìn)行常規(guī)免疫副豬嗜血桿菌疫苗[6]。

若已從豬體內(nèi)分離出Hps，可以使用福爾馬林滅活的自家苗進(jìn)行有效預(yù)防。但是于Hps的交叉保護(hù)有限，對(duì)一種血清型的預(yù)防并不能確保避免其他血清型的感染。

3.2 治療

HPS的病程通常很短，且如果不經(jīng)過(guò)治療，病豬會(huì)死亡。所以，需及時(shí)對(duì)病豬給予口服藥物治療以及非腸道給藥治療。臨床藥敏試驗(yàn)表明，該菌對(duì)喹諾酮類、頭孢類、磺胺類、氨基糖苷類等藥物敏感。但是由于HPS血清型較多，從不同豬場(chǎng)分離的Hps的菌株敏感度不同。因此，治療前須做藥敏試驗(yàn)[7]。同時(shí)，根據(jù)該病菌易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，采取盡早、交替、聯(lián)合對(duì)癥下藥原則。臨床癥狀出現(xiàn)初期，立即使用泰拉菌素、頭孢噻肟、氨芐青霉素、阿莫西林、卡那霉素和慶大霉素等敏感藥物，進(jìn)行大劑量注射治療，其中較為常見的藥物為頭孢噻肟、阿莫西林、氟苯尼考和氟喹諾酮類等[8,9]，一旦臨床癥狀已經(jīng)出現(xiàn)，應(yīng)對(duì)整個(gè)豬群所有豬注射大劑量的抗生素進(jìn)行治療，而不能只對(duì)表現(xiàn)癥狀的豬用藥。在治療期間，適量輔喂氟苯尼考、替米考星、阿莫西林、維生素（維生素C、維生素E、維生素A）、黃芪多糖，按說(shuō)明拌料或飲水添加，有顯著增強(qiáng)抵抗力的作用，有助于患豬迅速恢復(fù)食欲，縮短治愈期[10]。

3.3 綜合防控

豬場(chǎng)防控該病要遵循“養(yǎng)重于防，防重于治”的方針，獸醫(yī)要制定嚴(yán)格的防疫制度，要提高飼料質(zhì)量，注意環(huán)境衛(wèi)生，各階段豬群全進(jìn)全出，豬舍消毒后要有空置期，分級(jí)飼養(yǎng)，減少豬群流動(dòng)，定期對(duì)圈舍進(jìn)行消毒，減少應(yīng)激，定期采血鑒定血清型，有針對(duì)性地加強(qiáng)疫苗免疫，并做藥敏試驗(yàn)，預(yù)防性給藥，嚴(yán)格控制豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病以及豬鏈球菌病等疾病的發(fā)生[11,12]。HPS發(fā)病很快，確診和治療都有困難，要求豬場(chǎng)技術(shù)員能盡早發(fā)現(xiàn)病豬,并對(duì)整個(gè)豬群采取控制措施。Hps存在眾多血清型，提示研制更有效的多價(jià)苗迫在眉睫；混合感染多發(fā)，也提示研制HPS與其他豬病的多聯(lián)苗有望成為防治該病的重要手段，所以運(yùn)用基因工程的手段研制具有交叉保護(hù)的疫苗是預(yù)防和控制HPS的必然趨勢(shì)，研究識(shí)別母源抗體與自身抗體的快速檢測(cè)方法亦有助于準(zhǔn)確確定疫苗注射的時(shí)機(jī)，進(jìn)而加強(qiáng)免疫效果。