李廣權(quán)，周衛(wèi)東，鐘培英，徐夢嬌

(三六三醫(yī)院檢驗(yàn)科，成都 610041)

床旁檢驗(yàn)(point of care testing，POCT)血糖儀的準(zhǔn)確性是通過定期與臨床實(shí)驗(yàn)室生化儀血糖結(jié)果比對(duì)來驗(yàn)證校準(zhǔn)[1]，按照2010年《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖儀管理和臨床操作規(guī)范》：要求每半年與本機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室生化儀血糖結(jié)果比對(duì)[2]，比對(duì)方法和結(jié)果判斷按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T19634-2005執(zhí)行，標(biāo)準(zhǔn)中雖提及了可以使用末梢血和靜脈血標(biāo)本[3]，在實(shí)際比對(duì)中由于血糖儀數(shù)量較多，一般采用靜脈血標(biāo)本，但該標(biāo)準(zhǔn)以及ISO15197-2003，ISO15197-2013中均沒有明確采用何種抗凝劑靜脈血[4，5]。雖然POCT血糖儀日常監(jiān)測一般取患者末梢血，但在POCT血糖儀比對(duì)時(shí)，為防止比對(duì)過程中糖酵解的影響，最好采用含有糖酵解抑制劑的樣本[6]，目前廣泛應(yīng)用于臨床的糖酵解抑制劑主要為氟化鈉[7-9]，但氟化鈉是否對(duì)POCT血糖儀檢測結(jié)果存在干擾，目前未查見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本文通過比較不同濃度氟化鈉抗凝血POCT血糖儀檢測結(jié)果的差異，探討氟化鈉對(duì)POCT血糖儀的干擾影響，為POCT血糖儀比對(duì)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對(duì)象：招募參與實(shí)驗(yàn)研究的健康志愿者(本科室員工及本屆檢驗(yàn)實(shí)習(xí)同學(xué))20例，年齡20～30歲，男性8例，女性12例。

1.1.2 儀器及試劑耗材：德國羅氏ACCU-CHEK Performa血糖儀(葡萄糖脫氫酶法)及配套檢測試紙(批號(hào)：475203)和質(zhì)控液(批號(hào)：50101076)；日本東芝120生化儀。葡萄糖試劑(己糖激酶法，批號(hào)0316041)，四川邁克公司生產(chǎn)；葡萄糖定標(biāo)液(C.F.A.S，批號(hào)176158)，德國羅氏診斷用品公司生產(chǎn)；復(fù)合質(zhì)控液(批號(hào)897UN，697UE)，英國朗道公司生產(chǎn)。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)樣本管(批號(hào)：20160501)，成都瑞琦公司生產(chǎn)；不同濃度氟化鈉(NaF/EDTA-K2)樣本管(NaF含量分別為0.2，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0 mg/ml)，由成都瑞琦公司代工生產(chǎn)。

1.2 方法 每天安排5例研究對(duì)象于上午8：00左右采集空腹靜脈血，每例采集1支EDTA-K2樣本管和6支含不同濃度氟化鈉樣本管，每管2 ml。采樣結(jié)束對(duì)7支樣本管顛倒混勻8次后立即用同一臺(tái)羅氏ACCU-CHEK Performa血糖儀檢測全血葡萄糖水平，然后將所有樣本管以RCF 3 270×g離心5 min后在生化儀上進(jìn)行血漿葡萄糖檢測，連續(xù)進(jìn)行4天。上述檢測均按實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)文件，每天生化儀與POCT血糖儀室內(nèi)質(zhì)控通過后進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室血糖生化儀與POCT血糖儀均通過衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的能力驗(yàn)證(PT)。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度氟化鈉組間樣本管血糖水平比較 見表1。按氟化鈉濃度不同進(jìn)行分組，POCT血糖儀檢測不同濃度氟化鈉組間比較采用方差分析，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=12.192，P<0.001)；采用LSD法進(jìn)行方差分析多重比較，不含NaF組血糖水平分別與其它含NaF組血糖水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.001)，含NaF不同組間血糖水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；生化儀檢測不同濃度氟化鈉組間血糖水平比較，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.428，P=0.829)。

表1 不同含量氟化鈉樣本管兩種儀器檢測血糖結(jié)果比較

2.2 POCT血糖儀與生化儀檢測血糖水平比較 見表1。相同濃度氟化鈉樣本管兩儀器檢測血糖水平比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。不含氟化鈉樣本管兩儀器檢測血糖水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.457，P=0.358)；含相同濃度氟化鈉樣本管兩儀器檢測血糖水平比較，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-14.415，-14.746，-13.613，-14.108，-15.253，-14.069，均P<0.01)。

3 討論

準(zhǔn)確測量血糖對(duì)糖尿病診斷尤為重要，但由于離體血液標(biāo)本在轉(zhuǎn)運(yùn)、放置、處理過程中紅細(xì)胞仍不停地酵解，因此《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖儀管理和臨床操作規(guī)范》要求，POCT血糖儀比對(duì)后45 min內(nèi)須完成生化儀血漿血糖檢測[2]。如果比對(duì)的血糖儀數(shù)量較多，使用無糖酵解抑制劑的樣本管很難控制糖酵解的影響。目前有關(guān)更好地抑制糖酵解方面的研究較多[10-14]，廣泛應(yīng)用于國內(nèi)臨床的糖酵解抑制劑主要為氟化鈉：具有抗凝和防止糖酵解雙重作用，但未查見氟化鈉和其它糖酵解抑制劑對(duì)POCT血糖儀干擾結(jié)果影響的研究報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，羅氏ACCU-CHEK Performa血糖儀檢測含氟化鈉的樣本管血糖結(jié)果明顯低于不含氟化鈉的樣本管，生化儀與POCT血糖儀檢測不含氟化鈉樣本管血糖無明顯差異，表明氟化鈉對(duì)羅氏ACCU-CHEK Performa血糖儀有明顯的抑制作用。筆者認(rèn)為可能的原因：由于羅氏ACCU-CHEK Performa血糖儀采用的葡萄糖脫氫酶法，氟化鈉在一定程度上抑制了醌蛋白葡萄糖脫氫酶的活性，引起血糖儀測定的微電流強(qiáng)度降低[15]，從而導(dǎo)致血糖儀檢測含氟化鈉的樣本血糖值偏低，但微電流降低的程度與氟化鈉濃度并無直接的關(guān)系，這與本研究發(fā)現(xiàn)氟化鈉濃度與血糖結(jié)果抑制程度無明顯相關(guān)是一致的。至于何種糖酵解抑制劑對(duì)采用葡萄糖脫氫酶法的POCT血糖儀無明顯抑制作用，還有待進(jìn)一步研究。有研究表明[16]，含氟化鈉的樣本對(duì)采用葡萄糖氧化酶法檢測的POCT血糖儀并無抑制作用，但由于葡萄糖氧化酶法的POCT血糖儀受其它因素的影響，這也是近幾年各廠家陸續(xù)推出葡萄糖脫氫酶法POCT血糖儀的原因[17]。同時(shí)本研究未發(fā)現(xiàn)氟化鈉對(duì)采用己糖激酶法的生化儀血糖結(jié)果有抑制作用，己糖激酶法目前作為檢測血糖的參考方法，期待采用己糖激酶法的POCT血糖儀早日應(yīng)用于臨床，以減少因方法學(xué)不同造成檢測結(jié)果的差異。

綜上所述，氟化鈉對(duì)采用葡萄糖脫氫酶法的POCT血糖儀結(jié)果有明顯抑制作用，抑制程度與氟化鈉濃度無明顯相關(guān)，氟化鈉不宜作為葡萄糖脫氫酶法POCT血糖儀比對(duì)標(biāo)本的糖酵解抑制劑，至于何種糖酵解抑制劑適合還需進(jìn)一步研究。同時(shí)期待采用己糖激酶法的POCT血糖儀早日應(yīng)用于臨床。