羅 婧,周兆紅,王偉偉

（1.甘肅省天水市秦州區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，741000；2.河南省乘風(fēng)動物保健技術(shù)研究所，450000）

豬瘟，俗稱爛腸瘟，是由黃病毒科豬瘟病毒屬的豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。一旦發(fā)病，會給養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴(yán)重的危害，被世界衛(wèi)生組織（OIE）列為A 類傳染病。雖然在《2017年的國家動物疫病強制免疫計劃》已不再將該病列入國家強制免疫的病種之列，但仍在我國一類動物疫病的病種名錄之中，可見其一旦發(fā)病將帶來的危害程度，目前尚無有效藥物對該病進行治療，所以預(yù)防免疫仍然是預(yù)防該病的重要手段之一。而如何監(jiān)測豬瘟免疫抗體水平，及時了解和分析免疫失敗的原因，實驗室檢測發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。本次研究通過對甘肅省天水市秦州區(qū)（以下均簡稱秦州區(qū)）2016年-2018年的16 各鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 個規(guī)模養(yǎng)殖場和32 個行政村的散養(yǎng)戶進行了監(jiān)測，了解豬瘟免疫情況，為秦州區(qū)今后的豬瘟免疫提供參考依據(jù)[1]。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 2016年-2018年秦州地區(qū)16 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 家養(yǎng)殖場和32 個行政村，血清樣品8790份血清樣品；

1.2 試驗器材及耗材 10-100μL 單道移液器，10-100μL8 道移液器，96 孔110。微量反應(yīng)板。

1.3 試劑及材料，豬瘟正向間接血凝試驗抗原，陽性對照血清，陰性對照血清，稀釋液，待檢血清。判定標(biāo)準(zhǔn)為當(dāng)檢測血清的抗體滴度≥1：32，判定為合格，小于則視為不合格。

1.4 檢測方法及依據(jù) 豬瘟免疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗進行操作，本方法依據(jù)是參照《豬瘟診斷技術(shù)規(guī)程》NY／SY156-2000，將待檢血清（56℃水浴滅活30min），在血凝板每孔加入稀釋液50μL，再取待檢血清、陽性對照血清、陰性血對照清各50μL 加入每排（每板8 排）的第1孔，然后用8 道移液器對每排的第1 孔進行反復(fù)吹吸10-12 次，進行倍比稀釋至第9 孔棄去50μL，陽性對照血清、陰性血對照清倍比稀釋至第12 孔棄去50μL。然后各孔加入血凝抗原25μL（用前充分搖勻），將血凝板置于微量振蕩器上振蕩1～2min，封板膜封板，室溫或37℃下靜止1.5～2h，亦可室溫過夜。揭掉封板膜，將血凝板放在白紙上，在對照血清檢測結(jié)果均成立的前提下，記錄待檢血清檢測結(jié)果，接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價達(dá)到1：32（第5 孔），呈現(xiàn)“＋＋”凝集為陽性，待檢血清≤1：16 為陰性。

2 結(jié)果分析

2.1 不同年份的豬瘟抗體水平 見表1。

表1 2016-2018年秦州區(qū)不同年份豬瘟免疫抗體水平比較

從表1的統(tǒng)計結(jié)果顯示可以看出，2016年-2018年的抗體水平分別是73.04%、82.01%和89.39%，逐年有明顯的上升趨勢。

2.2 不同規(guī)模養(yǎng)殖戶豬瘟免疫抗體 見表2。

表2 2016年-2018年秦州區(qū)不同規(guī)模養(yǎng)殖戶豬瘟免疫抗體水平比較

從表2統(tǒng)計結(jié)果顯示可以看出，2016年-2018年的規(guī)模場的抗體水平為87.75%，散養(yǎng)戶的抗體水平為71.79%，規(guī)模場與養(yǎng)殖戶之間豬瘟免疫抗體存在明顯差距，需要引起足夠的重視。

3 結(jié)論與討論

本次試驗共對秦州區(qū)2016年-2018年的8790 份豬血清進行豬瘟免疫抗體進行了檢測，豬瘟免疫抗體的合格數(shù)為7177 份，平均合格率為81.65%，總體水平較為理想，但縱向比較來看，規(guī)模養(yǎng)殖場的豬瘟免疫抗體水平為87.75%，散養(yǎng)戶的只有71.79%，相差15.96 個百分點，極大的拉低了秦州區(qū)的防疫水平，這是造成秦州區(qū)豬瘟免疫抗體水平不是十分理想重要因素。原因分析得出，秦州區(qū)散養(yǎng)戶防疫意識淡薄，對于防疫抱有僥幸心里，認(rèn)為發(fā)病的可能性極小，不防疫不會對養(yǎng)豬造成多大的損失，有的甚至拒絕配合防疫員開展免疫工作，這給防疫工作造成了極大的困難。

隨著近年來秦州區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的不斷壯大，規(guī)模場管理水平有了明顯的提高，規(guī)模養(yǎng)豬場有了專業(yè)技術(shù)人員進行飼養(yǎng)管理，還聘請專業(yè)的豬場獸醫(yī)制定嚴(yán)格免疫程序進行免疫，同時還會定期的采集樣品送至秦州區(qū)獸醫(yī)實驗室對免疫抗體水平進行檢測監(jiān)督，因此，在2018年規(guī)模場的豬瘟免疫抗體水平達(dá)到了96.02%（1738/1810）。散養(yǎng)戶養(yǎng)殖條件有限，管理水平低，主要靠防疫員來進行防疫，而秦州區(qū)的防疫員隊伍中大多數(shù)防疫員為半路出家，專業(yè)知識和操作技能較規(guī)模場的駐場獸醫(yī)水平還有一定的差距，但隨著秦州區(qū)今年來不斷加強防疫隊伍建設(shè)，組織專業(yè)技術(shù)人員對防疫員進行定期的專業(yè)知識和實踐技能培訓(xùn)，因而，秦州區(qū)2018年的豬瘟免疫抗體水平從2016年的60.8%上升至了80.00%，上升了20.8個百分點。這對秦州區(qū)的防疫工作是一個極大的鼓舞。

《2017年國家動物疫病強制免疫計劃》中，將高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟不再列入強制免疫計劃，高致病性豬藍(lán)耳病在秦州區(qū)也不再進行免疫，而豬瘟免仍在進行，這也是豬瘟免疫抗體水平提高的重要原因之一。因為在春秋兩季集中防疫期內(nèi)同時進行高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟的免疫時，有臨床實踐表明，高致病性豬藍(lán)耳病病毒處于活躍期時，會對豬瘟免疫抗體存在抑制和干擾[2]。因此，高致病性豬藍(lán)耳病免疫退出秦州區(qū)春秋兩季及集中免疫的歷史舞臺，也變向的提高了秦州區(qū)的豬瘟抗體免疫水平。