周凌博，李繼仁

（婁底職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南婁底417000）

乳酸菌固態(tài)制劑是由乳酸菌經(jīng)過培養(yǎng)、發(fā)酵、稀釋、干燥等工藝制成（付麗，2016）。研究表明，乳酸菌作為一種益生菌，可以調(diào)節(jié)畜禽腸道菌群平衡，抑制腸道致病菌定植，提高動物機(jī)體免疫力和生長性能等，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中（孫玉章，2015；枉侯軍，2015）。但關(guān)于乳酸菌干粉固態(tài)制劑報道較少。因此，本試驗(yàn)在21日齡的三黃肉雞基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的乳酸菌固態(tài)制劑，旨在探討其對三黃肉雞生長性能和免疫機(jī)能的影響，為其進(jìn)一步在臨床中應(yīng)用及推廣提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器 乳酸菌固態(tài)制劑主要包括乳酸桿菌、乳酸、檸檬酸等，其中乳酸桿菌≥100萬cfu/g購于山東寶來利來生物工程股份有限公司；免疫球蛋白IgG、IgA、IgM ELISA檢測試劑盒購于Elabscience公司；全自動酶標(biāo)儀由德國EPPENDOR公司生產(chǎn)；隔水式恒溫培養(yǎng)箱由上海一恒科技儀器有限公司生產(chǎn)；ND陽性血清、PBS、1.5 mL EP管、移液槍等常規(guī)的試劑及儀器由本實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 基礎(chǔ)日糧配比 采用玉米—豆粕型基礎(chǔ)日糧，飼養(yǎng)水平參照美國NRC（1994）肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制（表1），配制過程中不添加任何益生菌制劑和抗菌藥物。

1.3 試驗(yàn)動物及設(shè)計 采用單因素設(shè)計試驗(yàn)，選擇體重相近的3周齡三黃肉雞600只（由婁底地區(qū)規(guī)?；怆u示范基地提供），隨機(jī)分成4組，每個組3個重復(fù)，每個重復(fù)50只，1組飼喂基礎(chǔ)日糧為空白對照，2、3、4組在基礎(chǔ)日糧中分別添加1.0%、1.5%、2.0%的乳酸菌固態(tài)制劑，試驗(yàn)期為21 d。每個試驗(yàn)組每個重復(fù)單獨(dú)平面飼養(yǎng)，自由采食和飲水。按常規(guī)的飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行飼養(yǎng)與管理，按照免疫程序?qū)υ囼?yàn)肉雞進(jìn)行相關(guān)疫苗免疫接種。

1.4 指標(biāo)測定及方法

1.4.1 生長性能的測定 在試驗(yàn)開始與結(jié)束，提前斷料12 h，對每個試驗(yàn)組中每只肉雞逐個稱重，在試驗(yàn)期間記錄每個試驗(yàn)組肉雞的采食量和耗料量，計算各組的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADF）和料重比（F/G）。

1.4.2 免疫指標(biāo)的測定 試驗(yàn)結(jié)束后（21 d），每個試驗(yàn)組中每個重復(fù)組隨機(jī)抽取5只肉雞翅下靜脈采血，37℃孵育30 min，離心分離血清，-20℃保存。按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行檢測血清中免疫球蛋白的IgG、IgM、IgA含量。參照付麗（2016）報道方法，用血凝抑制試驗(yàn)測定試驗(yàn)肉雞新城疫抗體效價水平。

1.5 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan's法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異顯著性。

表1 日糧組成與營養(yǎng)水平

2 結(jié)果

2.1 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞生長性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組的ADFI均高于1組，但是差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3組和4組的ADF較1組分別提高10.56%、8.52%（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3組和4組的F/G較1組分別降低16.30%、12.82%（P＜0.05）。試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），2組低于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞生長性能測定結(jié)果

2.2 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞免疫指標(biāo)的影響由表3可知，試驗(yàn)3、4組試驗(yàn)肉雞血清中IgG含量較1組分別提高35.58%、34.29%（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2、3、4組試驗(yàn)肉雞血清中IgM、IgA含量均高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3、4組肉雞血清中ND抗體效價水平較1組分別提高25.36%、21.73%（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞免疫指標(biāo)檢測結(jié)果

3 討論

3.1 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞生長性能的影響 孫玉章等（2015）發(fā)現(xiàn)，在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加一定量的乳酸菌復(fù)合制劑可以提高肉雞的生產(chǎn)性能。付麗等（2016）報道，乳酸菌培養(yǎng)物可以提高肉雞生長性能，降低料肉比?？琢钣碌龋?013）研究表明，在基礎(chǔ)日糧中添加一定量的含有乳酸菌的微生態(tài)制劑可以提高肉鴨生長性能。本試驗(yàn)表明，試驗(yàn)2、3、4組的ADFI均高于1組，但是未達(dá)到差異顯著的水平（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的ADF顯著高于空白對照組（P＜0.05），F(xiàn)/G顯著低于空白對照組（P＜0.05）。因而證實(shí)乳酸菌固態(tài)制劑可以提高三黃肉雞的生長性能，其中以1.5%添加為適宜?？赡苡捎谌樗峋虘B(tài)制劑可以促進(jìn)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)在肉雞腸道內(nèi)的消化與吸收，提高飼料利用率，因而提高生長性能。另外乳酸菌固態(tài)制劑與乳酸菌培養(yǎng)物及培養(yǎng)液相比，更利于保存，方便操作。

3.2 乳酸菌固態(tài)制劑對三黃肉雞免疫指標(biāo)的影響 血清中免疫蛋白在動物機(jī)體免疫中起著重要作用，可以誘導(dǎo)動物機(jī)體體液免疫應(yīng)答，因此，血清中免疫蛋白含量是評價機(jī)體免疫水平重要指標(biāo)（呂春炎，2017；張召興，2017）。付麗等（2016）報道，乳酸菌培養(yǎng)物可以提高肉雞血清中免疫球蛋白IgG、IgA含量。袁翔（2014）研究表明，VBNC狀態(tài)乳酸菌突變體可以提高肉雞血清中免疫球蛋白的含量。本研究表明，試驗(yàn)2、3、4組肉雞血清中IgM、IgA含量均高于對照組，但差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的血清中IgG顯著高于空白對照組（P＜0.05），證實(shí)了乳酸菌固態(tài)制劑可以提高三黃肉雞的血清中免疫球蛋白含量，從而提高機(jī)體免疫機(jī)能。新城疫（ND）是危害養(yǎng)雞業(yè)主要傳染性疾病之一，其抗體水平的變化是機(jī)體體液免疫的狀態(tài)指標(biāo)之一。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)3、4組的血清中ND抗體效價顯著高于空白對照組（P＜0.05），從而證實(shí)了乳酸菌固態(tài)制劑可以顯著提高三黃肉雞的ND抗體效價水平。與徐基利（2011）、張志焱等（2013）報道一致?？赡苡捎谌樗峋虘B(tài)制劑可以調(diào)節(jié)禽類腸道菌群平衡、抑制腸道致病菌定植、提高飼料利用率，促進(jìn)肉雞的生長發(fā)育，因而提高機(jī)體內(nèi)免疫球蛋白及ND抗體水平，從而提高機(jī)體的免疫機(jī)能。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加1.5%乳酸菌固態(tài)制劑可以提高三黃肉雞生長性能和免疫機(jī)能。