鄭捷，方慶全，陳安敏

（廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科，廈門(mén) 361003）

術(shù)中快速冷凍切片作為一種工具，已廣泛應(yīng)用于臨床外科手術(shù)中對(duì)患者進(jìn)行快速組織學(xué)診斷，并在此基礎(chǔ)上決定手術(shù)方案及手術(shù)范圍。冷凍切片的效率與質(zhì)量直接影響術(shù)中病理診斷的快速性和準(zhǔn)確性[1]。淋巴結(jié)組織作為術(shù)中快速冷凍切片常見(jiàn)的標(biāo)本之一，組織結(jié)構(gòu)致密，細(xì)胞豐富，被膜為致密的結(jié)締組織，且外圍常被脂肪組織包繞，因組織成分的特殊性，其冷凍切片一直是病理技術(shù)中快速冷凍切片的難點(diǎn)。目前，探索淋巴結(jié)組織術(shù)中快速冷凍切片條件的報(bào)道較少。因此，作者經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)，從組織冷凍前是否運(yùn)用“吸水吸油”法、小淋巴結(jié)組織的擺放方式及冷凍切片機(jī)冷凍頭設(shè)置的溫度3 個(gè)方面進(jìn)行對(duì)比，探討淋巴結(jié)組織冷凍切片的優(yōu)化方案，以期提高淋巴結(jié)冷凍切片的效率與質(zhì)量，為術(shù)中病理診斷及手術(shù)方案的制定提供保障。

材料與方法

1 材料

標(biāo)本均來(lái)源于2018 年1 月至2019 年7 月廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院送檢至病理科的120 例淋巴結(jié)組織術(shù)中快速冷凍標(biāo)本，包括腋窩前哨淋巴結(jié)82 例，氣管前淋巴結(jié)18 例，右喉返神經(jīng)旁淋巴結(jié)16 例，左右髂總淋巴結(jié)4 例。

2 設(shè)備與試劑

設(shè)備：LEICA CMl950 冷凍切片機(jī)(德國(guó)萊卡)；DAKEWE(達(dá)科為)全自動(dòng)染色機(jī)。試劑：包埋劑，AAF 液 (由95%乙醇A：乙酸A：甲醛F= 85：5：10 組成)，蘇木素染液，1%鹽酸乙醇液，飽和碳酸鋰溶液，0.5%酸化伊紅，75%乙醇，85%乙醇，95%乙醇，無(wú)水乙醇等。

3 取材

取材時(shí)保持取材臺(tái)、取材器械干燥，新鮮送檢的淋巴結(jié)組織應(yīng)盡量將周?chē)闹窘M織去除，按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行取材：淋巴結(jié)組織大?。?.5cm×0.5cm×0.3cm者不進(jìn)行取材，直接用于冰凍切片，每3 個(gè)淋巴結(jié)組織置于同一個(gè)冷凍切片機(jī)托頭上（小淋巴結(jié)組）；淋巴結(jié)組織大小≥0.5×0.5×0.3cm且＜2×2×0.3cm 者，將組織一剖為二，將剖開(kāi)的兩塊淋巴結(jié)置于同一個(gè)冷凍切片機(jī)托頭上（中等大小淋巴結(jié)組）；淋巴結(jié)組織大小≥2×2×0.3cm 者，剖開(kāi)淋巴結(jié)，切取一塊大小約為 1.5×1.5×0.3cm 的淋巴結(jié)組織，置于一個(gè)冷凍切片機(jī)托頭上（大淋巴結(jié)組）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，120 例淋巴結(jié)術(shù)中快速冷凍標(biāo)本共有冷凍頭350 個(gè)，其中甲組冷凍頭168 個(gè)，乙組冷凍頭120 個(gè)，丙組冷凍頭62 個(gè)。

4 “吸水吸油”方法

將無(wú)粉塵家用擦手紙剪裁成條帶狀，取材完成的淋巴結(jié)組織置于條帶的一端，反復(fù)輕柔的按壓吸去表面的少量水分，將擦手紙對(duì)折輕輕推動(dòng)淋巴結(jié)組織向前滾動(dòng)，盡量將脂滴擠出，隨后再將“吸水吸油”后的淋巴結(jié)組織進(jìn)行冷凍切片。此操作尤其需要注意的是“吸水吸油”過(guò)程的按壓滾動(dòng)不能過(guò)于用力，盡量避免因人為因素造成組織細(xì)胞形態(tài)的損壞（圖1）。

5 冷凍切片的制備

取材后的淋巴結(jié)組織是否進(jìn)行“吸水吸油”操作：從不同取材的小淋巴結(jié)組、中等大小淋巴結(jié)組、大淋巴結(jié)組3 組各取20 個(gè)冷凍頭，隨機(jī)分為兩組，每組30 個(gè)冷凍頭。一組淋巴結(jié)組織進(jìn)行“吸水吸油”操作且小淋巴結(jié)組織并列排列，加適量的進(jìn)口OCT包埋劑，將托頭連同組織放置于已預(yù)先設(shè)置冷凍臺(tái)溫度為-25℃，樣本頭溫度為-20℃的冷凍切片機(jī)內(nèi)冷凍后進(jìn)行制片（“吸水吸油”組）；另一組淋巴結(jié)組織不進(jìn)行“吸水吸油”（非“吸水吸油”組），其余操作同“吸水吸油”組。切片后立即置于AAF液固定30s 后放入DAKEWE 全自動(dòng)染色機(jī)內(nèi)，按《臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學(xué)分冊(cè)》[2]介紹的染色方法進(jìn)行HE 染色：流水沖洗5s→新鮮配制蘇木素染液90s→流水沖洗15s→1%鹽酸乙醇液ls→流水沖洗ls→飽和碳酸鋰溶液4s→流水沖洗15s→0.5%酸化伊紅2s→流水沖洗15s→75%乙醇2s→85%乙醇2s→95%乙醇ls→無(wú)水乙醇ls，染色結(jié)束吹干，中性樹(shù)膠封片。統(tǒng)計(jì)分析“吸水吸油”組與非“吸水吸油”組冷凍制片的時(shí)間和切片質(zhì)量中無(wú)皺褶、無(wú)裂隙、無(wú)冰晶3 項(xiàng)指標(biāo)的得分情況。

小淋巴結(jié)組織是否并列排列：從小淋巴結(jié)組取60 個(gè)冷凍頭，“吸水吸油”操作后隨機(jī)分為兩組，每組30 個(gè)冷凍頭。一組（圖2C）3 枚淋巴結(jié)組織并列排列，其余操作同“吸水吸油”操作組（并列排列組）；另一組（圖2D）3 枚淋巴結(jié)組織隨意放置（非并列排列），其余操作同“吸水吸油”操作組（隨意放置組）。統(tǒng)計(jì)淋巴結(jié)組織并列排列組與淋巴結(jié)組織隨意放置組的冷凍制片的時(shí)間和無(wú)皺褶、無(wú)裂隙、無(wú)冰晶3 項(xiàng)指標(biāo)的得分情況。

設(shè)置不同的冷凍切片機(jī)樣本頭溫度：從小淋巴結(jié)組、中等大小淋巴結(jié)組、大淋巴結(jié)組3 組各取30個(gè)冷凍頭，經(jīng)“吸水吸油”操作后隨機(jī)分為3 組，每組30 個(gè)冷凍頭，冷凍切片機(jī)箱體溫度均設(shè)置為-25℃。第一組設(shè)置冷凍切片機(jī)樣本頭溫度為-20℃（-20℃組）；第二組設(shè)置冷凍切片機(jī)樣本頭溫度為-12℃（-12℃組）；第3 組設(shè)置冷凍切片機(jī)樣本頭溫度為-30℃（-30℃組），其余操作同“吸水吸油”操作組。統(tǒng)計(jì)分析冷凍切片機(jī)冷凍頭溫度為-20℃、-12℃、-30℃ 3 組冷凍制片時(shí)間及無(wú)皺褶、無(wú)裂隙、無(wú)冰晶3 項(xiàng)指標(biāo)的得分情況。

圖1 “吸水吸油”法具體操作步驟。A，取材完成的淋巴結(jié)組織置于紙帶的一端；B，將紙帶對(duì)折，反復(fù)輕柔的按壓吸去表面的少量水分；C，用紙帶輕輕推動(dòng)淋巴結(jié)組織向前滾動(dòng)，盡量將脂滴擠出Fig. 1 Operation steps of water absorption and oil absorption method. A, the selected lymph node tissue was placed at one end of the paper tape； B, fold the paper tape in half and gently press repeatedly to absorb a small amount of water on the surface； C, gently push the lymph node tissue forward with the paper tape to squeeze out the fat droplets as far as possible

圖2 小淋巴結(jié)組織排列方式。A，并列排列組3 枚淋巴結(jié)組織并列排列；B，隨意放置組3 枚淋巴結(jié)組織隨意放置（非并列排列）Fig. 2 Arrangement of small lymph node tissues. A, Juxtaposed Group； three lymph nodes were arranged side by side； B, Randomly Placed； Group three lymph nodes were randomly placed（not in a row）

6 冷凍制片時(shí)效性與切片質(zhì)量評(píng)價(jià)

冷凍切片時(shí)效性：制片時(shí)間從病理醫(yī)師取材完成后開(kāi)始計(jì)時(shí)，制片完成立即置于AAF 液固定視為計(jì)時(shí)結(jié)束，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

冷凍切片質(zhì)量評(píng)價(jià)：為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，切片質(zhì)量評(píng)價(jià)由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理主管技師進(jìn)行雙盲閱片。從組織切片有無(wú)皺褶、有無(wú)裂隙、有無(wú)冰晶3 個(gè)方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，以10 分制評(píng)分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：若切片的組織無(wú)皺褶、無(wú)裂隙、無(wú)冰晶，每項(xiàng)指標(biāo)得分均為10 分；若切片上a%面積的組織出現(xiàn)相應(yīng)的指標(biāo)，則指標(biāo)得分為10-a/10。例如，某切片上30%面積的組織有皺褶，則該切片無(wú)皺褶指標(biāo)得分為10-30/10=7 分。以此類(lèi)推。3 項(xiàng)指標(biāo)得分≥8 分的冷凍切片視為合格切片，指標(biāo)有一項(xiàng)或多項(xiàng)低于8 分的冷凍切片均視為不合格切片。

7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,各觀察指標(biāo)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示，用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，計(jì)數(shù)資料用百分率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)分析組間差異，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 “吸水吸油”操作對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的影響

“吸水吸油”組與非“吸水吸油”組冷凍切片時(shí)效性比較：兩組冷凍切片制片時(shí)間分別為（93.6±0.6）s 和（168.0±2.7）s，“吸水吸油”組制片時(shí)間遠(yuǎn)少于非“吸水吸油”組（P＜0.01）。

兩組冷凍切片質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)得分結(jié)果見(jiàn)表1。由表1 可見(jiàn)，“吸水吸油”組無(wú)皺褶、無(wú)裂隙2 個(gè)方面指標(biāo)均顯著高于非“吸水吸油”組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！拔汀苯M（圖3A）冷凍切片組織間隙小，皺褶現(xiàn)象較少見(jiàn)；非“吸水吸油”組（圖3B）組織間隙寬，出現(xiàn)大面積的皺褶現(xiàn)象，極大影響術(shù)中冰凍的診斷。兩組無(wú)冰晶指標(biāo)得分相近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！拔汀苯M3 項(xiàng)指標(biāo)得分≥8 分有26 個(gè)冷凍頭，合格率為87%（26/30），非“吸水吸油”組3 項(xiàng)指標(biāo)均≥8 分僅有3 個(gè)冷凍頭，合格率為10%（3/30），兩組合格率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=35.31，P＜0.01）。

圖3 “吸水吸油”操作對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的影響。A，“吸水吸油”組淋巴結(jié)組織進(jìn)行吸水吸油操作，組織間隙小，皺褶現(xiàn)象較少見(jiàn)；B，非“吸水吸油”組淋巴結(jié)組織沒(méi)有進(jìn)行吸水吸油操作，組織間隙寬，出現(xiàn)大面積的皺褶現(xiàn)象；比例尺，300μmFig. 3 Effect of “water absorption and oil absorption method” on frozen section of lymph node tissue. A, in “water absorption and oil absorption” operation group, “water absorption and oil absorption” operation was performed for lymph node tissues, which showed small tissue gaps and rare wrinkles； B, in Non-”water and oil absorption “operation group, “water absorption and oil absorption” operation was not performed for lymph node tissue, with wide tissue gaps and large area of wrinkles； scale bar, 300μm

表1 淋巴結(jié)組織是否進(jìn)行“吸水吸油”操作3 項(xiàng)切片質(zhì)量得分Tab.1 Three indexes-based quality scores of the sections of lymph node tissue in two groups operated with or without the steps of “water absorption and oil absorption”

2 小淋巴結(jié)組織是否并列排列對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的影響

并列排列組與隨意放置組冷凍切片時(shí)效性比較：2 組冷凍切片的制片時(shí)間分別為（104.4±0.7）s和（106.4±0.8）s，制片時(shí)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞

0.05）。

2 組小淋巴結(jié)組織冷凍切片的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)得分結(jié)果見(jiàn)表2。并列排列組小淋巴結(jié)組織較平坦，皺褶較少，隨意放置組淋巴結(jié)組織皺褶面積較多，并列排列組無(wú)皺褶指標(biāo)得分高于隨意放置組，差異有

統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組無(wú)裂隙，無(wú)冰晶指標(biāo)得分相近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并列排列組3 項(xiàng)指標(biāo)得分≥8分有24 個(gè)冷凍頭，合格率為80%（24/30），隨意放置組3 項(xiàng)指標(biāo)均≥8 分有6 個(gè)冷凍頭，合格率為20%（6/30），2 組合格率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=21.60，P＜0.01）。

表2 小淋巴結(jié)組織是否并列排列的3 項(xiàng)切片質(zhì)量得分情況Tab.2 Three indexes-based quality scores of the sections of lymph node tissue in two groups with tissues arranged in parallel or in random

3 不同的冷凍切片機(jī)樣本頭溫度對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的影響

樣本頭溫度-20℃、-12℃、-30℃ 3 組冷凍切片時(shí)效性比較：3 組冷凍切片制片時(shí)間分別為(93.6±0.5)s、(142.1±0.8)s 和(129.0±1.0)s，溫度-12℃組、-30℃組與-20℃組冷凍切片的制片時(shí)間相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

圖4 冷凍切片機(jī)樣本頭溫度對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的影響。E，樣本頭溫度設(shè)置為-20℃的淋巴結(jié)冷凍切片組織間隙小，皺褶、冰晶現(xiàn)象少見(jiàn)；F，樣本頭溫度設(shè)置為-12℃的淋巴結(jié)冷凍切片出現(xiàn)大面積的皺褶現(xiàn)象；G，樣本頭溫度設(shè)置為-30℃淋巴結(jié)冷凍切片出現(xiàn)較大面積的裂隙(黑箭頭所示)、冰晶現(xiàn)象（紅箭頭所示）；比例尺，300μmFig.4 Effect of temperature settings of freezing microtome on frozen section of lymph node tissue. E, the frozen sections of lymph nodes with a temperature set at -20℃ showed small tissue gaps, few wrinkles and ice crystals； F, the lymph node frozen section with the sample head temperature set at -12℃ showed large area of wrinkles； G, the lymph node frozen section with the sample head temperature set at -30℃ showed a large area of cracks (indicated by black thearrow) and ice crystals appeared in the frozen section of lymph nodes (indicated by red arrow)； scale bar, 300μm

3 組不同冷凍切片機(jī)樣本頭溫度下淋巴結(jié)組織的冷凍切片質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)得分結(jié)果見(jiàn)表3。-20℃組組織間隙小，皺褶、冰晶現(xiàn)象較少見(jiàn)，-12℃組（圖4F）冷凍切片出現(xiàn)較大面積的皺褶現(xiàn)象，-30℃組（圖4G）切片則出現(xiàn)較大面積的裂隙、冰晶現(xiàn)象。 -20℃組3 項(xiàng)指標(biāo)得分≥8 分有28 個(gè)冷凍頭，合格率為93.3%（28/30）；-12℃組3 項(xiàng)指標(biāo)均≥8 分有4個(gè)冷凍頭，合格率為13.3%（4/30）；-30℃組3 項(xiàng)指標(biāo)均≥8 分有0 個(gè)冷凍頭，合格率為0%（0/30）。-12℃組、-30℃組2 組與-20℃組的合格率相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.57，52.50，P＜0.01）。

表3 不同的冷凍切片機(jī)樣本頭溫度下淋巴結(jié)組織3 項(xiàng)切片質(zhì)量得分情況Tab.3 Three indexes-based quality scores of the sections of lymph node tissue in three groups with different settings in sample head temperature of freezing microtome

討 論

冷凍切片是將組織快速冷凍成一定的硬度，切出薄片的過(guò)程[3]。病理醫(yī)師對(duì)可疑病變組織術(shù)中冷凍切片作出的初步診斷對(duì)外科手術(shù)醫(yī)師明確病變性質(zhì)、制定下一步的手術(shù)方案有極其重要的指導(dǎo)意義。以前哨淋巴結(jié)為例，冷凍切片檢查對(duì)診斷乳腺癌前哨淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移特異性較高，是一種較為可靠而快速的方法[4]。Ales-sandro 等[5]對(duì)137 例早期乳腺癌患者250枚前哨淋巴結(jié)冷凍切片檢查發(fā)現(xiàn)，冷凍切片對(duì)淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均為100%，宏轉(zhuǎn)移和微轉(zhuǎn)移的敏感性分別為83.3%和40%，指出前哨淋巴結(jié)術(shù)中冷凍切片可以較準(zhǔn)確判斷乳腺癌前哨淋巴結(jié)的癌轉(zhuǎn)移情況。乳腺癌患者依據(jù)淋巴結(jié)術(shù)中冷凍切片的結(jié)果來(lái)決定是否進(jìn)行腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)，其陽(yáng)性患者可通過(guò)一次的手術(shù)完成腋窩淋巴結(jié)清掃，從而避免二次手術(shù)的費(fèi)用負(fù)擔(dān)和手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)[6]。而淋巴結(jié)術(shù)中冷凍切片質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到病理醫(yī)師診斷的準(zhǔn)確率。

冷凍切片質(zhì)量的影響因素眾多，許多病理技術(shù)工作者為了提高冷凍制片的質(zhì)量進(jìn)行了各種條件的摸索。王玉環(huán)等[7]通過(guò)優(yōu)化乳腺組織取材大小、速凍方法、切片厚度等條件，發(fā)現(xiàn)取材大小為1×1×0.2cm～2×1.5×0.3cm，預(yù)先制作“帶墊”的托頭，切片厚度以5cm 及 6um 有利于提高乳腺冷凍制片的速凍效率、減少組織塊崩裂、減少冰晶。淋巴結(jié)組織組織結(jié)構(gòu)特殊，盡管病理操作規(guī)范要求取材醫(yī)師取材時(shí)盡量把淋巴結(jié)周?chē)闹救コ粘ＥR床工作發(fā)現(xiàn)，脂肪組織難以完全剔除，這些特征都決定了淋巴結(jié)組織冷凍切片較其他組織切片難度大得多。

“吸水吸油法”是在病理醫(yī)師取材完成后，由病理技師將組織放進(jìn)冷凍切片機(jī)箱體前在室溫下進(jìn)行的一項(xiàng)操作，其目的是將淋巴結(jié)組織表面的少量水分吸去并將脂肪組織中的脂滴輕輕擠出，盡量減少無(wú)法完全剔除的脂肪組織對(duì)淋巴結(jié)組織冷凍切片的干擾。因此作者采用 “吸水吸油”處理冷凍切片前的淋巴結(jié)組織，極大縮短了冷凍切片的時(shí)間，提高冷凍制片的質(zhì)量，且方法簡(jiǎn)便易行，降低患者在手術(shù)臺(tái)上因等待病理冷凍切片報(bào)告時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而引起并發(fā)癥的可能。但是，必須強(qiáng)調(diào)的是，“吸水吸油法”在滾動(dòng)按壓操作過(guò)程中，一定注意操作的力度，避免人為因素導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形態(tài)的改變。

在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)多枚淋巴結(jié)置于同一個(gè)速凍頭上時(shí)，淋巴結(jié)組織的擺放位置對(duì)冷凍切片的質(zhì)量也有一定的影響。放置組織冰凍前，應(yīng)視組織的形狀和走勢(shì)來(lái)放置，所謂“砍柴看柴勢(shì)”，若胡亂放置，就不能收到很好的效果。隨意放置淋巴結(jié)則組織之間容易相互干擾，多枚淋巴結(jié)并列排開(kāi)可以將淋巴結(jié)組織之間的干擾降到最低，用毛筆刷輕輕按壓，降低了切片卷起的概率，大大減少了淋巴結(jié)組織的皺褶現(xiàn)象。

速凍溫度是影響冷凍切片質(zhì)量的重要因素之一。不同組織冷凍切片溫度的調(diào)整原則是柔軟稚嫩富含水分的組織選擇較高的溫度，溫度過(guò)低容易造成切片成碎屑狀；較為致密富含脂肪的組織選擇較低的溫度，溫度過(guò)高組織堆積不能形成片狀[8]。冷凍溫度的設(shè)置根據(jù)組織的種類(lèi)、厚度、大小來(lái)調(diào)節(jié)，溫度的把控應(yīng)該量化：脂肪組織速凍最適溫度是-30℃～-25℃，淋巴結(jié)組織速凍最適溫度是-15℃～-10℃，兩者最適速凍溫度不一致[9]。作者將切片機(jī)箱體冷凍臺(tái)溫度設(shè)置在-25℃，待組織冷凍制成凍塊立即取下凍頭，以防因冷凍時(shí)間過(guò)久導(dǎo)致組織過(guò)硬出現(xiàn)裂隙。作者將冷凍切片機(jī)樣本頭溫度進(jìn)行調(diào)整，嘗試了不同的樣本頭溫度對(duì)淋巴結(jié)組織術(shù)中快速冷凍切片的影響。雖然對(duì)淋巴結(jié)組織進(jìn)行了“吸水吸油”操作，但淋巴結(jié)周?chē)闹窘M織不可能完全去除，因此選擇最佳的樣本頭冷凍溫度十分關(guān)鍵。當(dāng)樣本頭溫度設(shè)置于-12℃時(shí)，淋巴結(jié)組織凍好而脂肪組織未凍上，脂肪組織成泥狀，導(dǎo)致淋巴結(jié)組織冷凍切片出現(xiàn)大面積的皺褶，無(wú)法滿(mǎn)足鏡檢要求。組織含油脂多的時(shí)會(huì)促使冰點(diǎn)大幅下降，使組織結(jié)冰時(shí)間延長(zhǎng)，組織硬度下降，制片困難；當(dāng)樣本頭溫度設(shè)置于-30℃時(shí)，適合脂肪組織冷凍制片，但淋巴結(jié)組織因溫度過(guò)低切片呈碎屑狀，無(wú)法制片或出現(xiàn)大面積的裂隙，若將冷凍頭置于冷凍箱外復(fù)溫或者用手放置于組織上稍加熱后再切片，溫度的改變則會(huì)導(dǎo)致切片中出現(xiàn)大量的冰晶，影響病理診斷的準(zhǔn)確性。實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，當(dāng)樣本頭溫度設(shè)置于-20℃時(shí)淋巴結(jié)組織冷凍切片的時(shí)間明顯縮短，切片質(zhì)量也得到明顯提高。

綜上所述，淋巴結(jié)組織 “吸水吸油”操作、多枚淋巴結(jié)組織置于同一個(gè)冷凍頭上時(shí)將淋巴結(jié)組織并列排開(kāi)且設(shè)置冷凍切片機(jī)樣本頭溫度于-20℃，優(yōu)化這3 方面的條件能顯著提高淋巴結(jié)組織冷凍切片的制片效率與切片質(zhì)量，為術(shù)中病理診斷及手術(shù)方案的制定提供保障，值得廣為推廣。