謝 晶，李羨筠，鄭艷艷，梁恒秋，梁丹玉

（廣西壯族自治區(qū)職業(yè)病防治研究院，南寧 530021）

WHO首份預防自殺報告指出：農(nóng)藥中毒是全球最為常見的自殺方法之一[1]。全球每年至少有300萬人發(fā)生嚴重的急性農(nóng)藥中毒，致死率較高，僅亞洲農(nóng)村地區(qū)每年就有30萬人死于農(nóng)藥中毒[2]。我國2008—2014年急性農(nóng)藥中毒共發(fā)生18 975例，年平均發(fā)生2 711例[3]。農(nóng)藥中毒已成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。急性毒性試驗作為農(nóng)藥毒理學安全性評價的第一階段，對農(nóng)藥的毒性評估起關(guān)鍵性作用。本試驗采用農(nóng)藥毒理學急性毒性試驗方法，對殺蟲劑、除草劑、殺菌劑的急性毒性進行分析比較，為其他毒性試驗提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試物

80種農(nóng)藥原藥，包括殺蟲劑（19種）、除草劑（41種）、殺菌劑（20種）。

1.2 實驗動物

健康成年大鼠（SPF級），體重180～220 g，用于急性經(jīng)口毒性試驗、急性吸入毒性試驗（簡稱“經(jīng)口、吸入”）；體重200～300 g，用于急性經(jīng)皮毒性試驗（簡稱“經(jīng)皮”）。新西蘭大白兔（普通級），體重2.0～3.0 kg，用于眼刺激試驗、急性皮膚刺激試驗（簡稱“眼刺、皮刺”）。豚鼠（普通級），體重250～300g，用于皮膚變態(tài)反應（致敏）試驗（簡稱“致敏”）。大鼠、兔檢疫3 d，豚鼠檢疫6 d，無異常即可用于試驗，大鼠灌胃前禁食16 h左右。

1.3 方法

按照《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》（GB 15670—1995）中急性毒性試驗方法進行經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入、眼刺、皮刺、致敏試驗，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 13.0軟件。

1.4 判定標準

大鼠急性毒性判定標準按照《農(nóng)藥登記資料規(guī)定》（2007年版）中產(chǎn)品毒性分級標準，其他結(jié)果評定均參照《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》。若大鼠出現(xiàn)雌、雄不同毒級時，以最高毒級為準。

2 結(jié)果與分析

2.1 急性毒性試驗結(jié)果

經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入試驗結(jié)果賦值標準：1級，微毒；2級，低毒；3級，中等毒；4級，高毒；5級，劇毒。眼刺試驗結(jié)果賦值標準：0級，無刺激性；1級，輕度刺激性；2級，輕度至中度刺激性；3級，中度刺激性；4級，中度至重度刺激性；5級，重度刺激性。皮刺試驗結(jié)果賦值標準：0級，無刺激性；1級，輕度刺激性；2級，中度刺激性；3級，重度刺激性。致敏試驗賦值標準：1級，弱致敏物；2級，輕度致敏物；3級，中度致敏物；4級，強致敏物；5級，極強致敏物。

各受試農(nóng)藥毒性試驗結(jié)果見表1～表3。

表1 19種殺蟲劑急性毒性試驗結(jié)果

表2 41種除草劑急性毒性試驗結(jié)果

表3 20種殺菌劑急性毒性試驗結(jié)果

2.2 急性經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入毒性試驗結(jié)果分析

受試農(nóng)藥急性經(jīng)口毒性以低毒為主，其次是微毒，少部分是中等毒；所測農(nóng)藥中，中等毒殺蟲劑數(shù)量最多，其后依次為殺菌劑、除草劑。SPSS趨勢檢驗結(jié)果為x2=6.816，P=0.010。說明3類農(nóng)藥經(jīng)口毒性分布不同，殺蟲劑隨毒級增大數(shù)量增多；殺菌劑隨毒級增大數(shù)量減少；除草劑以低毒為主，其次是微毒，僅炔草酯為中等毒，試驗統(tǒng)計結(jié)果見表4。

表4 大鼠急性經(jīng)口試驗結(jié)果統(tǒng)計

大鼠急性經(jīng)皮毒性除殺蟲劑甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽為中等毒，其他試驗農(nóng)藥均為低毒。SPSS趨勢檢驗結(jié)果為x2=2.199，P=0.227。說明3類農(nóng)藥經(jīng)皮毒性無統(tǒng)計學差別。各農(nóng)藥急性吸入毒性均為低毒。

2.3 兔眼刺激、皮膚刺激，豚鼠致敏試驗結(jié)果分析

兔眼刺激試驗結(jié)果統(tǒng)計見表5。供試農(nóng)藥中，殺蟲劑對兔眼的刺激性隨刺激程度加強數(shù)量呈遞減趨勢；除草劑以無刺激性為主，其次是輕度刺激性、中度刺激性。殺菌劑以無刺激性居多，但殺菌劑克菌丹對兔眼具有重度刺激性，且21 d眼刺激癥狀未恢復。SPSS趨勢檢驗結(jié)果為x2=0.181，P=0.681，說明3類農(nóng)藥對兔眼的刺激強度無統(tǒng)計學差別。

表5 兔眼刺激試驗結(jié)果統(tǒng)計

各農(nóng)藥對兔皮膚刺激癥狀均在染毒后14 d消失，兔急性皮膚刺激試驗結(jié)果見表6。供試農(nóng)藥中殺蟲劑、殺菌劑對兔皮膚多無刺激性，少數(shù)為輕度刺激性；除草劑對兔皮膚均無刺激性。SPSS趨勢檢驗結(jié)果為x2=0.850，P=0.421。說明所測3類農(nóng)藥對兔皮膚刺激強度無統(tǒng)計學差別。受檢農(nóng)藥均為弱致敏物。

表6 兔急性皮膚刺激試驗結(jié)果統(tǒng)計

3 討論

本次研究顯示：受試農(nóng)藥急性經(jīng)口毒性以低毒為主，其次是微毒，少數(shù)是中等毒。受試農(nóng)藥中，經(jīng)口毒性為中等毒的殺蟲劑數(shù)量較多；除草劑以低毒為主，其次是微毒，僅1個品種為中等毒。除殺蟲劑甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽急性經(jīng)皮毒性為中等毒，其他受試農(nóng)藥均為低毒。受試農(nóng)藥的急性吸入毒性均為低毒。孫新友等[4]研究結(jié)果顯示：91種農(nóng)藥制劑對家蠶急性毒性試驗中，殺蟲劑中等及以上毒性品種超過90%，且所有劇毒品種均為殺蟲劑；供試的12種除草劑均對家蠶低毒。殺蟲劑毒性最高，與本次試驗結(jié)果一致。2011年1月至2015年12月間，宜賓市某醫(yī)院收治的1 556例農(nóng)藥中毒病例中，死亡35例，病死率為2.25%。其中，引起中毒者死亡的農(nóng)藥多為殺蟲劑和除草劑，分別致死17例和16例，兩者死亡病例占總中毒死亡病例的94.29%[5]。本次試驗中，中等毒農(nóng)藥殺蟲劑數(shù)量高于殺菌劑，除草劑數(shù)量最少，涉及的品種包括殺蟲劑二溴磷、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、殺螟丹、殺蟲單、阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、氟蟲腈，殺菌劑三環(huán)唑、乙蒜素，除草劑炔草酯。以上農(nóng)藥毒性偏高的殺蟲劑類別為有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、抗生素類。其中，有機磷類殺蟲劑是引起急性中毒數(shù)量最多的農(nóng)藥類別，其在動物體內(nèi)與膽堿酯酶結(jié)合，使乙酰膽堿在體內(nèi)過量堆積，激活膽堿能受體（毒蕈堿或煙堿受體），從而對哺乳動物產(chǎn)生毒性[6]。針對以上農(nóng)藥，接觸者要注意自我安全防護。

本次研究還顯示：受試農(nóng)藥對兔眼、皮膚以無刺激性為主，其次是輕度刺激性；受試農(nóng)藥對兔眼還存在輕度至中度、中度、重度刺激性，引起兔眼中度刺激的農(nóng)藥品種包括二溴磷、滅草松、2,4-滴、麥草畏、2甲4氯。除滅草松對兔眼和皮膚存在中等刺激性有明確報道外[7]，其他農(nóng)藥對兔眼的刺激性報道甚少。2,4-滴為具有苯氧羧酸結(jié)構(gòu)的合成激素類除草劑，其較強的內(nèi)吸傳導性可能是導致兔眼刺激癥狀嚴重的原因。麥草畏是選擇性內(nèi)吸傳導型苗后除草劑，其持效期長，會使試驗動物體重減輕，肝臟受損，雌性容易流產(chǎn)，嚴重時還會造成失明[8]。2甲4氯屬于有機氯類除草劑，為具有選擇性的內(nèi)吸傳導型莖葉除草劑。急性、亞慢性試驗結(jié)果顯示，其對肝臟產(chǎn)生一定程度的損害[9]。

供試80種農(nóng)藥原藥急性毒性以低毒為主，少數(shù)為中等毒。農(nóng)藥使用者要規(guī)范農(nóng)藥施用，妥善保管和存放農(nóng)藥，加強個體防護；農(nóng)藥生產(chǎn)者應研發(fā)高效、微毒、低殘留農(nóng)藥，以降低農(nóng)藥對健康的損害。