楊金偉，楊 斌

（廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，廣西 南寧 530007）

茶葉是人們?nèi)粘Ｉ钪凶钪匾氖称泛捅＝∑分唬嗄陙硪恢北粡V泛飲用。研究表明，茶葉中的有效營養(yǎng)成分為茶多酚。茶多酚功效很多，例如，在較長時(shí)間內(nèi)可使食品保持原有營養(yǎng)水平和色澤，能夠防止食用油類、食品的腐敗變質(zhì)，同時(shí)消除異味。另外，茶多酚不僅用于配制茶味風(fēng)味飲料，還能抑制多種有益維生素的降解破壞，保證飲料中的營養(yǎng)成份[1]。所以茶多酚應(yīng)用前景廣闊，發(fā)展?jié)摿薮蟆?/p>

研究表明，茶多酚是一類以兒茶素為主體的多酚類化合物的復(fù)合體，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等[2]。茶多酚一方面具有抗菌消炎、降血脂、降壓、預(yù)防心腦血管疾病等功效，另一方面也具有較強(qiáng)的防癌抗癌和抗衰老作用，延緩衰老。利用科學(xué)高效的方法提取茶葉中的茶多酚是科研人員需要解決的問題，研究茶葉中茶多酚的提取工藝具有重要意義。目前常用的茶多酚測定方法有酒石酸亞鐵比色法、高錳酸鉀滴定法、高效液相色譜法、原子吸收法等[3]。多酚類物質(zhì)易溶于水，但是水卻不是提取多酚的最優(yōu)浸提溶劑。這就要求在提取時(shí)加入有機(jī)溶劑來破壞氫鍵提高多酚類物質(zhì)的提取率，因此筆者選用甲醇-水溶液來浸提多酚類物質(zhì)[4-5]。本文分別對(duì)幾種因素做了試驗(yàn)，檢驗(yàn)各種因素對(duì)茶多酚提取率的影響。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

儀器：紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、電子天平。

試劑：7.5%碳酸鈉、甲醇水（7∶3）、10%福林酚試劑、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000ug/mL）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線（沒食子酸工作液）的建立

分別移取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于 100mL容量瓶中，分別用水定容至刻度，得到濃度分別為0、10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL。利用分光光度計(jì)在765nm波長下用1cm比色皿測定其吸光度，測得不同濃度標(biāo)液對(duì)應(yīng)的吸光度分別為 0.000、0.109、0.219、0.326、0.428、0.540。以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

1.3 步驟

稱取0.2g左右的茶葉于10mL離心管中，加入5mL預(yù)先放入70℃水浴的甲醇水在70℃水浴中放置10min，中間不斷地?cái)嚢瑁岷罄鋮s，放入離心機(jī)中離心，提取上清液轉(zhuǎn)入10mL比色管中，殘?jiān)儆?mL甲醇水提取一次，最后定容至10mL，搖勻，過0.45μm膜。吸取1mL濾液用水定容至100mL。然后分別吸取沒食子酸工作液、水、茶葉濾液1.0mL于10mL比色管中，分別加入5.0mL福林酚試劑，搖勻，反應(yīng)5min，再加入4.0mL碳酸鈉溶液，搖勻，放置一定時(shí)間后，在765nm波長下，用1cm比色皿測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算茶多酚含量。

圖1 茶多酚標(biāo)液的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溫度對(duì)茶多酚含量的影響

稱取0.2g茶葉，分別加入5mL甲醇水，分別在50℃、60℃ 、70℃、 80℃ 水浴下提取兩次，在紫外分光光計(jì)下測定其吸光度，計(jì)算茶多酚含量，其結(jié)果分別為14.3%、17.8%、19.0%、18.2%。

結(jié)果表明，在一定范圍內(nèi)，隨著提取溫度的提高，茶多酚含量逐漸上升。從結(jié)果看出，當(dāng)提取溫度為60℃、70℃和80℃時(shí)，茶多酚含量為17.8%、19.0%和18.2%。即提取溫度超過70℃時(shí)，茶多酚含量逐漸下降。一般認(rèn)為，當(dāng)溫度為80℃時(shí)，提取試劑處于微沸狀態(tài)，高溫會(huì)導(dǎo)致茶多酚部分降解變性，故含量有所降低。所以選擇70℃水浴為最佳提取溫度。

2.2 不同濃度的提取液對(duì)茶多酚含量的影響

稱取0.2g茶葉，在70℃水浴下分別加入50%、60%、70%、80%的甲醇水提取兩次，在紫外分光光計(jì)下測定其吸光度，計(jì)算茶多酚含量，其結(jié)果分別為16.6%、17.2%、19.0%、19.2%。

結(jié)果表明，隨著提取液濃度的逐漸增加，茶多酚含量逐漸增加。從結(jié)果可以看出，當(dāng)提取液濃度達(dá)到70%和80%時(shí)，茶多酚含量分別為19%和19.2%，增加并不明顯，說明提取基本達(dá)到平衡。在實(shí)驗(yàn)中基于成本和減少試劑用量的考慮，故選擇70%的甲醇水作為最佳提取濃度。

2.3 不同的反應(yīng)時(shí)間對(duì)茶多酚含量的影響

稱取0.2g茶葉，在70℃水浴下加入70%的甲醇水提取兩次，測試液加入顯色劑后搖勻分別放置 30min、45min、60min、75min、90min 測定其吸光度，計(jì)算茶多酚含量，結(jié)果見表1。

表1 不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)應(yīng)茶多酚含量

結(jié)果表明，隨著反應(yīng)時(shí)間的逐漸延長，茶多酚含量逐漸增加，但是當(dāng)放置時(shí)間達(dá)到60min時(shí)，茶多酚含量達(dá)到最大，繼續(xù)延長放置時(shí)間，茶多酚含量反而下降。通過分析認(rèn)為，茶多酚的穩(wěn)定性不好，放置時(shí)間過長，易發(fā)生氧化變性，導(dǎo)致檢測的茶多酚含量下降。所以選擇時(shí)間60min為最佳放置時(shí)間。

3 結(jié)論

本文采用有機(jī)試劑提取茶葉中茶多酚，并通過做單因素實(shí)驗(yàn)選擇提取茶多酚的最佳實(shí)驗(yàn)條件。結(jié)果如下：1） 70℃水浴為最佳提取溫度，2） 70%的甲醇水為最佳提取濃度，3） 60min為茶多酚顯色最佳放置時(shí)間。隨著新型純化技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，通過研究篩選出純化茶多酚更合適的工藝條件，爭取將茶多酚產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健等行業(yè)。