張穎怡，李良，馬安德，周政政

（1.南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生檢驗檢疫系，廣東 廣州 510515；2.中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，廣東 廣州 510080）

甲基苯丙胺（methamphetamine，MAMP），又名去氧麻黃堿、甲基安非他明，其鹽酸鹽為透明冰狀晶體，在我國俗稱“冰毒”，屬于苯丙胺類興奮劑（amphetaminetype stimulants，ATS），是我國規(guī)定管制的精神活性物質(zhì)[1]。苯丙胺類物質(zhì)易濫用成癮且副作用大，同時也是艾滋病傳播的高危影響因素，給社會公共安全造成極大的危害。據(jù)聯(lián)合國毒品和犯罪問題辦公室公布的《2017年世界毒品問題報告》[2]，2015年全球共有2.5億人使用毒品，其中吸毒成癮者約為2 950萬人（占全球成年人口的0.6%）；另據(jù)我國國家禁毒委員會辦公室發(fā)布的《2017年中國毒品形勢報告》[3]，截至2017年底，全國現(xiàn)有吸毒人員255.3萬名（不含戒斷三年未發(fā)現(xiàn)復(fù)吸人數(shù)、死亡人數(shù)和離境人數(shù)），濫用合成毒品人員153.8萬名，占60.2%，全國破獲制造毒品案件597起，繳獲毒品23.3噸，同比分別上升1%和18.8%。因濫用毒品導(dǎo)致暴力攻擊、自殺自殘、毒駕肇事等案件急劇增多。

從化學(xué)成分來看，MAMP等（圖1）新型合成類毒品化學(xué)結(jié)構(gòu)中均有一個不對稱手性中心，存在2個對映異構(gòu)體，如MAMP的2個對映異構(gòu)體分別為S-（+）-MAMP和R-（-）-MAMP，其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用、毒性及代謝機(jī)制均有較大差異，S-（+）在精神方面的作用是R-（-）構(gòu)型的5倍，是制毒者和販毒者的主要走私產(chǎn)品[4]。目前，MAMP主要的化學(xué)合成路線[5]包括3條，即S-（+）-MAMP的主要合成前體為1R，2S-（-）-麻黃素與1S，2S-（+）-偽麻黃素，而R-（-）-MAMP的主要合成前體為 1S，2R-（+）-麻黃素與 1R，2R-（-）-偽麻黃素，外消旋體則由芐基甲基酮經(jīng)還原胺化或劉卡特-瓦拉赫反應(yīng)（Leuckart-Wallach reaction）合成。

圖1 甲基苯丙胺化學(xué)結(jié)構(gòu)式（*手性碳原子）

隨著國內(nèi)外警方對中樞神經(jīng)興奮作用最強(qiáng)的S-（+）-MAMP合成前體的打擊力度持續(xù)加大，外消旋體以及R-（-）-MAMP開始逐漸出現(xiàn)。如我國學(xué)者張建新等[4]統(tǒng)計了2007—2008年在北京、天津、石家莊、成都4個城市繳獲的MAMP，發(fā)現(xiàn)混有不同比例對映異構(gòu)體的MAMP接近10%，這與國內(nèi)另一學(xué)者WANG等[6]的統(tǒng)計結(jié)果相符；LEE等[5]則統(tǒng)計了1994—2005年韓國所繳獲的433份樣品，發(fā)現(xiàn)1996年以前，S-（+）-MAMP是繳獲的主要毒品構(gòu)型，而從1997年開始出現(xiàn)混有R-（-）-MAMP的樣品，比例達(dá)到21%。2005年，混有R-（-）-MAMP的毒品案件迅速上升到50%。隨著國家對S-（+）-MAMP制備原料的嚴(yán)格監(jiān)管與打擊，混有R-（-）-MAMP的甲基苯丙胺逐漸增多，但其對映異構(gòu)體理化性質(zhì)相近，普通方法難以區(qū)分，因此其手性拆分顯得極為重要。研究結(jié)果[7]發(fā)現(xiàn)，一些臨床藥物如治療帕金森的處方藥司來吉蘭口服后吸收迅速，代謝物包括R-（-）-甲基苯丙胺、R-（-）-苯丙胺、去甲司來吉蘭等。目前，在吸毒、“毒駕”鑒定實際案例中，經(jīng)常發(fā)生甲基苯丙胺陽性的嫌疑人聲稱服用了司來吉蘭等臨床藥物。由于無法進(jìn)一步證實陽性目標(biāo)物的來源，從而使案件陷入困境[7]。

甲基苯丙胺的兩個對映異構(gòu)體藥理活性和藥代動力學(xué)特征差異明顯，其對人體的損傷也不盡相同[4]。本文重點對MAMP的手性分離方法及其對映異構(gòu)體致生物體急慢性中毒可能造成的損傷情況進(jìn)行闡述，以期對苯丙胺類毒品的研究、鑒定工作給予一定參考。

1 MAMP的手性分離研究進(jìn)展

1.1 手性試劑衍生化法

手性試劑衍生化法又稱間接法。衍生化是一種利用化學(xué)變換將難于分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相似但易于分析的物質(zhì)。化學(xué)衍生化法的主要目的是增加組分的穩(wěn)定性，改善被測組分的色譜行為，增加被測物的檢測靈敏度和選擇性，提高對光學(xué)異構(gòu)體分離的能力。衍生化法可以在非對映環(huán)境下實現(xiàn)對映異構(gòu)體的分離，因此在早期的MAMP對映異構(gòu)體分離試驗中得到廣泛的應(yīng)用[8]。其優(yōu)點在于，可以相對自由地選擇反應(yīng)條件，但弊端是容易在衍生過程中引入雜質(zhì)，同時前處理過程較為復(fù)雜。用于MAMP對映異構(gòu)體結(jié)構(gòu)分離的手性衍生化試劑（chiral derivatization reagent，CDR）主要有 N-三氟乙酰-1-脯氨酰氯[N-（trifluoroacetyl）-prolylchloride，L-TPC][9-10]、R-（+）-α-甲氧基-α-三氟甲基苯乙酸（R-（+）-αmethoxy-α-trifluoromethylphenylacetic acid，MTPA）[11]以及Marfey試劑[12-14]。該法與各種檢測手段如氣相色譜（gas chromatography，GC）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）、高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）等相結(jié)合，實現(xiàn)了MAMP對映異構(gòu)體的分離。

1.1.1 L-TPC

最常用的CDR是三氟乙酰-脯氨酰氯。柱前衍生化已被用于苯丙胺和甲基苯丙胺的定性和定量分析中，并與GC或GC-MS相結(jié)合，實現(xiàn)了對映異構(gòu)體的分離。

1994年，曾蘇[9]就利用GC-MS對D-甲基苯丙胺對映體進(jìn)行了分析。他們采用水相衍生化技術(shù)，以L-TPC為CDR，在常規(guī)非手性氣相色譜柱上分離甲基苯丙胺對映異構(gòu)體，并用于實際樣品的鑒別和定量分析。采用該水相衍生化的優(yōu)點是可減少消旋化、縮短分析周期和減少干擾，同時非對映體對生成的重現(xiàn)性也很好。沈敏等[10]也使用L-TPC衍生化法來分離甲基苯丙胺對映體，與曾蘇的方法相比，共同點在于樣品的衍生化步驟一致，不同之處是不僅建立了GCMS的方法，更細(xì)化了利用GC來鑒定甲基苯丙胺對映異構(gòu)體的方法，如采用不同的檢測器（氫火焰離子檢測器和氮磷檢測器），并利用建立的方法進(jìn)一步研究了R/S-MAMP在尿中代謝物的變化。

由此可見，早期與GC相結(jié)合的甲基苯丙胺對映體分離方法都是利用TPC進(jìn)行衍生化來完成，且多為使用L-TPC來衍生化R/S-MAMP。該法的優(yōu)點在于，反應(yīng)較為緩和。然而，L-TPC衍生化的反應(yīng)產(chǎn)物不穩(wěn)定，并不適用于對映異構(gòu)體的定量檢測[8]。

1.1.2 MTPA

使用MTPA制備苯丙胺和甲基苯丙胺的酰胺非對映異構(gòu)體可實現(xiàn)這些對映異構(gòu)體的分離。2017年，WEI?等[11]發(fā)表了新型苯丙胺衍生物的對映異構(gòu)體的GC-MS和HPLC研究。對于GC-MS，他們使用MTPA或（1R）-（61）-薄荷醇氯甲酸酯[（1R）-（61）-menthylchloroformate prior]來進(jìn)行衍生化；對于HPLC手性分離，使用LiChrospher 100 RP-18e柱和硫酸化的β-環(huán)糊精作為手性選擇劑加入流動相中。兩種方法均成功地完成了對映體的分離，但利用手性添加劑與HPLC結(jié)合的方法峰形和分離效果都較差。而MTPA衍生化法效果較好，在控制條件的前提下，可以實施對映異構(gòu)體的分離，但對反應(yīng)條件的要求較為苛刻[8]。

1.1.3 Marfey試劑

常用的衍生化試劑還有Marfey試劑。在1984年，Marfey發(fā)明了使用HPLC來分離氨基酸絕對構(gòu)型的方法，自此引入手性試劑1-氟-2，4-二硝基苯基-5-L-丙氨酰胺（1-fluoro-2-4-dinitrophenyl-5-L-alanine amide，F(xiàn)DAA），并命名為Marfey試劑。L-TPC基本上是與GC-MS相結(jié)合使用，而Marfey法與L-TPC不同，大多與液相色譜法相結(jié)合。

2016年，SHU等[14]將衍生化法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）相結(jié)合，來測定人毛發(fā)中的甲基苯丙胺對映體的構(gòu)成。他們利用Marfey試劑來衍生化毛發(fā)中的甲基苯丙胺，同時采用C18Kinetex分析柱，成功實現(xiàn)了毛發(fā)中甲基苯丙胺對映異構(gòu)體的分離鑒定與方法建立。此法可測定甲基苯丙胺對映異構(gòu)體組合物，而不需要對每種對映異構(gòu)體定量，因此非常適合進(jìn)一步研究以前測定的甲基苯丙胺陽性病例，同時可以對長期藥物暴露進(jìn)行評估。此外，NEWMEYER等[13]和BORG等[12]都對唾液中的S-（+）-MAMP進(jìn)行了研究，利用Marfey試劑對MAMP進(jìn)行衍生化，并利用LC-MS/MS成功開發(fā)了口腔液中S-（+）-MAMP分析方法。

Marfey法的優(yōu)點在于，成本和危險性都較低。與S-TPC法對比，對含有同樣濃度MAMP的毛發(fā)，保證了方法的精密度（符合樣品檢測需求），且Marfey法的信噪比更高[14]。衍生化法在早期應(yīng)用廣泛，但某些手段由于研究年代較久，效果較現(xiàn)今的手段差，如CHINAKA等[15]利用毛細(xì)管電泳法進(jìn)行分析，所有對映體的檢出限高至0.1g/L，在此不再贅述。

1.2 手性固定相法

近年來，越來越多人利用手性固定相（chiral stationary phase，CSP）來分離對映異構(gòu)體[5，16-21]。與衍生法相比，利用CSP分離對映體的優(yōu)勢在于樣品的前處理過程更簡單。CSP是利用對映體與手性色譜柱之間的立體作用差異而進(jìn)行的，其中起關(guān)鍵作用的為CSP內(nèi)在填料。雖然傳統(tǒng)上使用間接法也能完成甲基苯丙胺的對映異構(gòu)體分離，但通過CSP和LC-MS/MS來分離甲基苯丙胺對映異構(gòu)體更可靠。利用CSP法的優(yōu)點在于：樣品處理簡單，無須衍生化，同時對流動相的無特定要求。此外，分析過程更便捷，適合長期且大批量的手性研究。缺點是CSP的手性識別能力較專一，同一色譜柱分析的樣品類型較為局限，通用性不大，且較為昂貴。

1.2.1 CSP

1.2.1.1 大環(huán)糖肽型CSP

WANG等[6]通過采用大環(huán)糖肽型色譜柱（ChirobioticTMV2色譜柱，填料為萬古霉素）建立的LC-MS/MS法在15min內(nèi)成功分離了人尿中苯丙胺與甲基苯丙胺的對映異構(gòu)體。該方法線性為0.05～50.00mg/L，檢出限（detection limit，LOD）為 0.02 mg/L，定量限（quantification limit，LOQ）為0.05 mg/L。該方法已成功用于分離法醫(yī)案例中毒品初篩陽性的尿液樣品中苯丙胺與甲基苯丙胺的對映體。

WANG等[6]研究結(jié)果表明，使用直接稀釋法和ChirobioticTMV2色譜柱與LC-MS/MS組合是一種簡單、快速、準(zhǔn)確的方法，可以用于同時測定尿液中MAMP和苯丙胺對映異構(gòu)體。同年，他們利用同樣的方法對甲基苯丙胺晶體和片劑進(jìn)行了對映體分離[20]。

另外，徐澤瓊等[21]也利用同樣的色譜柱，對水中苯丙胺類物質(zhì)對映體的比例進(jìn)行了分離檢測，采用同位素內(nèi)標(biāo)法建立了廢水中苯丙胺與甲基苯丙胺的對映體的分析方法，流動相使用的是V甲醇∶V冰醋酸∶V氨水=100∶0.1∶0.025，使苯丙胺與甲基苯丙胺對映體在16 min內(nèi)達(dá)到較好的分離，樣品處理采用固相萃取，該結(jié)果在0.5～300.0 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性，LOD均為0.5mg/L，方法回收率在85%～120%。

1.2.1.2 纖維素型CSP

CASTRIGNANò等[16]提出了一種新型的多殘留選擇性方法，利用CHIRALPAK?CBH高效液相手性色譜柱（日本Daicel公司），對廢水中56種藥物生物標(biāo)記物進(jìn)行了對映體分析研究，其中包含了苯丙胺及甲基苯丙胺前體物質(zhì)。對比三個不同的手性分析柱，分別為CHIRALPAK?CBH column［纖維素型CSP，選擇劑為纖維素-三（3，5-二氯苯基氨基甲酸酯）］、CHIROBIOTIC V柱（大環(huán)糖肽型CSP，選擇劑為萬古霉素）及CHIROBIOTIC T柱（大環(huán)糖肽型CSP，選擇劑為替考拉寧）。利用離子交換，氫鍵和疏水相互作用的組合，CHIRALPAK?CBH手性液相色譜柱與CHIROBIOTIC V柱相比，在分離和解析苯丙胺類化合物方面選擇性更好，而CHIROBIOTIC T柱可實現(xiàn)苯二氮藍(lán)卓類藥物的對映異構(gòu)體分離?？紤]到上述因素，最終因分離效果最佳，采用CBH柱進(jìn)行分析。

此外，SEGAWA等[19]利用超臨界流體色譜法（supercritical fluid chromatography，SFC）與對映體選擇性纖維素填充柱成功分離了S/R-MAMP，使用CHIRALPAK IC-3/SFC和CHIRALCEL OJ-3/SFC（日本Daicel公司）進(jìn)行研究。柱壓、流速、柱溫和共溶劑比例等參數(shù)對提高分離度起著關(guān)鍵作用，特別是堿性添加劑NH3的濃度極大地改變了分辨率，SFC中堿性添加劑的主要作用是減少溶質(zhì)的基本官能團(tuán)與固定相的硅烷醇基團(tuán)之間不需要的相互作用。在手性固定相中，溶質(zhì)和固定相之間的空間相互作用對理解保留機(jī)制起著關(guān)鍵作用。因此，推測過量的添加劑擾亂了空間相互作用并降低了對映體的拆分，可以通過控制流動相中的添加劑濃度來調(diào)節(jié)不同分子的對映體之間的選擇性和分離度。

1.2.2 免疫膜柱

除了使用特有的手性色譜分析柱外，LUA等[18]自行研發(fā)了免疫膜柱（immunoaffinity chromatography，IAC），并與LC-MS相結(jié)合，同時從尿液樣品中提取和分離MAMP的對映異構(gòu)體。該團(tuán)隊自行制備IAC和分離MAMP對映異構(gòu)體的方法[17]，先用HPLC分離MAMP，再利用免疫測定或GC-MS測定每個流出的組分，而IAC法則在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)。

IAC對苯丙胺對映體中固定化抗體的依賴性取決于流動相的pH值。固定化的抗體可以結(jié)合中性pH值下的S-（+）-MAMP或R-（-）-MAMP，并分別在pH值為5.6和3.5下釋放S-（+）-MAMP和R-（-）-MAMP。該研究方法具有以下特點：可以選擇性地提取尿液樣品中的MAMP，并通過IAC直接同時分離，而無需任何預(yù)衍生化、預(yù)萃取或任何預(yù)先提取，同時具有良好的精度和準(zhǔn)確性。與LUA發(fā)表的方法相比，該方法可以一步完成分析物萃取、色譜分離和質(zhì)量檢測等功能。通過與免疫測定相比較，該法可以避免由于樣品中存在R-（-）-MAMP而導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。值得關(guān)注的是，該研究中使用的IAC在4年中已經(jīng)運行超過1 000次，證明IAC具有良好的耐用性和可重用性。

2 MAMP的毒性作用

MAMP的兩個對映異構(gòu)體具有不同的藥理和毒理作用，因此MAMP的分離鑒別才顯得尤為重要。其中R-（-）（左旋）一般影響交感神經(jīng)系統(tǒng)，幾乎不影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，主要作用于外周，收縮血管的作用，多用于醫(yī)療方面，一些臨床藥物含有或在體內(nèi)可代謝成MAMP。如抗帕金森藥司來吉蘭[7]的主要成分為司來吉蘭，其代謝產(chǎn)物有R-（-）-MAMP和R-（-）-苯丙胺。該構(gòu)型的毒性研究較少，主要用于治療方面的研究，在一定范圍內(nèi)的劑量可在臨床上安全應(yīng)用[22]，但高劑量R-（-）-MAMP產(chǎn)生的毒性效果類似于S-（+）-MAMP，不同點在于其興奮性和成癮性都較低且短暫[23]。

而S-（+）型（右旋）具有強(qiáng)烈的中樞神經(jīng)系統(tǒng)刺激作用，毒性很強(qiáng)，具有成癮性。其濫用對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的刺激作用主要表現(xiàn)為增強(qiáng)的警覺性，以及產(chǎn)生強(qiáng)烈的欣悅感。根據(jù)研究[23]，MAMP的外消旋體在成癮性及興奮性等方面與右旋相似，同時濫用者間流通的致癮性較強(qiáng)的MAMP多為右旋構(gòu)型或外消旋體，因此毒性研究都基于右旋或外消旋進(jìn)行研究。

傳統(tǒng)的MAMP毒性損傷機(jī)制，主要是由于MAMP介導(dǎo)的氧化應(yīng)激作用在早期引起多巴胺轉(zhuǎn)運體（dopamine transporter，DAT）的改變，促使細(xì)胞內(nèi)的多巴胺（dopamine，DA）水平增加，同時降低DA能神經(jīng)末梢和血清素（5-羥色胺）能神經(jīng)末梢的抗氧化能力[24-26]。此外，多項研究[27-34]還表明，MAMP對心臟、免疫系統(tǒng)及其他器官也具有顯著的毒性損害作用。

2.1 對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用

MAMP具有精神依賴性強(qiáng)、復(fù)吸率高和神經(jīng)毒性大等特點，可以增強(qiáng)嚙齒動物血腦屏障的滲透性[24]。長期大量使用可對神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生明顯的毒性作用，可影響小鼠大腦的結(jié)構(gòu)和功能，高濃度MAMP可破壞包括皮層、海馬區(qū)、下丘腦、小腦和紋狀體的血腦屏障[35]。

MAMP可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞自噬[24]。體內(nèi)實驗[25，36-37]證明，MAMP中毒的大鼠腦多巴胺神經(jīng)能細(xì)胞（N27細(xì)胞）內(nèi)自噬泡結(jié)構(gòu)增多并有大量自噬體的存在，隨著MAMP的注射時間增加，自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Ⅱ（autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ，LC3-Ⅱ）和自噬基因Beclin 1（BECN1）的表達(dá)水平逐漸增高，并引起多巴胺神經(jīng)元內(nèi)大量自噬泡結(jié)構(gòu)的形成，且自噬泡結(jié)構(gòu)的形成具有時間依賴性。此外，MAMP可誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SK-N-SH）和腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（PC12）細(xì)胞自噬和促進(jìn)Beclin 1和LC3-Ⅱ的表達(dá)[38-40]。綜上，MAMP可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞自噬，且高劑量MAMP誘導(dǎo)的自噬可引起機(jī)體發(fā)生自噬性細(xì)胞死亡從而加重MAMP神經(jīng)毒性。

此外，蔣雷等[41]研究表明，急性暴露于MAMP會增加小鼠的刻板行為，同時降低小鼠的空間識別能力，原因為MAMP可多途徑引起神經(jīng)元損傷，激活MAPKs通路，使磷酸化水平增高。

2.2 對心血管系統(tǒng)的毒性作用

MAMP 可以顯著影響心血管系統(tǒng)功能[28，30，33-34]，包括心血管內(nèi)皮功能，同時具有心肌毒性。MAMP對心血管系統(tǒng)的損害主要表現(xiàn)在以下幾點[28]。從臨床表現(xiàn)上，MAMP所致的心臟損害主要為以血壓和心率改變?yōu)樘禺愋员憩F(xiàn)的一系列癥狀，同時心臟結(jié)構(gòu)繼發(fā)改變。從病理學(xué)上，MAMP中毒主要的損害為心肌纖維化、心肌壞死及心肌梗死等。從法醫(yī)學(xué)上，MAMP的急性暴露致死主要原因為心律失常和室顫，慢性中毒所導(dǎo)致的死亡原因較為復(fù)雜，以心血管慢性疾病為主。除了單純的MAMP毒性[32]之外，反常的交感神經(jīng)興奮也會加重MAMP對心肌的毒性作用[27]。李明等[30]指出，MAMP可抑制單胺氧化酶的活性，使多巴胺和去甲腎上腺素的代謝受到抑制，還可抑制細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2和干擾素（interferon，INF）-g的表達(dá)，從而產(chǎn)生對心臟的一系列影響。

此外，張帆等[33]研究表明，血管內(nèi)皮功能損害是引起心血管系統(tǒng)損害的重要機(jī)制之一，長期吸毒者血液中一氧化氮（NO）較健康對照組顯著降低、血液中內(nèi)皮素（endothelin，ET）-1較健康對照組顯著增高。

2.3 對免疫系統(tǒng)的毒性作用

長期濫用MAMP可對身體多個系統(tǒng)造成損害，除了前文提及的神經(jīng)系統(tǒng)以及心血管系統(tǒng)之外，免疫系統(tǒng)受損害較為突出。MAMP可改變機(jī)體屏障結(jié)構(gòu)，如為免疫應(yīng)答“第一道防線”的皮膚，吸食MAMP 2h后就可在汗液中檢出，大量使用者皮膚出現(xiàn)“蟻走感”，臨床上主要表現(xiàn)為潰瘍，嚴(yán)重者出現(xiàn)化膿及蜂窩織炎。此外，MAMP影響神經(jīng)細(xì)胞炎癥反應(yīng)，此反應(yīng)機(jī)制與前文中神經(jīng)毒性及氧化應(yīng)激機(jī)制相同。除了對機(jī)體屏障及炎癥細(xì)胞有影響，MAMP還對先天免疫及獲得性免疫應(yīng)答有抑制作用。由于MAMP呈弱堿性，通過堿化巨噬細(xì)胞中的酸性細(xì)胞器，抑制其吞噬作用及抗原提呈作用，繼而使單核細(xì)胞（樹突細(xì)胞）和巨噬細(xì)胞的殺菌能力下降。

在蔣富貴等[29]的研究中指出，長期吸食MAMP對機(jī)體免疫功能有著抑制作用。MAMP主要作用于各種淋巴細(xì)胞，同時對部分血細(xì)胞有著不同程度的抑制作用。該研究中，MAMP組T淋巴細(xì)胞亞群［分化群（cluster of differentiation，CD） 3+、CD4+、CD4+/CD8+］、B細(xì)胞、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、補體C3、補體C4較正常對照組降低。此結(jié)果提示，MAMP對人體的免疫功能有明顯的抑制作用。T淋巴細(xì)胞對細(xì)胞免疫的啟動、淋巴細(xì)胞的活化起著至關(guān)重要的作用，MAMP的藥物毒性代謝產(chǎn)物抑制了T細(xì)胞的活性和增殖能力，從而抑制免疫功能。這可能是長期使用MAMP更易于發(fā)生感染的原因之一。

3 展 望

近年來，隨著S-（+）-MAMP的濫用，同時其對映異構(gòu)體R-（-）-MAMP以及消旋體的增多，關(guān)于兩種構(gòu)型的分離技術(shù)以及損傷研究顯得尤為重要。在分離手段方面，可見間接法歷史較久，比較成熟，是大多數(shù)對映體分析的主流途徑，并且在近幾年內(nèi)無論是在衍生試劑還是檢材類型（不僅限于研究血液類檢材，已逐漸開發(fā)對唾液及毛發(fā)等檢材的研究方法）方面都有了新的突破。而直接法在近幾年內(nèi)也有了新的突破。該法的一大優(yōu)勢在于樣品前處理部分，大量縮短了前處理的時間，精簡了步驟，更有利于高效完成MAMP對映體的分離，使用LC-MS/MS法來進(jìn)行分離，方法的精密度及回收率也較好。此外，在MAMP的毒性作用研究方面，也有了新的進(jìn)展。研究結(jié)果[24]表明，MAMP的毒性作用已經(jīng)不僅局限于傳統(tǒng)的機(jī)制，在新興機(jī)制領(lǐng)域的探索也越來越多，發(fā)現(xiàn)MAMP更多的急慢性毒性作用。由于人們對手性對映異構(gòu)體的認(rèn)識不斷深化，對于甲基苯丙胺對映體的拆分方法將有更為成熟和高效的處理方法，同時對其兩個構(gòu)型的毒性作用機(jī)制以及差別研究能更深入地進(jìn)行探索，并在法醫(yī)毒物學(xué)及法醫(yī)病理學(xué)方面提供更為可靠的技術(shù)支持。