溫正輝
(嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院藥劑科,廣東梅州 514031)
蒲桃是桃金娘科的常綠喬木,屬于馬來群島與印度的主要原產(chǎn)地,在我國海南島也有人工栽培的蒲桃。在古典藥物奠基中有著關(guān)于蒲桃的記載,如《本草再新》中有“味甘酸,性熱,無毒;人脾、肺二經(jīng);暖胃健脾”。蒲桃當(dāng)中的不同部位均能夠入藥,以葉、花、果、種子以及樹皮為主。對此,探討蒲桃不同提取部位總黃酮含量比較研究具備顯著實際意義。
本次研究主要應(yīng)用了UV102的紫外可見光光度計、CP225D型的電子太平以及RE52-86A旋轉(zhuǎn)的蒸發(fā)器以及循環(huán)水系統(tǒng)。在藥物材料的選擇方面以蘆丁作為對照品,藥物由生物制品檢驗所提供。蒲桃藥材來源于廣西,通過鑒定屬于桃金娘科蒲桃,試劑均屬于分析純。
首先,制備對照品溶液,采用15 mg蘆丁放入到50 mL溶液瓶中并加入乙醇搖勻,將宜春西施到定容和刻度后制作成為蘆丁儲備液,蘆丁濃度為0.304,8 mg/mL,同樣方式配置對照品儲備液,蘆丁的濃度控制為9.578 mg/mL[1]。其次,部位的清膏制備。采用蒲桃粗粉1 g,加入70%乙醇溶液,以常規(guī)加熱之后回流2 h處理,濾液蒸干到無醇味之后殘渣加水25 mL混懸處理,根據(jù)1:1的體積加入不同蒲桃部位;再次,供試品的溶液制備。采用上述不同部位的蒲桃清膏放入到10 mL瓶中,加入乙醇溶液并實行溶解與定容。精密度以1 mL位置,放入到10 mL的量瓶中,加入5%亞硝酸鈉溶液,6 min之后加入10%硝酸鋁,6 min后再加入氫氧化鈉,采用70%乙醇稀釋搖勻;最后,標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[2]。將所蝴蝶的儲備液分別放置在10 mL量瓶當(dāng)中,在獲得標(biāo)準(zhǔn)溶液之后以510 nm的波長測定吸光度,吸光度以對照品的濃度作為橫坐標(biāo),繪制曲線,在獲得回歸方程后結(jié)果顯示普調(diào)的不同提取部位總黃酮在15.25 μg/mL-76.25 μg/mL。另外,在穩(wěn)定試驗中,粗粉1 g按照處理之后,采取乙醇乙酯浸膏,在510 nm位置分別處理0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h后測定吸光度,吸光度的RSD為1.2%,結(jié)果顯示樣品室溫之下放置2 h最為穩(wěn)定。
在回流的溫度方面需要控制在80oC,回流的時間為2 h,料液比例控制在1:100,乙醇的濃度需要適當(dāng)提高盡可能保障蒲桃的黃銅提取量最大化,并且之后呈現(xiàn)出下降的趨勢。料液比應(yīng)當(dāng)為1:100,此時隨著時間的延長蒲桃的總黃酮溶出率會不斷提升,在時間2 h左右時達(dá)到最大[3]。對此,可以將最佳的提取時間控制為2 h。提取的溫度方面,乙醇的濃度為70%、時間2 h以及料液比1:100的條件之下,溫度的提升會促使黃酮的提取量不斷提高,并且黃酮類的化合物處于乙醇當(dāng)中時溶解度與溫度呈現(xiàn)出正相關(guān),所以需要嚴(yán)格控制熱效應(yīng)這一問題。乙醇的提取屬于一個次要的位置,一般情況下80oC應(yīng)當(dāng)為黃銅提取最佳溫度。在對比顯色之后,對照品與供試品在510 nm的位置上呈現(xiàn)出了最佳的吸收,所以最佳波長應(yīng)當(dāng)為510 nm。
綜上所述,蒲桃的不同部位在總黃酮提取方面的總量并不相同,其中石油醚部位的總黃酮提取量最低,總量從低到高除了石油醚最低以外,其余部位的排名水部位、正丁醇部位以及氯仿、乙酸乙酯。乙酸乙酯部位的總黃酮提取量最高,并且屬于中等極性的化合物。在本次研究當(dāng)中,所應(yīng)用的提取方式操作簡單同時重復(fù)性優(yōu)勢突出,在黃酮提取方面的專屬價值也比較明顯,可以準(zhǔn)確地測定黃酮的數(shù)值,可以為今后黃酮提取提供可靠的技術(shù)幫助,并且能夠為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供指導(dǎo)幫助。