肖 琎，董李學(xué)，張 鑫，周 鑫，李?lèi)?ài)軍，鄭百芹

(1.唐山市食品藥品綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，河北唐山 063000；2.河北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)創(chuàng)新中心，河北唐山 063000)

犢牛斷奶前的干物質(zhì)采食量和日增重對(duì)犢牛生長(zhǎng)發(fā)育、瘤胃發(fā)育和終生產(chǎn)奶量密切相關(guān)（Soberon等，2012）。犢牛哺乳期間，單純依靠采食牛乳不僅不能滿足生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需要，而且不利于瘤胃發(fā)育，可能引起瘤胃角質(zhì)化不全，進(jìn)而影響瘤胃上皮細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收（吳志強(qiáng)，2016）。開(kāi)食料可以給犢牛提供充分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育和瘤胃發(fā)育（張乃峰等，2010）。近年來(lái)研究表明，犢牛開(kāi)食料中補(bǔ)充優(yōu)質(zhì)的干草可以增加犢牛干物質(zhì)采食量和日增重，促進(jìn)瘤胃發(fā)育和瘤胃微生物區(qū)系的建立，促進(jìn)犢牛生長(zhǎng)，然而關(guān)于犢牛開(kāi)食料中苜蓿干草添加量的研究相對(duì)較少且無(wú)定論（Coverdale等，2014；Castells等，2012；Hill等，2010）。因此，本試驗(yàn)旨在研究比較開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草對(duì)犢牛生長(zhǎng)發(fā)育、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，為開(kāi)食料中苜蓿干草的適宜添加量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn) 于2018年3月至2018年6月在某奶牛場(chǎng)進(jìn)行本次試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇45頭剛出生的中國(guó)荷斯坦母犢牛，于出生后1 h內(nèi)灌服4 L初乳，6 h后再次灌服4 L初乳。犢牛出生后第2天，每天飼喂兩次常乳，每次2 L。犢牛出生后第3天，將犢牛轉(zhuǎn)移到犢牛島，單籠飼養(yǎng)。犢牛3～10日齡，每天飼喂兩次常乳，每次2 L；犢牛11～50日齡，每天飼喂兩次常乳，每次3 L；犢牛51～60日齡，每天飼喂一次常乳，每次2 L；在61～80日齡停止飼喂常乳，僅飼喂開(kāi)食料。犢牛7日齡開(kāi)始飼喂開(kāi)食料，犢牛14日齡，開(kāi)食料中開(kāi)始添加苜蓿干草。犢牛自由采食開(kāi)食料和自由飲水。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將45頭剛出生的中國(guó)荷斯坦母犢牛按照體重進(jìn)行分組，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，將犢牛分配到3個(gè)處理組中，每組15頭犢牛。對(duì)照組犢牛開(kāi)食料中不添加苜蓿干草，試驗(yàn)組Ⅰ犢牛開(kāi)食料中添加10%苜蓿干草（干物質(zhì)基礎(chǔ)），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛開(kāi)食料中添加20%苜蓿干草（干物質(zhì)基礎(chǔ)）。

表1 開(kāi)食料原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 試驗(yàn)日糧 犢牛開(kāi)食料的原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1所示。苜蓿干草進(jìn)行切割處理，平均長(zhǎng)度為3.5 mm，苜蓿干草長(zhǎng)度分布如下：長(zhǎng)度＞ 18 mm，1.5±0.4%；長(zhǎng)度 8～18 mm，（25.0±2.5）% ； 長(zhǎng) 度 1.18 ～ 8 mm，（36.2±1.2）%，長(zhǎng)度＜ 1.18 mm，（37.3±0.5）%。

1.5 樣品采集與試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 干物質(zhì)采食量與犢牛體重測(cè)定 每天記錄犢牛開(kāi)食料的采食量（稱量投料量和第二天早晨飼喂前的剩料量進(jìn)行計(jì)算）。分別于犢牛出生（1日齡）、斷奶（60日齡）和試驗(yàn)結(jié)束（80日齡），在早晨飼喂?fàn)倥Ｇ?，稱量犢牛體重。結(jié)合牛乳的干物質(zhì)含量和開(kāi)食料的干物質(zhì)含量，計(jì)算日均干物質(zhì)采食量和飼喂效率（增重/試驗(yàn)天數(shù)）。

1.5.2 開(kāi)食料樣品采集與營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 每隔10 d收集一次開(kāi)食料樣品，放于-20℃冰箱保存，待試驗(yàn)結(jié)束后將所有的開(kāi)食料樣品解凍均勻混合，于65℃條件下烘48 h后制成風(fēng)干樣品，粉碎后過(guò)1 mm篩，按照四分法取樣，保存待測(cè)。營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定指標(biāo)包括干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、總磷（AOAC，1990）和中性洗滌纖維（Van Soest，1991）。

1.5.3 消化試驗(yàn) 于試驗(yàn)最后3 d采用全收糞法，通過(guò)直腸取糞收集糞便，進(jìn)行消化試驗(yàn)。測(cè)定開(kāi)食料和糞便中的酸不溶灰分作為內(nèi)源指示劑（Van Keulen和 Young，1977），測(cè)定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。

1.5.4 瘤胃液采集與發(fā)酵參數(shù)測(cè)定 于犢牛斷奶（60日齡）和試驗(yàn)結(jié)束（80日齡），在早晨犢牛采食開(kāi)食料3 h后使用瘤胃插管法取瘤胃液，使用4層紗布過(guò)濾，立即測(cè)定瘤胃液pH。另取10 mL瘤胃液，加入25%偏磷酸3 mL，于-20℃保存待測(cè)。使用氣相色譜法測(cè)定瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度和乙酸、丙酸、丁酸濃度。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2所示。由表2可以看出，各組犢牛出生體重和斷奶體重差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)組Ⅱ和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛的結(jié)束體重分別比對(duì)照組高6.25%和2.95%（P＜0.05），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛的結(jié)束體重比試驗(yàn)組Ⅰ高3.21%（P＜0.05）。開(kāi)食料中苜蓿干草的添加量對(duì)犢牛斷奶前的平均日增重?zé)o顯著影響（P＞0.05），顯著提高了犢牛斷奶后和試驗(yàn)全期的平均日增重（P＜0.05），以試驗(yàn)組Ⅱ犢牛具有最大的平均日增重（P＜0.05）。開(kāi)食料中添加不同含量的苜蓿干草對(duì)犢牛斷奶前的總干物質(zhì)采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05），顯著提高了犢牛斷奶后和全試驗(yàn)期的總干物質(zhì)采食量（P＜0.05）。試驗(yàn)全期，試驗(yàn)組Ⅱ和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛的總干物質(zhì)采食量分別比對(duì)照組高38.04%和28.26%（P＜0.05），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛的總干物質(zhì)采食量比試驗(yàn)組Ⅰ高7.63%（P＜0.05）。犢牛開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草對(duì)犢牛斷奶前、斷奶后和全試驗(yàn)期的飼喂效率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響

表4 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

2.2 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響 試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3所示。由表3可以看出，犢牛開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草對(duì)犢牛日糧干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和中性洗滌纖維的含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表3 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?????????????表觀消化率的影響???????????%

2.3 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4所示。由表4可以看出，犢牛開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草對(duì)斷奶犢牛和斷奶后犢牛的瘤胃液pH具有顯著影響（P＜0.05）。犢牛斷奶時(shí)，試驗(yàn)組Ⅱ和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛瘤胃液pH分別比對(duì)照組高21.80%和9.40%（P＜0.05），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛瘤胃液pH比試驗(yàn)組Ⅰ高11.34%（P＜0.05）。犢牛斷奶20 d后，試驗(yàn)組Ⅱ和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛瘤胃液pH分別比對(duì)照組高20.81%和9.39%（P＜0.05），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛瘤胃液pH比試驗(yàn)組Ⅰ高10.44%（P＜0.05）。犢牛開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草對(duì)犢牛瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度、乙酸濃度、丙酸濃度、丁酸濃度無(wú)顯著影響（P＞0.05）。犢牛斷奶時(shí)，開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草有提高瘤胃液乙酸/丙酸的趨勢(shì)（P=0.08）；在犢牛斷奶20 d后，在開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿干草顯著提高了犢牛瘤胃液乙酸/丙酸（P＜0.05）。試驗(yàn)組Ⅱ犢牛和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛的瘤胃液乙酸/丙酸分別比對(duì)照組奶牛高12.35%和18.52%（P＜0.05），試驗(yàn)組Ⅱ犢牛和試驗(yàn)組Ⅰ犢牛的瘤胃液乙酸/丙酸無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 Hill等（2010）研究結(jié)果表明，斷奶犢牛開(kāi)食料中添加干草降低了平均日增重。Coverdale等（2004）研究開(kāi)食料類(lèi)型和無(wú)芒雀麥干草添加量對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響發(fā)現(xiàn)，在犢牛開(kāi)食料中添加7.5%和15%的干草可以顯著提高犢牛斷奶前和斷奶后的體重，顯著提高犢牛斷奶后和全試驗(yàn)期的平均日增重，顯著提高犢牛斷奶后的飼喂效率，而7.5%和15%干草添加組犢牛只有斷奶后平均日增重差異顯著，其他指標(biāo)差異不顯著，犢牛開(kāi)食料中添加不同水平的干草對(duì)瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度無(wú)顯著影響。Beiranvand等（2014）、王立斌（2013）、Castells等（2012）、Khan等（2011）研究結(jié)果表明，犢牛開(kāi)食料中添加苜蓿干草顯著增加了犢牛斷奶后的干物質(zhì)采食量和日增重。本試驗(yàn)中，犢牛開(kāi)食料中添加10%和20%的苜蓿干草顯著增加了犢牛體增重和干物質(zhì)采食量，而且與添加劑量呈線性相關(guān)，本試驗(yàn)結(jié)果與EbnAli等（2016）的研究結(jié)果類(lèi)似。EbnAli等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，犢牛開(kāi)食料中添加10%的苜蓿干草顯著增加斷奶前和斷奶后的干物質(zhì)采食量，而對(duì)平均日增重?zé)o顯著影響。而Nemati等（2016）的研究結(jié)果表明，犢牛開(kāi)食料中添加12.5%和25%的苜蓿干草顯著提高犢牛的干物質(zhì)采食量，增加日增重。本試驗(yàn)中，犢牛開(kāi)食料中苜蓿干草添加到20%時(shí)，顯著增加犢牛的干物質(zhì)采食量和日增重，與Nemati等（2016）的結(jié)果類(lèi)似。研究發(fā)現(xiàn)，開(kāi)食料的不同類(lèi)型、原料組成、干草來(lái)源和長(zhǎng)度大小均會(huì)影響犢牛的生長(zhǎng)性能（Mirzaei等，2015），這可能是影響犢牛開(kāi)食料中干草添加劑量的因素。本試驗(yàn)中，苜蓿干草的添加劑量達(dá)干物質(zhì)基礎(chǔ)的20%對(duì)犢牛的生長(zhǎng)性能具有顯著的改善作用。

3.2 不同水平苜蓿添加量對(duì)犢牛日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 EbnAli等（2016）研究指出，犢牛開(kāi)食料中添加10%的苜蓿干草對(duì)日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)得到了類(lèi)似的試驗(yàn)結(jié)果，犢牛開(kāi)食料中添加10%和20%的苜蓿干草均對(duì)犢牛日糧的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率無(wú)顯著影響。這一結(jié)果對(duì)應(yīng)了犢牛開(kāi)食料中添加苜蓿并不能提高犢牛的飼喂效率（Mirzaei等，2015；Terré 等，2013；Castells等，2012）。本試驗(yàn)中，開(kāi)食料中添加10%和20%的苜蓿干草顯著提高了犢牛斷奶時(shí)和斷奶后的瘤胃液pH，而且與添加劑量呈線性相關(guān)。這一結(jié)果與（Nemati等，2016；王立斌，2013；Castells等，2012；Khan等，2011）瘤胃液pH與瘤胃微生物對(duì)有機(jī)物的發(fā)酵速度有關(guān)。研究表明，犢牛早期采食粗飼料可以增加瘤胃微生物種類(lèi)和數(shù)量。因此，犢牛開(kāi)食料中添加苜?？赡芡ㄟ^(guò)改變瘤胃微生物區(qū)系調(diào)節(jié)瘤胃pH。此外，苜蓿干草與開(kāi)食料相比，可以增加犢牛咀嚼時(shí)間和采食頻率，使進(jìn)入瘤胃的唾液增加，中和瘤胃液部分酸，提高瘤胃液pH。本試驗(yàn)中，開(kāi)食料中添加不同水平的苜蓿并沒(méi)有改變瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度，這與Nemati等（2016）、Terré 等（2013） 和 Suárez等（2007）的研究結(jié)果一致。而王立斌（2013）研究發(fā)現(xiàn)，給犢牛飼喂苜蓿干草顯著提高了瘤胃液乙酸濃度。本試驗(yàn)中，犢牛開(kāi)食料中并沒(méi)有增加瘤胃液乙酸濃度，但顯著提高了乙酸/丙酸，這一結(jié)果與 Nemati等（2016）、Castells等（2012）和Yang等（2001）的研究結(jié)果類(lèi)似。瘤胃液中乙酸發(fā)酵主要來(lái)源于粗飼料和纖維分解菌的分解作用，低pH抑制纖維分解菌活性和數(shù)量，降低乙酸與丙酸比例（Grant等，1990）。

在王立斌（2013）的試驗(yàn)中，苜蓿干草單獨(dú)飼喂?fàn)倥?，而在本試?yàn)中苜蓿干草是切短后與開(kāi)食料混合，兩者對(duì)瘤胃pH的影響不同，可能會(huì)造成瘤胃纖維分解菌數(shù)量不同，進(jìn)而引起乙酸濃度差異。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在犢牛開(kāi)食料中添加經(jīng)過(guò)切短的苜蓿干草可以顯著提高犢牛的生長(zhǎng)性能，改善瘤胃發(fā)酵功能，苜蓿干草的添加量可以達(dá)到20%。